蘇百維爾浸膏對四氯化碳致大鼠肝損傷的保護作用

蘇百維爾（醒久液）浸膏組方為我院基于中醫治未病理論指導形成的經驗方，由葛根、枸杞、大棗、玉竹、烏梅五味藥食同源中藥材組成。葛根具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽止瀉的功效，主要用于表證發熱，麻疹不透，熱病口渴，脾虛泄瀉等。玉竹具有養陰潤燥、生津止渴的功效，主要用于肺、胃陰虛證，咳嗽、咽干痰結等[1～3]。該方具有解熱抗炎，養肝護胃等功效，可用于免疫力低下、肝功能受損、慢性胃病等。本研究利用現代藥理學理論對該方進行藥效學驗證，為該方二次開發提供理論依據，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 試驗藥品及試劑 蘇百維爾浸膏組方為葛根、枸杞、大棗、玉竹、烏梅，加10倍量水浸泡45min，煎煮3次，每次煎煮1.5h，濾過，合并煎液，減壓濃縮至流浸膏，4℃冰箱冷藏存放。其原藥材含量為 0.268g/ml，批號：20180516。多聚甲醛，批號：20180112，規格：500g/瓶，國藥集團化學試劑有限公司生產。

1.1.2 試驗動物 SD大鼠，SPF級，全雄，體質量180～220g，由西南醫科大學試驗動物中心提供，試驗動物生產合格證號：SCXK（川）2018-17，試驗在西南醫科大學城北校區試驗動物中心進行。肝臟病理組織學檢測委托成都里來生物科技有限公司完成。

1.2 試驗方法

1.2.1 劑量設計 根據《保健食品檢驗與評價技術規范2003》相關規定，設計蘇百維爾浸膏高劑量（H）為人體日用量30倍（2 041mg葛根每千克大鼠體重）、蘇百維爾浸膏中劑量（M）為人體日用量10倍（680mg葛根每千克大鼠體重）、蘇百維爾浸膏低劑量（L）為人體日用量5倍（340mg葛根每千克大鼠體重）。按每次浸膏灌胃2ml/100g計算，保持處方藥材比例不變以主藥示例，蘇百維爾浸膏H、M、L濃度應分別為 102、34、17mg/ml。

1.2.2 分組與給藥 將大鼠適應性喂養1周后，隨機均分為模型組、空白組、蘇百維爾浸膏高、中、低劑量組共5組，每組10只。對蘇百維爾浸膏高、中、低劑量組開始灌胃給予對應劑量蘇百維爾浸膏2ml/100g，每日1次，空白組灌胃給予等容量生理鹽水，持續30天，期間將動物每周稱重2次，以調整受試樣品劑量。

1.2.3 造模 試驗第30天各組動物隔夜禁食不禁水16h，除空白組外各組大鼠一次性給予四氯化碳（5ml/kg）灌胃，空白組給予等容量食用植物油。4h后，用藥組和空白組繼續灌胃給予對應受試品和生理鹽水[4，5]。

1.2.4 指標測定 于第30天末次給藥24h后，乙醚麻醉各組動物，剪開胸腔心臟取血5ml于EP管，3 000r/min離心，取血清按試劑盒方法測定ALT、AST。采血后取肝臟左葉，在4%多聚甲醛固定液中固定[6]，送病理組織學鏡檢。

1.2.5 統計學分析 所有數據使用Excel建立數據庫，采用SPSS 12.0軟件進行統計學分析，計量資料以±s表示，組間數據比較采用雙側t檢驗，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 蘇百維爾浸膏對大鼠ALT、AST的影響模型組與空白組AST、ALT水平具有統計學差異（P<0.05），提示造模成功。其余各組AST、ALT水平與模型組比較，差異均具有統計學意義（P<0.05），其余各組與空白組比較差異無統計學意義（P>0.05），提示蘇百維爾浸膏3個劑量均對大鼠化學性肝損傷導致的轉氨酶升高有一定抑制作用，見表1。

表1 蘇百維爾浸膏對大鼠ALT、AST水平的影響（U/L，±s）

表1 蘇百維爾浸膏對大鼠ALT、AST水平的影響（U/L，±s）

注：與空白組比較，*P<0.05；與模型組比較，ΔP<0.05

組別 n AST ALT空白組 10156.13±37.6949.88±6.01模型組 10379.89±145.11* 298.89±171.45*蘇百維爾H組 10136.60±25.56Δ 55.90±8.34Δ蘇百維爾M組 10202.29±53.73Δ 64.43±21.33Δ蘇百維爾L組 10219.56±134.93Δ 84.44±31.58Δ

2.2 大鼠肝臟病理學的改變空白組肝臟被膜完整，門管區結構完整，未見明顯病理變化；模型組肝索排列紊亂，肝小葉內肝細胞氣球樣變，肝細胞腫大，胞漿疏松成網狀，半透明，肝細胞灶狀壞死，炎性細胞浸潤；蘇百維爾浸膏H組、M組肝臟被膜完整，有少量或部分肝細胞空泡變性，胞質內出現空泡狀或顆粒狀，門管區結構完整，未見明顯病理變化；蘇百維爾浸膏L組肝臟被膜完整，肝索排列紊亂，部分肝小葉內肝細胞氣球樣變，肝細胞腫大，胞漿疏松成網狀，半透明，呈球形；部分肝細胞空泡變性，胞質內出現空泡狀或顆粒狀物質，胞質染色不均，門管區未見明顯病理變化，見圖1。

圖1 各組大鼠肝臟病理鏡檢

3 討論

隨著社會生活節奏加快，人們熬夜、酗酒、飲食不規律等不健康的生活方式導致肝臟負擔加重，肝功能受損，患有慢性肝病人群逐漸增多。唐代名醫孫思邈認為：“上工治未病，中工治欲病，下工治已病”，中醫經典理論對調理和預防肝病有自身的特色。蘇百維爾浸膏組方為我院基于中醫治未病理論指導形成的經驗方，具有解熱抗炎、養肝護胃等功效。本研究利用現代藥理學理論對該方進行藥效學驗證，為該方二次開發提供理論依據。

該方的開發初衷是研發一種具有養肝護胃、提神醒腦功效的純中藥飲品。主要針對長途駕駛人員（緩解長時間駕駛疲勞和飲食不規律造成的慢性胃病）、飯店食客（緩解辛辣食物對胃腸道的刺激性）、長期應酬者及其他亞健康人群。目前市場上以植物為基礎開發的飲料較多，但以中醫理論為基礎，且作用于亞健康人群，具有保肝作用的產品，尚未出現。蘇百維爾浸膏及飲品的開發，將會填補該市場空白。

蘇百維爾浸膏組方均為藥食同源中藥材，而傳統藥食同源中藥材主要作為食材或佐料用于烹飪。本品以中醫理論為指導，利用藥食同源中藥材作為飲品進行開發，并以現代藥理學的理論對其功效進行驗證。試驗結果中，用藥組動物肝臟病理組織學檢查中僅發現有空泡形變或氣球樣變，而未出現模型組動物的炎性浸潤及灶狀壞死，這提示蘇百維爾浸膏對大鼠肝臟化學損傷帶來的炎性病變有抑制作用，但對肝細胞受損后水分增多引起肝細胞脹大、胞漿疏松化影響不明顯。本試驗僅對蘇百維爾浸膏對肝損傷的保護作用進行了生化指標和病理組織學方面的藥效學驗證，而浸膏中具有保護作用的有效部位群和單體以及可能的作用機制，還需進一步研究探討。