血清C3a聯(lián)合TCT、HC2-HPV檢測對宮頸癌早期診斷的價值

楊佩嫻，余 鑫，吳綺霞 （廣東省開平市中心醫(yī)院婦科，廣東江門 529300）

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)排名第二位的惡性腫瘤，并且開始出現(xiàn)年輕化的發(fā)病趨勢，對廣大女性身心健康和生命造成極大的危害[1-3]。研究已經(jīng)證實，高危型人乳頭狀瘤病毒(HR-HPV)，尤其是HPV16和HPV18型的感染是宮頸癌發(fā)生和發(fā)展的危險因素[4-5]。因此，對已經(jīng)出現(xiàn)感染或有病變的患者早期診斷尤為重要。然而，宮頸癌患者早期常無明顯的癥狀和體征，并且內窺鏡下可見宮頸光滑，與宮頸柱狀上皮異位較難進行區(qū)別，常常造成漏診或誤診。目前，通過薄層液基細胞學檢查(TCT)聯(lián)合第二代雜交捕獲試驗(HC2)檢查子宮頸管代謝物HR-HPV已成為應用較廣的實驗室早期篩查手段，但仍存在一定的漏診率[6-7]。研究發(fā)現(xiàn)，C3a的異常與惡性腫瘤的發(fā)生、進展、預后有一定的相關性，是較為常見的診斷指標[8-9]，但其對宮頸癌的早期篩查目前鮮有研究。筆者通過血清C3a聯(lián)合TCT、HC2-HPV對疑似宮頸癌患者進行檢測，以期為宮頸癌的早期診斷提供具有臨床價值的實驗室檢查方法。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2017年12月婦科就診且疑似宮頸癌患者作為研究對象。納入標準：(1)18歲以上女性患者；(2)初診疑似宮頸癌。排除標準：(1)有明確的急性腎小球腎炎、狼瘡性腎炎、自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)感染、慢性肝病等影響補體水平的患者；(2)有長期服用糖皮質激素和免疫調控性藥物史的患者；(3)研究期間自動退出者。在滿足上述條件的基礎上，根據(jù)病理診斷結果分為良性細胞改變組(BCC組，32例)、不典型增生輕度組(CIN-Ⅰ組，23例)、不典型增生中度組(CIN-Ⅱ組，19例)、不典型增生重度組(CIN-Ⅲ組，27例)、宮頸癌組(SCC組，28例)，并納入子宮頸炎性病變患者作為陽性對照組(Pos-Ctrl組，20例)，以及宮頸無病變的健康女性作為陰性對照組(Neg-Ctrl組，20例)。本研究獲得相關醫(yī)學倫理委員會的審核、批準，且所有受試者均知情、同意。

1.2 方法

1.2.1 血清C3a 檢測受試者的血清C3a水平。C3a檢測儀器為羅氏Cobas e601全自動化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，檢測試劑盒及標準液均購自羅氏公司，操作方法按照說明書進行。異常血清C3a水平閾值設定方法：將最終病例確診為宮頸癌患者的血清C3a數(shù)值計算所得的P25(假設異常增高)或者P75(假設異常降低)作為Cutoff值(診斷閾值)。高于或低于診斷閾值的作為陽性指標。

1.2.2 TCT 按照TCT取樣的要求制作薄層涂片，通過巴氏染色進行標記，病理科協(xié)助檢測。根據(jù)國際癌癥協(xié)會制定的貝塞斯達系統(tǒng)(TBS)進行宮頸細胞學分類：正常范圍(NR)、不典型性鱗狀細胞(ASCUS)、低度鱗狀上皮內病變(LSIL)、高度鱗狀上皮內病變(HSIL)、鱗狀細胞癌(SCC)、腺癌(glandular cancer)。

1.2.3 HC2-HPV-DNA 方法參照美國Digene公司HPV-DNA檢測技術，相對光單位(RLU)/Cutoff ≥1.0作為HPV陽性。

1.2.4 診斷效率評價標準 計算血清C3a聯(lián)合或不聯(lián)合TCT、HC2-HPV用于診斷宮頸癌時的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS20.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗；計量資料以±s表示，采用單因素方差分析及q檢驗。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組血清C3a的水平情況

