血小板計(jì)數(shù)儀器法異常報(bào)警疑難問題分析與解決

尹繼梅

（邳州市人民醫(yī)院 江蘇 邳州 221300）

在日常工作中血常規(guī)檢查是絕大多數(shù)患者必查項(xiàng)目，也是初步診斷基礎(chǔ)檢查，具有很大實(shí)用性。而血小板就是血常規(guī)檢查中重要指標(biāo)之一。目前血小板檢查對(duì)于臨床上如再生障礙性貧血、急性白血病[1]、出血性疾病具有致關(guān)重要性作用，同時(shí)對(duì)于疾病鑒別診斷以及合理用藥也具有非常重要的意義，特別對(duì)于化療病人、需要手術(shù)的病人都具有決定性意義。如何得到可靠的結(jié)果，是檢驗(yàn)者追求的目標(biāo)。血小板檢測(cè)結(jié)果如何也受到了廣泛關(guān)注[2]。

隨著科學(xué)的發(fā)展血細(xì)胞分析儀自動(dòng)化程度也越來越高，如今即使是最高級(jí)的血細(xì)胞分析儀對(duì)病人病理狀態(tài)的血細(xì)胞分析也只能是一種過篩手段，尚不能取代顯微鏡檢查。分析儀法計(jì)數(shù)血小板仍然存在著很多干擾因素，血小板計(jì)數(shù)是否準(zhǔn)確無(wú)誤也是醫(yī)務(wù)工作者致力研究的問題。由于血小板具有粘附、聚集等自身生理特點(diǎn)，所以說血小板計(jì)數(shù)更容易受很多因素影響[3]。

如何利用高效率儀器為臨床服務(wù)，解決儀器檢測(cè)過程出現(xiàn)報(bào)警異常提示問題，同時(shí)要注意在血小板檢測(cè)過程中出現(xiàn)不同異常報(bào)警問題，如何判斷結(jié)果是否真實(shí)有效是檢驗(yàn)者面臨的重要問題。

目的是排除干擾，分析解決異常報(bào)警提示，保證測(cè)出血小板結(jié)果的準(zhǔn)確，分析檢測(cè)結(jié)果的有效性，為臨床提供可靠依據(jù)，以便為病人更好的治療。

本論文對(duì)血液檢測(cè)過程中血細(xì)胞分析儀法血小板計(jì)數(shù)出現(xiàn)異常報(bào)警與手工法血小板計(jì)數(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)比較與總結(jié)，以便得出可靠結(jié)果為臨床服務(wù)，從而比較儀器法與手工法相關(guān)性，在實(shí)際操作中找到規(guī)律，以便找出解決問題辦法，排除可疑結(jié)果提高正確檢測(cè)率。

1.資料與方法

現(xiàn)對(duì)2017年—2018年52例分析儀法檢測(cè)血小板過程中出現(xiàn)異常報(bào)警提示符號(hào)的血標(biāo)本進(jìn)行研究分析。標(biāo)本來源：本院就診患者標(biāo)本以及EDTA-K2抗凝的靜脈血。共52例，男26例，女26例。儀器與試劑：XS-500i血球分析儀、OLYMPUS高倍顯微鏡、計(jì)數(shù)池。XS-500i試劑盒、EDTA-K2抗凝濃度均依據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）[4]的要求方法進(jìn)行配制，血小板稀液冰箱保存。實(shí)驗(yàn)方法：本院用XS-500i血細(xì)胞分析儀對(duì)患者血標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)檢驗(yàn)，之后任意抽取血小板計(jì)數(shù)結(jié)果有警示提示的樣本，再進(jìn)行血小板手工計(jì)數(shù)（即用手指末稍采血取樣，用高倍顯微鏡計(jì)數(shù)，血小板稀釋液0.38ml加20ul血液混合，靜置10-15分鐘充液鏡檢計(jì)數(shù)血小板，由經(jīng)驗(yàn)豐富二名檢驗(yàn)員進(jìn)行各三次，取其平均值）和涂片鏡檢，將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析[5-6]。

