楊 清
(安徽省宿州市動物衛生監督所,安徽 宿州 234000)
高絡合碘溶液是通過特定工藝將碘、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按一定比例絡合成水溶性高分子化合物,再與增強劑、穩定劑等復合而成。其中有85%以上的絡合碘可解聚成游離碘而發揮殺菌效力,對多種病原微生物如病毒、細菌、芽孢、真菌、原蟲等具有很好的殺滅效果[1-4]。當前碘制劑主要作為畜禽舍環境消毒、水體消毒或體表消毒[5-6],很少有碘制劑供動物口服后的安全性評價。高絡合碘溶液中碘與PVP 的絡合比高,毒性小,且性質溫和,刺激性小,可廣泛應用于獸醫臨床。然而,碘對病原微生物的殺滅作用沒有選擇性,因此,評估口服高絡合碘溶液后對仔豬腸道菌群的影響對指導臨床用藥有非常重要的意義。
1.1 材料
1.1.1 試驗藥物 0.5%高絡合碘溶液,自制,規格為500 mL/瓶,生產批號為190404。
1.1.2 試驗動物 健康杜長大三元仔豬24 頭,30日齡,公母各半。試驗前適應性飼養1 周,試驗期間,自由采食和飲水。
1.1.3 試驗試劑 BS 培養基、MRS 培養基、MAC培養基及EC 培養基,500 g/瓶,購自青島高科園海博生物技術有限公司。
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗分組 30 日齡健康杜長大三元仔豬24頭,隨機分為4 組,公母各半,每組6 頭。將高絡合碘溶液用潔凈飲用水按相應比例稀釋后按10 mL/頭灌服,每天2 次,連灌3 d??瞻讓φ战M灌服相同體積的生理鹽水。
1.2.2 考察指標 試驗開始后每天觀察各組精神狀態以及排便情況。試驗開始前(0 d)每組試驗豬無菌采集直腸糞便做細菌分離檢查。最后1 次給藥第2 天(4 d),每組試驗豬采集直腸糞便進行細菌培養計數,統計糞便中大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌和腸球菌的含菌量。結束給藥后的第7 天(11 d)同樣方法采集直腸糞便進行細菌分離計數。
1.2.3 樣本采集及檢測 取直腸糞便后放入已滅菌干燥的10 mL 離心管中,4 ℃保存,備用。取0.5 g于10 mL 的滅菌離心管中,加入無菌生理鹽水4.5 mL,充分混勻后,吸取0.5 mL 于盛有4.5 mL 無菌生理鹽水的離心管中依次進行10 倍稀釋。細菌數量用平板菌落計數法在37 ℃下培養24~48 h 后進行菌落計數,以每克腸道內容物中細菌個數的對數(lg CFU)/g 表示。大腸桿菌培養使用MAC 瓊脂培養基,腸球菌培養使用EC 培養基,乳酸桿菌培養使用MRS 培養基,雙歧桿菌培養使用BS 培養基。
1.3 統計分析 試驗數據采用SPSS16.0 軟件統計處理,結果以平均數±標準差表示。
2.1 高絡合碘溶液對仔豬糞便形態的影響 給藥期間各組試驗豬只精神狀態、采食及飲水等均無異常。給藥前后各組豬只的糞便均呈干燥、團塊狀,未見有腹瀉。
2.2 高絡合碘溶液對仔豬腸道菌群的影響 從表1 可以看出,給藥前各組之間的各種菌群數量差異不顯著(P>0.05)。給藥后第4 天和第11 天的細菌分離培養計數結果顯示,同一菌群的不同劑量組之間差異不顯著(P>0.05)。
動物腸道中的正常菌群是重要的非特異性防御屏障,對于某些入侵的病原微生物具有明顯的抵御作用。正常菌群彼此之間保持著一種動態平衡,與宿主的正常生理功能有著密切的關系。大腸桿菌和乳酸桿菌為腸道中正常菌群,其中乳酸桿菌可產生類抗生素物質、乳酸,降低腸道pH 值,既可抑制病原微生物的生長繁殖,又能促進腸道中其他厭氧菌的生長繁殖,是動物機體抵抗疾病的一道天然屏障[7-8]。

表1 給藥前后對仔豬腸道菌群的影響 (n=6)
本試驗結果顯示,試驗期間各組豬只均未見任何異常表現。不同時期點內采樣的檢測結果顯示,高絡合碘溶液仔豬口服后對腸道菌群(腸桿菌、腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌)變化無影響,各劑量組之間及給藥前后和停藥期相比均差異不顯著(P>0.05)。綜合結果表明,高絡合碘溶液在125 mg/L~500 mg/L 劑量范圍內使用,每天2 次,連灌3 d,對仔豬腸道菌群無影響,可安全使用。