不同亞型抗環瓜氨酸肽抗體對類風濕關節炎診斷價值的比較研究

黃土藝

[摘要] 目的 分析類風濕關節炎患者血清中不同亞型抗環瓜氨酸肽抗體的臨床診斷價值。方法方便選取2016年7月—2018年6月期間該院收入的137例類風濕關節炎患者即為實驗組1，選取同期收入的100例其他結締組織病患者、100名健康體檢者作為實驗組2和對照組，均開展不同亞型的抗環瓜氨酸肽（CCP）抗體檢查，比較類風濕因子（RF）-IgM 以及不同亞型的抗環瓜氨酸肽（CCP）抗體水平。 結果 實驗組1受檢人員抗CCP抗體IgG、抗CCP抗體IgA、抗CCP抗體IgM、RF-IgM（71.53%、56.20%、29.19%、74.45%）與實驗組2（2.00%、2.00%、6.00%、19.00%）和對照組（1.00%、1.00%、1.00%、2.00%）對比，差異有統計學意義（χ2=114.585 2、118.232 7、76.428 2、79.785 6、19.885 9、32.124 6、71.132 6、137.431 6，P<0.05）。RF-IgM陰性類風濕關節炎患者（10.00%、26.67%、13.33%）對比RF-IgM陽性（89.71%、66.35%、35.51%），差異有統計學意義（χ2=74.291 2、15.118 2、5.422 5，P<0.05）。≤6個月病程類風濕關節炎患者抗CCP抗體IgG、抗CCP抗體IgA、抗CCP抗體IgM（51.85%、29.62%、51.85%）與7～23個月（75.00%、60.41%、27.08%）、超過24個月（80.64%、65.62%、25.80%）對比，差異有統計學意義（χ2=4.166 7、7.719 8、6.552 6、11.097 9、4.601 1、5.710 0，P<0.05）。 結論 類風濕關節炎患者血清中抗 CCP抗體存在不同亞型，有利于早期診斷類風濕關節炎疾病。

[關鍵詞] 類風濕關節炎;血清中抗環瓜氨酸肽抗體;不同亞型

[中圖分類號] R593.22? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）08（b）-0124-03

[Abstract] Objective To analyze the clinical diagnostic value of different subtypes of anti-cyclic citrullinated peptide antibodies in patients with rheumatoid arthritis. Methods Convenient select 137 patients with rheumatoid arthritis who were admitted from July 2016 to June 2018 were the experimental group 1. 100 patients with other connective tissue diseases and 100 healthy subjects were selected as the experimental group 2 and the control group， different subtypes of anti-cyclic citrullinated peptide（CCP） antibody test， comparing rheumatoid factor （RF）-IgM and different subtypes of anti-cyclic citrullinated peptide（CCP） antibody levels. Results The experimental group 1 was anti-CCP antibody IgG， anti-CCP antibody IgA， anti-CCP antibody IgM， RF-IgM （71.53%， 56.20%， 29.19%， 74.45%） and experimental group 2 （2.00%， 2.00%， 6.00%， 19.00%） and the control group （1.00%， 1.00%， 1.00%， 2.00%）， the difference was statistically significant （χ2=114.585 2， 118.232 7， 76.428 2， 79.785 6， 19.885 9， 32.124 6， 71.132 6， 137.431 6， P<0.05）. RF-IgM negative rheumatoid arthritis patients （10.00%， 26.67%， 13.33%） were positive for RF-IgM （89.71%， 66.35%， 35.51%）， and the difference was statistically significant （χ2=74.291 2， 15.118 2， 5.422 5， P<0.05）. Anti-CCP antibody IgG， anti-CCP antibody IgA， anti-CCP antibody IgM （51.85%， 29.62%， 51.85%） and 7 to 23 months （75.00%， 60.41%， 27.08%） in patients with rheumatoid arthritis of ≤6 months; for more than 24 months （80.64%， 65.62%， 25.80%）， the difference was statistically significant （χ2=4.166 7， 7.719 8， 6.552 6， 11.097 9， 4.601 1， 5.710 0， P<0.05）. Conclusion There are different subtypes of anti-CCP antibodies in serum of patients with rheumatoid arthritis， which is helpful for early diagnosis of rheumatoid arthritis.