本科使用的是XS-500i血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板，結(jié)果有提示報(bào)警的血標(biāo)本通過復(fù)查可發(fā)現(xiàn)各種異常情況，包括血小板相互聚集、微小血塊、微小紅細(xì)胞及其碎片、巨大血小板、血小板大小不一、血小板稀疏少量等。根據(jù)復(fù)查的結(jié)果，然后進(jìn)行分組討論分析儀法與手工計(jì)數(shù)法檢測(cè)比較分析，查出報(bào)警異常提示原因，并及時(shí)進(jìn)行分析解決。根據(jù)出現(xiàn)情況不同，大體分為五種，具體分析如下。

2.結(jié)果

2.1 血小板聚集組血細(xì)胞分析儀法與手工計(jì)數(shù)血小板法的對(duì)照分析

血小板聚集組血細(xì)胞分析儀法和手工血小板計(jì)數(shù)法的對(duì)照，差別性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=10.493，t0.05=2.019，t＞t0.05，P＜0.05），見表1。

表1 血小板聚集型血細(xì)胞分析儀法與手工血小板計(jì)數(shù)法的對(duì)照分析

2.2 血小板大小不同組血細(xì)胞分析儀法與手工血小板計(jì)數(shù)法的對(duì)照比較

血小板大小不同組分析儀法與手工計(jì)數(shù)法的對(duì)照比較，差異性沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)上意義（當(dāng)t=0.05時(shí)，t0.05=2.041，t＜t0.05，P＞0.05），見表2。

表2 血小板大小不同組血細(xì)胞分析儀法與血小板手工計(jì)數(shù)法的對(duì)照比較

2.3 紅細(xì)胞碎片及小細(xì)胞似血小板組血細(xì)胞分析儀法與血小板手工計(jì)數(shù)法的對(duì)照比較

紅細(xì)胞碎片及小紅細(xì)胞似血小板組分析儀法與手工計(jì)數(shù)法的對(duì)照，差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.588，t0.05=2.144，t＞t0.05，P＜0.05），見表3。

表3 似血小板樣紅細(xì)胞碎片及小細(xì)胞組血細(xì)胞分析儀法與血小板手工計(jì)數(shù)法的對(duì)照比較

2.4 血小板稀疏組血細(xì)胞分析儀法與手工計(jì)數(shù)血小板法的對(duì)照比較

血小板稀疏組血細(xì)胞分析儀法（PLT低于50×109）與手工血小板計(jì)數(shù)法的對(duì)照比較，差異性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.336，t0.05=2.073，t＜t0.05，P＞0.05），見表4。

表4 血小板稀少組血細(xì)胞分析儀法與手工計(jì)數(shù)血小板法的對(duì)照比較

2.5 鏡檢未見明顯異常組血細(xì)胞分析儀法與手工血小板計(jì)數(shù)法的對(duì)照比較

顯微鏡檢查未見明顯異常組血細(xì)胞分析儀法與手工計(jì)數(shù)血小板法的對(duì)照結(jié)果，差異性沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（t=0.494，t0.05=2.072，t＜t0.05，P＞0.05），見表5。

表5 鏡檢未見明顯異常組分析儀法與人工計(jì)數(shù)法的對(duì)照分析

2.6 血小板血細(xì)胞分析儀法與手工計(jì)數(shù)血小板法差異性對(duì)照比較分析

將以上數(shù)據(jù)進(jìn)行歸納總結(jié)，結(jié)果見表6。結(jié)果顯示用分析儀法血小計(jì)數(shù)出現(xiàn)報(bào)警信號(hào)的標(biāo)本，復(fù)查的檢驗(yàn)結(jié)果有顯著性差異的占47%，無(wú)顯著性差異的占53%。

