HPV-DNA聯合SCC-Ag、CEA、HE4檢測對宮頸癌患者的診斷價值研究

王元元 李 娜

女性高發惡性腫瘤之一為宮頸癌，具有極高發病率，有調查顯示，女性惡性腫瘤中，宮頸癌發病率僅次于乳腺癌，嚴重威脅到患者生命健康[1-2]。我國宮頸癌發生率正呈2%/年～3%/年的速度持續增長[3]。人乳頭瘤病毒(HPV)感染篩查屬于預防宮頸癌疾病重要措施，已得到國際腫瘤預防機構認可[4]。鱗狀細胞癌抗原(SCC-Ag)、癌胚抗原(CEA)、人附睪蛋白4(HE4)均為宮頸癌輔助診斷常用腫瘤標志物。本文以宮頸癌患者、宮頸癌前病變患者、宮頸炎患者各60例以同期健康體檢者100例作為研究對象，探討HPV-DNA聯合SCC-Ag、CEA、HE4測定在宮頸癌患者診斷中的價值。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月至2018年3月我院宮頸癌患者(宮頸癌組)、宮頸癌前病變患者(宮頸癌前病變組)、宮頸炎患者(宮頸炎組)各60例，并取同期健康體檢女性100例納入對照組。入選標準：病理學檢查確診為宮頸癌、宮頸癌前病變、宮頸炎；具有完整臨床資料；入組前未接受任何治療；心肝腎功能正常；采血時非經期；對研究知情，簽署知情同意書；符合倫理委員會相關研究審批標準。排除標準：已經接受手術或者放化療治療；合并前列腺、消化系統、卵巢、膽道系統或者乳腺等相關病變；妊娠或者哺乳婦女；拒絕采集靜脈血進行腫瘤標志物水平的檢測。宮頸癌組患者年齡28～65歲，平均(46.78±4.85)歲；宮頸癌FIGO分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期25例，Ⅲ期14例，Ⅳ期5例，包括37例鱗癌與23例腺癌。宮頸癌前病變組患者年齡26～68歲，平均(47.05±4.91)歲；宮頸炎組患者年齡25～67歲，平均(46.45±4.72)歲；對照組年齡20～62歲，平均(45.93±4.61)歲。

1.2 方法

HPV-DNA檢測：以基因芯片法檢測高危HPV-DNA，應用基因擴增儀(型號：WD-9402C)擴增基因，所用試劑購自北京閱微基因技術有限公司，然后雜交擴增后的基因與基因芯片(購自上海奇芯集團)，如若信號灰度與背景灰度之間的差值超過4，則表明基因型陽性，本次共檢測22種不同高危型別 (包括HPV16、18、31、33、35、39、42、43、44、51、52、53等)。

腫瘤標志物檢測：抽取入選者清晨空腹靜脈血大約3～5 ml，采用3000轉/min速率離心10 min，然后分離血清；應用電化學發光分析儀(型號：羅氏E170)進行血清SCC-Ag、CEA水平的檢測，試劑來自羅氏公司原裝配套試劑；以酶聯免疫吸附法進行血清HE4檢測，其中檢測試劑盒來自瑞典康乃格診斷公司。所有檢測步驟均需嚴格參照試劑盒說明書。

1.3 觀察指標

觀察宮頸癌不同分期與4組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯合檢測陽性率，比較4組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達水平、SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨檢測與聯合檢測靈敏度、特異度、準確度。

SCC-Ag陽性標準：>1.5 ng/ml；CEA陽性標準：>5 ng/ml；HE4陽性標準：>150 U/ml。靈敏度=陽性檢出例數/患者例數×100%；特異度=對照組陰性檢出例數/對照組例數×100%；準確度=(患者陽性檢出例數+健康對照組陰性檢出例數)/總例數×100%[5]。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 4組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達水平比較

對照組與宮頸炎組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達水平比較無明顯差異(P>0.05)；宮頸癌前病變組與宮頸癌組各指標水平明顯高于對照組與宮頸炎組(P<0.05)，且宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組(P<0.05)，見表1。

表1 4組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達水平比較

注：與對照組比較，#為P<0.05；與宮頸炎組比較，*為P<0.05；與宮頸癌前病變組比較，△為P<0.05。

2.2 4組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯合檢測陽性率比較

宮頸癌前病變組與宮頸癌組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯合檢測陽性率均明顯高于對照組、宮頸炎組(P<0.05)，且宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組(P<0.05)，見表2。

表2 4組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯合檢測陽性率比較(例，%)

