血清淀粉樣蛋白A聯合細胞角蛋白片段-1檢測對非小細胞肺癌的診斷價值

張晶 賴飛 蔡建興 葉輝銘 梁小亮

(1廈門大學附屬婦女兒童醫院 廈門市婦幼保健院檢驗科，福建 廈門 361003；廈門醫學院附屬第二醫院 2輸血科；3檢驗科)

肺癌目前已成為嚴重威脅人類健康和生命的常見惡性腫瘤，在我國也早在2008年取代肝癌成為發病率最高的惡性腫瘤〔1～3〕。其中非小細胞肺癌(NSCLC)占肺癌患者的70%～80%〔4～6〕，由于NSCLC被診斷時常為晚期，因此患者無法進行有效治療，5年生存率常常<15%，肺癌的血清腫瘤標志物檢測因其操作簡便、價格低廉、無毒副反應等優勢，已經成為肺癌早期診斷、療效評價和預后判斷的重要輔助參考指標〔7〕。血清腫瘤標志物是由腫瘤細胞分泌入血并且可以反映腫瘤存在的特異性或相關性抗原。腫瘤標志物可由腫瘤細胞或非腫瘤細胞產生，但在數量和性質上有明顯差別；一種腫瘤可以有多種腫瘤標志物并存，各個腫瘤間交叉和界限不清。因此單項腫瘤標志物在腫瘤人群中的表達率并不高,僅用單項指標進行腫瘤的篩查或監測,易于造成腫瘤的漏檢或假陽性結果。為使腫瘤的檢出率提高，可采用多項指標聯合檢測，起到互補作用。研究表明，聯合檢測優于單項檢測，不同腫瘤標志物聯合檢測可明顯提高腫瘤檢出率，但在最佳組合問題上，仍需做大量的探討和研究,才能獲取基本認同〔8～10〕。本文通過對血清癌胚抗原(CEA)、細胞角蛋白片段(CYFRA)21-1、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、血清淀粉樣蛋白(SA)A四個指標的檢測，探討其單獨檢測及兩兩聯合檢測對NSCLC的診斷和鑒別診斷的意義，從而得到準確、方便、快捷的檢測組合。

1 材料與方法

1.1基本資料 收集廈門醫學院附屬第二醫院2018年1～12月NSCLC、良性肺病變、健康體檢受試者各40例，年齡>60歲，其中NSCLC組男25例，女15例，診斷標準參照我國2015版肺癌診療指南，所有入選患者經過病理學或組織學確診，并將其進行分期，其中Ⅰ～Ⅱ期28例，Ⅲ～Ⅳ期12例；良性肺病變組男22例，女18例，包括肺炎20例，肺結核12例，肺部纖維瘤8例；健康對照組男20例，女20例，無肺部疾病，體格檢查無異常，既往無腦、心、肝、腎等疾病。

1.2主要儀器與試劑 和邁FIC-S100型熒光免疫分析儀；羅氏E601電化學發光儀：CYFRA21-1 試劑盒、NSE、CEA試劑盒均為羅氏儀器配套原裝試劑盒；SAA試劑盒為廈門波生生物技術有限公司。

1.3方法

1.3.1標本采集 所有實驗對象空腹靜脈采血5 ml，離心后分離血清,-80℃冷凍保存。

1.3.2標本檢測 正常范圍CYFRA21-1、NSE、CEA等指標采用電化學發光法進行檢測；SAA則采用量子點免疫熒光法檢測。CYFRA21-1<3.3 ng/ml；NSE<16.3 μg/L；CEA<5 μg/L；SAA<10 ng/ml，檢測結果超過正常值即判定為陽性，聯合檢測中其中任何一項超過正常值即判定為陽性。

1.4統計學方法 采用SPSS22.0統計軟件進行方差分析、t及χ2檢驗。

2 結 果

2.1各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA水平比較 健康對照組與良性肺疾病組血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SAA水平比較差異有統計學意義(P<0.05)；健康對照組與NSCLC組血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SAA水平比較差異有統計學意義(P<0.05)；良性肺疾病組與NSCLC組血清CEA、CYFRA21-1、NSE水平比較差異有統計學意義(P<0.05)，血清SAA水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

2.2不同臨床分期NSCLC患者CEA、CYFRAZ1-1、NSE及SAA水平比較 中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)與早期NSCLC(Ⅰ～Ⅱ期)患者血清CYFRA21-1、SAA水平比較差異有統計學意義(P<0.05)，血清CEA、NSE水平比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表1 各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA水平比較

與健康對照組比較：1)P<0.05；與良性肺疾病組比較：2)P<0.05

表2 不同臨床分期NSCLC患者CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA水平比較

與早期比較：1)P<0.05

2.3各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA陽性率比較健康對照組及良性肺疾病組CEA、CYFRA21-1、NSE的陽性率明顯增高，差異有統計學意義(P<0.05)；而SAA在NSCLC組和良性肺疾病組分別與健康對照組差異有統計學意義(P<0.05)，但NSCLC組與良性肺疾病組差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA陽性率比較〔n(%)，n=40〕

與NSCLC組比較：1)P<0.05；與良性肺疾病組比較：2)P<0.05

2.4血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SAA單獨檢測診斷NSCLC的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.774、0.822、0.634、0.805，兩兩聯合檢測診斷NSCLC的ROC AUC：CEA+CYFRA21-1為0.736；CEA+NSE為0.678；CEA+SAA為0.795；CYFRA21-1+NSE為0.712；CYFRA21-1+SAA為0.923；NSE+SAA為0.734(見圖1)。CYFRA21-1與SAA聯合檢測對NSCLC的診斷敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值分別為92.4%、88.5%、87.6%，82.3%均顯著高于各項單獨檢測及其他兩兩聯合檢測(P<0.05)。

圖1 各指標的ROC曲線

3 討 論

細胞角蛋白(CK)是一種中間微絲蛋白，在上皮細胞中特異表達，通常在惡性腫瘤中穩定持續表達〔11,12〕,惡性腫瘤細胞死亡或溶解時會激活蛋白酶，加速CK降解，釋放CYFRA21-1到血液中。CYFRA21-1是可溶性的CK19片段，是一種酸性蛋白質，廣泛存在于多種組織，尤其惡性腫瘤組織呈高表達，研究顯示〔13〕，在NSCLC患者血清中的CYFRA21-1水平明顯升高，其對NSCLC的敏感性超過50%。SAA由被激活的巨噬細胞和成纖維細胞在肝臟中合成，是一類多基因編碼的多形態蛋白家族〔14〕，是組織淀粉樣蛋白A的前體物質，在正常人血液中有少量存在。當人體處于炎癥、疾病活動期和大面積組織損傷時SAA則快速升高，早在20世紀70～80年代,就有學者用放射免疫法(RIA)和放射免疫擴散法(RID)檢測SAA,發現該蛋白不僅僅和淀粉樣變有關,與惡性腫瘤之間可能也存在著千絲萬縷的關系。當時,一部分學者發現該指標在癌癥人群中的血清水平高于健康人群,尤其在肺癌患者中水平最高〔15～17〕。本研究顯示早期NSCLC患者檢測血清CYFRA21-1、SAA水平對于疾病的早診斷、早治療起著至關重要的作用，CYFRA21-1+SAA聯合檢測可提高早期NSCLC的診斷價值。