表6 52例血小板分析儀法計(jì)數(shù)異常提示的與手工計(jì)數(shù)法分析對(duì)照

3.討論

儀器法計(jì)數(shù)血小板出現(xiàn)異常報(bào)警提示還需要檢驗(yàn)人員及時(shí)復(fù)查，掌握?qǐng)?bào)警提示真正原因，得出正確檢測(cè)結(jié)果，為臨床提供可靠依據(jù)，服務(wù)于病人。

XS-500i型血細(xì)胞分析儀是在2～20fl范圍內(nèi)對(duì)血小板計(jì)數(shù)的，依據(jù)血小板大小體積與計(jì)數(shù)的多少進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)還提供血小板參考直方圖，此型血細(xì)胞分析儀提供一條原始數(shù)據(jù)曲線圖，同時(shí)也提供了另一條是0～40fl的電子擬合曲線圖。若檢測(cè)出來的結(jié)果無(wú)電子擬合曲線圖呈現(xiàn)，若預(yù)警提示信號(hào)出現(xiàn)在血小板計(jì)數(shù)前，應(yīng)該注意了這時(shí)提示檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，這時(shí)應(yīng)該當(dāng)機(jī)立斷地進(jìn)行復(fù)查，先用血細(xì)胞分析儀復(fù)查排除干擾，如依舊出現(xiàn)前邊現(xiàn)象，再進(jìn)一步涂片染色復(fù)檢、人工計(jì)數(shù)確定檢驗(yàn)結(jié)果。在對(duì)52例分析儀法血小板計(jì)數(shù)有報(bào)警提示信號(hào)出現(xiàn)的標(biāo)本進(jìn)行手工復(fù)查，結(jié)果復(fù)查顯示有聚集的血小板、也有大小懸殊的血小板、還有紅細(xì)胞碎片的或小紅細(xì)胞的疑似血小板的等情況，這也提示從事檢驗(yàn)工作的要處處留心，把檢驗(yàn)工作做實(shí)、做細(xì)，為臨床提供可靠、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，以便更好地為臨床服務(wù)。

本實(shí)驗(yàn)有38%標(biāo)本顯微鏡鏡檢看到不同程度的血小板聚集，因而造成血小板檢查結(jié)果偏低，血小板計(jì)數(shù)使用血細(xì)胞分析儀法若PLT低于100×109/L，首先考慮是否是抽血不暢造成血小板的聚集，這時(shí)務(wù)必要重新抽血復(fù)查，而復(fù)查的血小板檢驗(yàn)結(jié)果為正常參考范圍，這也給檢驗(yàn)人員提個(gè)醒遇到此種報(bào)警提示是因血小板凝集影響所致。出現(xiàn)這種情況有可能穿刺不順、或組織液混入，也有可能是采血過程操作緩慢，也有可能是抗凝劑與血液比例不當(dāng)，也有存在著混勻不充分、不及時(shí)所致，而致使血小板粘附聚集，因而血小板計(jì)數(shù)使用的血細(xì)胞分析儀法檢測(cè)的結(jié)果偏低，也是臨床常見原因之一[7]，血小板體積（MPV）增加，血小板直方圖尾部抬高。而有的血標(biāo)本在顯微鏡下可見到緡錢樣凝集，出現(xiàn)血小板聚集情況，可能為冷球蛋白所為，有報(bào)警信號(hào)提示，這時(shí)也出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)值偏低的。也有一些是腎移植病人由于自身原因及用藥所致而是血小板聚集，儀器法計(jì)數(shù)偏低。還有些惡性腫瘤病人血小板升高聚集的機(jī)制還不明確，Bozkurt等，認(rèn)為聚集在腫瘤周圍；高凝性血液病人也會(huì)出現(xiàn)聚集情況。臨床上病人的多樣化，病情的復(fù)雜化，這就需要我們進(jìn)一步探討研究與學(xué)習(xí)。