注：與對照組比較，#為P<0.05；與宮頸炎組比較，*為P<0.05；與宮頸癌前病變組比較，△為P<0.05。

2.3 不同分期宮頸癌SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯合檢測陽性率比較

Ⅰ/Ⅱ期患者SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA陽性率明顯高于Ⅲ/Ⅳ期患者(P<0.05)，見表3。

表3 2組不同分期宮頸癌SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯合檢測陽性率比較(例，%)

2.4 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨檢測與聯合檢測靈敏度、特異度、準確度比較

聯合檢測靈敏度、準確度明顯高于 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨檢測(P<0.05)，見表4。

表4 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨檢測與聯合檢測靈敏度、特異度、準確度比較/%

注：與聯合檢測比較，△為P<0.05。

3 討論

隨著醫學技術不斷發展，醫學界已經認識到HPV能引發宮頸癌。相關文獻指出，99.8%左右宮頸癌患者產生HPV感染，HPV陰性者基本沒有罹患宮頸癌可能性，HPV 屬于引發宮頸癌病變直接因素[6-7]。故臨床進行HPV-DNA 檢測屬于宮頸病變首選篩查方式，對HPV-DNA陽性患者采取及時有效治療措施，為逆轉宮頸病變以及防治宮頸癌關鍵。通常只有持續感染HPV，女性才可能產生宮頸癌，故如果HPV-DNA陰性，則體檢者在往后3～5 年內無需再行相同檢測[8-9]。

腫瘤標志物為人體細胞癌變出現、發展、浸潤以及轉移期間形成的或者宿主對腫瘤組織細胞反應性的相應活性物質，一般存在于癌變組織以及宿主體液之內，非腫瘤患者體液里面不存在或表達水平較低。宮頸腫瘤病變早期發展過程中，影像學無法檢出，但是血液里面一些腫瘤標志物已產生不同程度升高趨勢，故檢測血液里面腫瘤標志物表達水平可成為早期診斷并發現腫瘤有效方法。現階段，多項研究表明，腫瘤標志物可同時存在于正常與腫瘤組織、非腫瘤與腫瘤患者體液之內，但其表達質和量存在非常大的差異，卻又具有相互交叉以及界限模糊特點[10-11]。在免疫學、現代分子生物學不斷發展的背景下，宮頸癌患者血清里面多種腫瘤標志物逐漸得以被發現。其中，SCC-Ag為臨床診斷宮頸癌相對可靠腫瘤標記物之一，已經廣泛應用于宮頸磷癌早期診斷、治療效果與預后判定、腫瘤復發轉移監測中，然而其對宮頸腺癌或者腺鱗癌臨床診斷價值并不高[12-13]。CEA主要存在于人體胃腸黏膜上皮、部分惡性腫瘤細胞表面上，比如肺癌、結腸癌以及乳腺癌等，其已經在多種腫瘤診斷中得帶廣泛應用，且開始應用于宮頸癌診斷中。HE4 屬于近年來醫學界發現的腫瘤標志物，首次發現于人附睪遠端相應上皮細胞。相關研究指出，多種婦科腫瘤存在HE4高表達現象，比如子宮內膜癌與卵巢癌等女性腺癌組織[14-15]。

本組研究顯示，健康對照組與宮頸炎組血清SCC-Ag、CEA、HE4表達水平比較無明顯差異，但宮頸癌前病變組與宮頸癌組各指標水平明顯高于其他兩組，且宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組，表明隨著宮頸病變發展，血清SCC-Ag、CEA、HE4水平亦明顯升高。結果還顯示，宮頸癌前病變組與宮頸癌組SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA及聯合檢測陽性率均明顯高于其他兩組，宮頸癌組明顯高于宮頸癌前病變組，與潘靜等[16]研究結論一致。說明宮頸病變越嚴重，陽性檢出率越高。宮頸癌Ⅰ/Ⅱ期SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA陽性率明顯高于Ⅲ/Ⅳ期患者，提示隨著宮頸癌發展，腫瘤標志物與HPV-DNA陽性率顯著升高。此外，聯合檢測靈敏度、準確度明顯高于 SCC-Ag、CEA、HE4、HPV-DNA單獨檢測，表明相較于單種檢測方式，SCC-Ag、CEA、HE4聯合HPV-DNA檢測能提高檢測結果準確性與靈敏度。

綜上，與單一檢測相比HPV-DNA聯合SCC-Ag、CEA、HE4檢測可有效增加檢測結果準確性與敏感度，宮頸癌分期越大，陽性檢出率越高，能有效指導患者臨床診治。