血清HNP1-3、t-PAIC聯(lián)合檢測(cè)在冠心病診斷中的價(jià)值

劉文武，羅顯元，葛以山，王學(xué)斌，李英，季偉敏，尹薇，朱曉晴，王杰

(蘇州科技城醫(yī)院·南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州科技城醫(yī)院，江蘇蘇州215153)

冠心病是臨床最常見(jiàn)的心血管疾病之一。近年來(lái)，隨著人們生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)的改變，我國(guó)冠心病的發(fā)病率逐年升高，患者呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)。有報(bào)道顯示，目前我國(guó)居民冠心病患病率為0.77%～1.24%，較10年前上升了2.3倍[1]。冠心病的主要病理變化是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈管腔狹窄、血栓形成并導(dǎo)致心肌血流供應(yīng)量降低[2]。研究[3]表明，冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)具有促進(jìn)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成的作用。人中性粒細(xì)胞多肽1-3(HNP1-3)是一種由中性粒細(xì)胞分泌的小分子多肽[4]。研究[5]發(fā)現(xiàn)，在無(wú)病原體感染情況下HNP1-3可誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。纖維蛋白是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的組成部分。正常情況下，機(jī)體纖維蛋白溶解系統(tǒng)可經(jīng)嚴(yán)格的調(diào)控將富含纖維蛋白的血栓降解重塑。纖溶酶原激活劑和纖溶酶原抑制劑-1是調(diào)控纖維蛋白溶解系統(tǒng)的重要分子，兩者結(jié)合可生成組織型纖溶酶原激活物-抑制劑復(fù)合物(t-PAIC)[6]。t-PAIC水平可反映纖維蛋白溶解系統(tǒng)情況。2017年8月～2018年12月，我們觀察了冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC變化，并探討血清HNP1-3、t-PAIC聯(lián)合檢測(cè)對(duì)冠心病的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2017年8月～2018年12月我院收治的冠心病患者116例作為研究組，男71例、女45例，年齡41～78(59.43±6.75)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者符合美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)制定的冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，并經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影確診；②患者首次發(fā)病，年齡≥18周歲；③患者對(duì)研究知情同意且簽署同意書，臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天性心臟病、心臟瓣膜病、心肌病等患者；②近3個(gè)月內(nèi)有感染、服用抗菌藥物和應(yīng)用激素治療的患者；③合并惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、肝臟疾病等影響凝血功能的患者；④妊娠期或哺乳期婦女；⑤存在認(rèn)知功能障礙或無(wú)法正常交流者。研究組均進(jìn)行冠狀動(dòng)脈造影檢測(cè)，并計(jì)算Gensini積分[8]，根據(jù)Gensini積分將冠心病患者分為輕度病變組(051.4分)28例。另選擇同期來(lái)我院查體健康的志愿者110例作為對(duì)照組，男66例、女44例，年齡40～78(58.12±7.34)歲。兩組年齡、性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意。

1.2 血脂及血清HNP1-3、 t-PAIC檢測(cè) 研究組入院第1天采集清晨空腹外周靜脈血5 mL，對(duì)照組于體檢當(dāng)日采集空腹外周靜脈血8 mL，經(jīng)3 500 r/min離心5 min，分離上層血清。為避免儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)結(jié)果的影響，所有血樣需在采集后2 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。采用日立5300全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清HNP1-3水平，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清t-PAIC水平，試劑盒購(gòu)自Beckman-Coulter公司，嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 兩組血脂及血清HNP1-3、t-PAIC水平比較 研究組TC、TG、LDL-C及血清HNP1-3、t-PAIC水平高于對(duì)照組(P均<0.05)，HDL-C水平低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組血脂及血清HNP1-3、t-PAIC水平比較

2.2 不同病變程度冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平及Gensini積分比較 不同病變程度患者血清HNP1-3、t-PAIC水平及Gensini積分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且隨著冠狀動(dòng)脈病變程度的升高，冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平及Gensini積分呈逐漸升高趨勢(shì)(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3 冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平與冠狀動(dòng)脈病變程度及血脂的相關(guān)性 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析顯示，冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平與Gensini積分呈正相關(guān)(r分別為0.317、0.425，P均<0.05)，血清HNP1-3與TC、TG、LDL-C、HDL-C無(wú)相關(guān)性(r分別為0.272、0.258、0.276、-0.157，P均>0.05)，血清t-PAIC水平與TC、TG、LDL-C、HDL-C無(wú)相關(guān)性(r分別為0.256、0.231、0.271、-0.132，P均>0.05)。

表2 不同病變程度冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平比較

注：與輕度病變組比較，#P<0.05；與中度病變組比較，*P<0.05。

2.4 血清HNP1-3、t-PAIC對(duì)冠心病診斷的效能分析 血清HNP1-3診斷冠心病的ROC曲線下面積(AUC)為0.832，理論閾值為7.8 pg/mL，靈敏度為0.832，特異度為0.794，約登指數(shù)為0.626；血清t-PAIC診斷冠心病的AUC為0.875，理論閾值為9.8 pg/mL，靈敏度為0.903，特異度為0.843，約登指數(shù)為0.746；血清HNP1-3、t-PAIC聯(lián)合診斷冠心病的靈敏度、特異度分別為0.931(108/116)和0.891(98/110)，約登指數(shù)為0.822。