本次結(jié)果發(fā)現(xiàn)有15%例標(biāo)本鏡檢大小不一血小板，有巨大血小板，也有小血小板等異常情況。不過用血細(xì)胞分析儀法對(duì)血小板計(jì)數(shù)的檢測(cè)影響很小，但可見PDW（血小板分布寬度）增大，血小板直方圖呈現(xiàn)出明顯右移現(xiàn)象。而血小板計(jì)數(shù)血細(xì)胞分析儀法與手工法血小板計(jì)數(shù)比較，沒有顯著差異性。出現(xiàn)血小板大小不一的情況，除自身原因，也有可能與人的生理周期有關(guān)，也有可能與臨床用藥有關(guān)，也有人認(rèn)為與實(shí)驗(yàn)操作有關(guān)而引起血小板的腫脹、變形。

本次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)9%的標(biāo)本復(fù)檢時(shí)，排除正常紅細(xì)胞MCV正常范圍，發(fā)現(xiàn)鏡檢數(shù)量不等小紅細(xì)胞及紅細(xì)胞碎片，而致使血細(xì)胞儀法檢測(cè)MPV（平均血小板體積）增高，致使PLT計(jì)數(shù)假性增多。血小板血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)一個(gè)高界標(biāo)（10～30fl），一個(gè)低界標(biāo)是（2～6fl），它們存在交叉范圍25～30fl，因而呈現(xiàn)出提示報(bào)警信息，血小板直方圖向右移并伴隨尾部上抬，皆無(wú)擬合曲線，小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片體積低于25fl，血細(xì)胞分析儀法將小紅細(xì)胞及紅細(xì)胞碎片計(jì)作血小板了，因而導(dǎo)致血小板數(shù)量偏高，因此血細(xì)胞分析儀法計(jì)數(shù)血小板與手工法計(jì)數(shù)血小板對(duì)照分析具有差異顯著性。

經(jīng)復(fù)查鏡檢血小板稀少型（PLT＜50×109/L）標(biāo)本占12%，這類標(biāo)本檢測(cè)用血細(xì)胞分析儀法計(jì)數(shù)血小板與手工法計(jì)數(shù)血小板無(wú)顯著性差異。

本次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)資料中有27%的標(biāo)本用血細(xì)胞分析儀法與手工法計(jì)數(shù)血小板無(wú)顯著性差異，經(jīng)顯微鏡鏡檢未見異常，卻出現(xiàn)報(bào)警信息提示，經(jīng)綜合分析出現(xiàn)這種情況有可能與試劑的質(zhì)量、抗凝劑及標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí)間等，都會(huì)對(duì)血小板計(jì)數(shù)產(chǎn)生一些的影響。

任何一種先進(jìn)儀器的使用，都會(huì)出現(xiàn)些未知的問題，同樣檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)可能出現(xiàn)警示信號(hào)是以上所分析五種情況的不明顯狀態(tài)，仍需進(jìn)一步研究探討。

綜上所述，血細(xì)胞分析儀的使用，雖然很大程度提高了工作效率，但是再先進(jìn)儀器不能替代人，我們?cè)跈z測(cè)過程中，一定要留心各種警示信號(hào)，及時(shí)復(fù)查，為臨床提供準(zhǔn)確報(bào)告。另外還要注意分析前標(biāo)本采集問題，抽血要順利通暢，抗凝劑與血液比例要準(zhǔn)確，混勻要充分以防凝集，但是也不能用力過猛；還有分析中要進(jìn)行儀器的校準(zhǔn)，務(wù)必按操作規(guī)程嚴(yán)格進(jìn)行，觀察儀器運(yùn)轉(zhuǎn)中的每一個(gè)環(huán)節(jié)及工作狀態(tài)， 以便全力以赴把檢驗(yàn)工作做細(xì)做準(zhǔn)，服務(wù)于臨床。