Neg-Ctrl、Pos-Ctrl、BCC、CIN-Ⅰ、CIN-Ⅱ、CIN-Ⅲ、SCC組血清C3a水平分別為：(4.82±2.03)、(13.54±5.76)、(8.85±2.93)、(16.26±4.99)、(20.61±10.09)、(30.79±8.55)、(41.58±10.53) KU/ L。SCC組患者的血清C3a水平顯著高于其他各組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。

2.2 SCC組患者血清C3a的診斷切割值

通過對不同組患者血清C3a水平的比較，發(fā)現(xiàn)SCC患者的C3a水平異常增高，因此將P75值作為診斷切割值。通過軟件計算，C3a的P75值為49.92，即將C3a>49.92 KU/L作為診斷切割值。

2.3 血清C3a聯(lián)合或不聯(lián)合TCT、HC2-HPV檢測對SCC診斷效能分析

血清C3a、TCT和HC2-HPV聯(lián)合檢測SCC的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值均高于TCT、HC2-HPV單獨檢測或TCT和HC2-HPV聯(lián)合檢測，詳見表1。

表1 不同檢測方法對SCC的診斷效能 (%)

3 討論

相關臨床報道指出，在宮頸癌疾病發(fā)展的不同階段得到診斷和治療，患者的生存期有顯著差別，早期癌和原位癌患者的5年生存率可達到90%以上，而浸潤性宮頸癌患者的5年生存率不到70%，并且宮頸癌由早期癌或者原位癌發(fā)展到浸潤性宮頸癌是一個緩慢的過程，常常需要10年及以上，因此早期診斷和治療對患者的預后有重大意義[10-12]。HR-HPV感染是宮頸癌發(fā)生和發(fā)展的關鍵性危險因素，約有99%以上的宮頸癌患者主要是因HR-HPV的長期感染所致[4]。TCT為篩查宮頸癌的初級技術，對宮頸異常細胞的診斷比傳統(tǒng)的巴氏涂片檢查提高了約13%的診斷有效率，尤其是對CIN-Ⅰ及以上病變的檢出率高達65%，但仍然存在較高的漏診率[13]。目前早期宮頸癌篩查較為常見的是TCT聯(lián)合HPV檢測。研究指出聯(lián)合檢測能夠有效提高早期宮頸癌診斷的有效率，但有效正確診斷指數(shù)也僅在73%左右[10-11]。因此，我們需要篩選更加全面的評價指標，以求進一步提高診斷的有效率。

研究已證實，癌癥的發(fā)生、發(fā)展與機體的免疫功能異常有重要的聯(lián)系，如腫瘤細胞免疫逃逸的發(fā)生，腫瘤細胞的遠處轉移等[14]。血清C3a作為補體系統(tǒng)的重要成分，在補體激活途徑中發(fā)揮著關鍵性的作用。C3a在急性腎小球腎炎、狼瘡性腎炎、自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)感染、慢性肝病中表達水平異常，且C3a的異常與惡性腫瘤的發(fā)生、進展、預后有一定的相關性，對惡性腫瘤的早期篩查有一定的臨床意義[8-9]。本研究結果發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者血清中的C3a水平顯著高于子宮頸良性細胞改變、不典型增生(CINⅠ-Ⅲ)、子宮頸炎癥患者以及健康女性，說明血清C3a水平與宮頸癌存在一定的關系，癌癥的發(fā)生導致血清C3a水平異常升高。因此，血清C3a水平對宮頸癌的診斷可能存在一定的輔助價值。我們擬定異常升高的C3a的P75值作為診斷切割值，聯(lián)合TCT及高危型HPV檢測對宮頸癌進行早期診斷，結果發(fā)現(xiàn)，血清C3a、TCT、HC2-HPV三者聯(lián)合檢測宮頸癌，其敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值均顯著高于TCT、HC2-HPV單獨檢測或TCT、HC2-HPV聯(lián)合檢測，提示C3a聯(lián)合TCT、HC2-HPV檢測對宮頸癌的早期診斷有更高的敏感性和特異性，提高了宮頸癌篩查的準確性。