柳 存,鐵富萍,張海瑾
(1.青海省海晏縣青海湖鄉畜牧獸醫站,青海 海晏812200;2.青海省海晏縣畜牧獸醫站,青海 海晏 812200)
近年來隨著青海省海晏縣畜牧業的不斷發展,綿羊的一些傳染病在縣境內時有發生,特別是出現以母羊流產、死胎、公羊睪丸腫大等侵害生殖系統為特征的一類病尤為突出。其發生與流行已嚴重影響和阻礙了海晏縣養羊業的健康發展,而且給廣大牧民群眾造成了較大的經濟損失。因此,為了查清青海省海晏縣綿羊群中流產原因是否與布魯桿菌、衣原體、弓形蟲、新孢子蟲病有關以及這4 種病在海晏縣境內的感染情況,為今后制定出疫病的有效綜合防制措施提供科學依據,我們對青海省海晏縣的流產較為嚴重的綿羊群進行了血清學檢測,報告如下。
1.1 被檢血清 被檢血清均采自青海省海晏縣自然放牧的流產較為嚴重綿羊群,采血時均空腹、頸靜脈采集,采集后擺成斜面,置4 ℃冰箱5 h 后,放在室溫待血清析出后收集血清,-20 ℃冷凍保存待檢。
1.2 診斷試劑
1.2.1 布魯桿菌的抗原(生產批號:200802)、陽性血清(生產批號:2008)、陰性血清(生產批號:2008),中國獸醫藥品監察所生產。
1.2.2 衣原體IHA 抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液,均購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所,批號分別為090323、090323、090323 和 090323(090218)。
1.2.3 弓形蟲IHA 抗原、陰性血清、陽性血清、稀釋液,均由中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產,批號分別是:20090512、20090421、20090412和20090409。
弓形蟲的ELISA 診斷抗原P30 由日本國家原生動物疾病研究控制中心提供,青海省畜牧科學院所生物技術研究室保存。
1.2.4 新孢子蟲的GST-NcSAG1t 蛋白在以前的研究中進行了克隆、表達和純化;陰、陽性標準血清,均為日本國家原蟲中心玄學南博士惠贈,青海省畜牧科學院所生物技術研究室保存。
1.3 操作與判定(1)布魯桿菌試管凝集反應按照部頒規程[1-2]進行操作及判定;(2)衣原體、弓形蟲間接血凝試驗(IHA)均按診斷液使用說明書進行,待檢血清效價達到或超過1∶16 和1∶64 判為陽性;(3)弓形蟲、新孢子蟲的ELISA 的判定標準均為兩孔待檢樣品的平均值等于或大于0.1 為陽性,低于0.1 為陰性。
見表1。

表1 青海省海晏縣綿羊布魯桿菌、衣原體、弓形蟲、新孢子蟲抗體檢測結果
2.1 布魯桿菌用試管凝集反應(SAT)檢測了110份綿羊血清,未檢出陽性血清。
2.2 衣原體采用間接血凝試驗(IHA)檢測了314份綿羊血清,檢出27 份陽性,陽性率為8.6%。其中200 份生產母牛血清中檢出20 份陽性,陽性率為10%,114 份種公羊血清中檢出7 份陽性,陽性率為6.14%。
2.3 弓形蟲的檢測結果(1)弓形蟲采用間接血凝試驗(IHA)共檢測綿羊血清110 份,陽性血清4份,陽性率為3.64%;(2)弓形蟲采用重組蛋白P30作為ELISA 診斷抗原共檢測綿羊血清110 份,檢出陽性血清14 份,陽性率為12.73%。
2.4 用犬新孢子蟲的重組蛋白GST-NcSAGlt 作為ELISA 診斷抗原檢測的94 份被檢綿羊血清中,共檢出N.caninum 抗體陽性血清4 份,陽性率為4.26%。
3.1 血清學檢測結果表明,青海省海晏縣綿羊群中衣原體、弓形蟲、新孢子蟲的平均感染率為6.64%,布魯桿菌病的感染率為零,而衣原體和弓形蟲病的感染率都比較高,弓形蟲病的感染率高達12.73%,新孢子蟲病的感染相對較低,這說明該縣綿羊群中衣原體、弓形蟲、新孢子蟲都有感染,尤其弓形蟲病的感染較為嚴重,要引起有關部門的足夠重視,做好綜合防治工作。
3.2 布魯桿菌病曾經是引起牲畜流產的主要原因,但是經過多年的防治,青海省海晏縣的布魯桿菌病已經達到穩定控制區標準[3]。這次檢測沒有檢出陽性,充分肯定了本縣綿羊布魯桿菌病的防治工作取得的成績和效果。但今后仍然要加強對布魯桿菌病的檢測工作,從而防止布魯桿菌病的發生。
3.3 通過本次的檢測結果可以說明,引起青海省海晏縣綿羊流產的原因與衣原體、弓形蟲、新孢子蟲的感染有一定聯系,主要原因可能是由衣原體和弓形蟲感染引起的。因為據資料記載,衣原體、弓形蟲、新孢子蟲都能引起懷孕母羊的流產[4-8]。
3.4 隨著畜牧業經濟迅速發展,畜禽及其產品的交易日益頻繁,因此加大了疫病的傳播機會。我們要加強對布魯桿菌、衣原體、弓形蟲、新孢子蟲、隱孢子蟲的檢疫工作,在種公羊的引進和串換時防止和杜絕引進感染有疫病的羊只,定期對海晏縣全縣的綿羊群進行以上幾種病的血清學檢測,檢出陽性應采取措施,及時進行淘汰凈化處理。
3.5 加大宣傳力度,普及疫病防制知識,通過廣播電視、手機短信微信、發放宣傳材料等多種形式,加大對廣大農牧民群眾有關以上4 種人獸共患病的流行、臨床癥狀、傳播方式、防治措施及其對人的危害性等方面的知識宣傳和防范措施。搞好環境衛生、飲食衛生、個人衛生等防護制度,凈化畜群,從而減少這4 種病對人獸健康的危害和威脅。