3 討論

冠心病發(fā)生的主要病理基礎(chǔ)是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化。而動(dòng)脈內(nèi)膜脂質(zhì)沉積、微血栓形成和炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成和破潰的重要條件。HNP1-3是一種內(nèi)源性小分子多肽，最初發(fā)現(xiàn)HNP1-3主要作用于病原微生物的細(xì)胞膜，具有抗病原微生物的作用[9]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，在無(wú)病原體感染情況下機(jī)體亦可出現(xiàn)HNP1-3異常高表達(dá)，并發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)和誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生無(wú)菌性炎癥的作用[10]。Ungan等[11]報(bào)道指出，動(dòng)脈硬化發(fā)生存在HNP1-3異常高表達(dá)。2008年Quinn 等[12]報(bào)道，冠心病患者外周血單核細(xì)胞中存在HNP1-3異常高表達(dá)。趙勁波等[13]研究認(rèn)為，在巨噬細(xì)胞吞噬低密度脂蛋白中可導(dǎo)致HNP1-3分泌增多，并誘發(fā)無(wú)菌性炎癥。本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病患者血清HNP1-3水平升高，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)冠心病患者血清HNP1-3水平隨冠狀動(dòng)脈病變程度加重而升高，患者血清HNP1-3水平與Gensini積分呈正相關(guān)關(guān)系。提示HNP1-3在冠心病發(fā)生發(fā)展中起重要作用。分析其原因可能與以下幾方面有關(guān)：①冠心病患者血液中低密度脂蛋白較多，巨噬細(xì)胞吞噬低密度脂蛋白過(guò)程中，導(dǎo)致HNP1-3分泌增多；②冠心病患者冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致血清HNP1-3水平升高；③在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成中，單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì)，導(dǎo)致單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表達(dá)HNP1-3水平升高。

纖維蛋白異常沉積是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的另一重要機(jī)制，是血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的啟動(dòng)因素[14]。正常情況下，機(jī)體纖維蛋白溶解系統(tǒng)可經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的調(diào)控將富含纖維蛋白的血栓降解重塑。纖維蛋白溶解系統(tǒng)的激活可致纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶，這一過(guò)程需纖溶酶原激活劑的作用。而纖溶酶原激活物抑制劑-1則可與纖溶酶原激活劑結(jié)合，起到抑制纖維蛋白溶解系統(tǒng)的激活作用[15]。t-PAIC是纖溶酶原激活劑和纖溶酶原抑制劑-1集合的產(chǎn)物，其水平可反映纖溶酶原激活物抑制劑-1釋放情況，進(jìn)而反映機(jī)體纖維蛋白生成情況[16]。Zhao等[17]通過(guò)基因敲除載脂蛋白E構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與野生型小鼠相比，模型組血漿t-PAIC升高3倍以上。Vousden等[18]報(bào)道，冠心病患者內(nèi)皮細(xì)胞組織型纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活劑抑制劑表達(dá)增多，導(dǎo)致血清t-PAIC水平升高。本研究結(jié)果顯示，冠心病患者血清t-PAIC水平升高，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，冠心病患者血清t-PAIC水平隨冠狀動(dòng)脈病變程度升高而升高，患者血清t-PAIC水平與Gensini積分呈正相關(guān)關(guān)系。分析其原因可能是由于冠心病患者因各種原因?qū)е卵軆?nèi)皮細(xì)胞損傷，纖維蛋白溶解系統(tǒng)異常激活，導(dǎo)致t-PAIC生成增加；同時(shí)生成的纖維蛋白異常沉積促進(jìn)了冠狀動(dòng)脈病變程度升高。而冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平與TC、TG、LDL-C、HDL-C水平無(wú)相關(guān)性，表明冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平升高與血脂無(wú)關(guān)。

目前臨床上主要依據(jù)癥狀、心電圖和冠狀動(dòng)脈造影對(duì)冠心病進(jìn)行診斷。其中心電圖是心臟檢查的常規(guī)手段，但其診斷具有一定主觀性，且常規(guī)心電圖對(duì)冠心病診斷敏感性較低[19]。冠狀動(dòng)脈造影雖然是診斷冠心病的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但由于冠狀動(dòng)脈造影是一種有創(chuàng)檢查，不適合作為篩查和常規(guī)檢查[20]。血清總膽固醇、血脂等常規(guī)檢查雖然可為冠心病的診斷提供依據(jù)，但這類因子特異性較差。近年來(lái)關(guān)于冠心病診斷取得了一定進(jìn)展，其中外周血標(biāo)志物是診斷冠心病的重要方法。肌鈣蛋白、心肌酶譜等對(duì)心肌梗死等有很好的特異性，但該類分子僅在心肌損傷時(shí)有變化，在冠心病早期變化不大。本研究中結(jié)果顯示，以HNP1-3≥7.8 pg/mL作為診斷的臨界值，HNP1-3對(duì)冠心病診斷的靈敏度為0.832，特異度為0.794；以t-PAIC≥9.8 ng/mL作為診斷的臨界值，t-PAIC對(duì)冠心病診斷的靈敏度為0.903，特異度為0.843。兩者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)冠心病診斷的靈敏度和特異度則升高為0.931和0.891。表明血清HNP1-3、t-PAIC聯(lián)合檢測(cè)對(duì)冠心病具有較好的診斷價(jià)值。同時(shí)由于血清學(xué)診斷操作簡(jiǎn)便，可重復(fù)進(jìn)行，適合在基層醫(yī)院推廣應(yīng)用。但本研究中由于研究對(duì)象做了限定，研究對(duì)象為冠心病患者，故其特異性不能完全體現(xiàn)出來(lái)，在臨床中糖尿病、心肌梗死、腦梗死等患者也可發(fā)生血清HNP1-3、t-PAIC異常升高，因此應(yīng)予以甄別。

綜上所述，冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC異常升高，其水平隨冠狀動(dòng)脈病變程度升高而升高，并與Gensini積分呈正相關(guān)關(guān)系，提示HNP1-3、t-PAIC在冠心病發(fā)生發(fā)展中起到重要作用，血清HNP1-3、t-PAIC聯(lián)合檢測(cè)有助于冠心病診斷。