[Key words] Rheumatoid arthritis; Anti-cyclic citrullinated peptide antibodies in serum; Different subtypes

類風濕性關節炎（RA）屬于發生侵蝕性關節炎的一種全身性自身免疫性疾病，對稱性大小關節滑膜炎癥即為主要的表現，是針對關節組織產生的一種自身免疫性疾病，是在外因以及內因作用下攜帶易感基因個體出現自身關節組織免疫反應的疾病[1-2]。該文分析了2016年7月—2018年6月期間東莞市人民醫院就診的137例類風濕關節炎患者、100例其他結締組織病患者、100名健康體檢者血清中不同亞型抗環瓜氨酸肽抗體的診斷價值。現報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

實驗組1是方便選取的137例類風濕關節炎患者，男女比是67：70，最大年齡75歲，最小年齡20歲，中位年齡（45.32±3.33）歲;實驗組2是收入的100例其他結締組織病患者，男女比是50：50，最大年齡74歲，最小年齡22歲，中位年齡（45.98±4.32）歲;對照組是收入的100名健康體檢者，男女比是51：49，最大年齡76歲，最小年齡24歲，中位年齡（45.22±5.22）歲。比對3組基礎數據，數據之間差異無統計學意義（P>0.05）。

入選標準：①東莞本地居民及長期居住東莞的外地居民;②患者與家屬表示同意該次調查，提交倫理會被許可。

排除標準：①年齡小于20歲;②伴發慢性乙型病毒肝炎患者、結核患者、HIV傳染病患者;③糖尿病患者、高血壓患者、慢性腎功能不全患者;④不同意參加研究患者。

1.2? 方法

采集入組樣本的3 mL真空血，離心之后選取2份血清標本，保存于-80℃下進行備用，一次凍融后實施相關測定。

不同亞型抗CCP抗體檢測，選擇德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司研發的ELISA 檢測試劑盒實施處理，將各 100 μL標準品、陰性對照、陽性對照、1：101 稀釋后待檢血清加入到相應微孔板中，基于室溫下進行30 min孵育。依據30 μL 洗滌緩進行3次沖液洗滌。將100 μL酶結合物加入到相應微孔中，基于室溫下進行30 min孵育。選擇相同緩沖液實施洗滌;將100 μL孔底物加入，基于室溫進行15 min避光;加入100 μL孔終止液，選擇 450 nm的波長進行檢測，參考波長即為620 nm，于瑞士 Tecan 公司提供的Sunrise 酶標儀上檢測吸光度（A）值。標準曲線經試劑盒標準品制作，陽性標準為超過5 U/mL判斷。軍隊所有樣本進行復孔檢測，每板都設置陰陽性對照、空白對照組。選取德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司研發的ELISA 檢測試劑盒抗的CCP 抗體-IgA、IgM。陽性即為健康對照組 A 值的x+2 s。

類風濕因子（RF）-IgM 檢測：選取德國 SiemensHealthcare Diagnostics Products GmbH 研發以及給出的BN II全自動蛋白分析儀，采取顆粒增強免疫散射比濁法對 RF-IgM 含量進行檢測，陽性即為超過15 U/mL。

1.3? 觀察指標

觀察3組受檢人員不同亞型抗CCP抗體（CCP抗體IgG、抗CCP抗體IgA、抗CCP抗體IgM）檢出率、RF-IgM 陽性檢出率，不同病程類風濕關節炎患者不同亞型抗CCP抗體檢出率，RF-IgM陰性和RF-IgM陽性不同亞型抗CCP抗體檢出率。

1.4? 統計方法

研究的337例受檢人員涉及的所有數據使用SPSS 19.0統計學軟件處理，用率（%）的形式表示計數資料，采用χ2檢驗，用（x±s）形式表示計量資料，采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

2.1? 3組受檢人員不同亞型抗CCP抗體檢出率、RF-IgM陽性檢出率比較

實驗組1受檢人員抗CCP抗體IgG、抗CCP抗體IgA、抗CCP抗體IgM、RF-IgM對比實驗組2和對照組，（χ2=114.585 2、118.232 7，76.428 2、79.785 6，19.885 9、32.124 6，71.132 6、137.431 6，P<0.05），見表1。

2.2? 137例患者RF-IgM陰性和RF-IgM陽性不同亞型抗CCP抗體檢出率對比

RF-IgM陰性類風濕關節炎患者和RF-IgM陽性對比，差異有計學意義（P<0.05）。表示，RF-IgM陰性和RF-IgM陽性患者顯示出不同的抗CCP抗體IgG、抗CCP抗體IgA、抗CCP抗體IgM檢出率。見表2。

2.3? 不同病程類風濕關節炎患者不同亞型抗CCP抗體檢出率對比

≤6個月病程類風濕關節炎患者抗CCP抗體IgG、抗CCP抗體IgA、抗CCP抗體IgM對比7～23個月、超過24個月（χ2=4.1667、7.719 8，6.552 6、11.097 9、4.601 1、5.710 0，P<0.05）。表示，不同病程類風濕關節炎患者具有不同的亞型抗CCP抗體檢出率，其中抗CCP抗體IgA、抗CCP抗體IgG比較顯著的就是超過24個月病程患者，抗CCP抗體IgM比較顯著的就是≤6個月病程患者。見表3。

3? 討論

類風濕關節炎（RA）屬于尚未明確病因的一種慢性且發生炎性滑膜炎的系統性疾病，手足小關節等發生對稱性、侵襲性的多關節關節炎癥為主要表現，經常合并累及關節外器官和血清類風濕因子陽性等情況，容易發生功能喪失與關節畸形等情況。以往在對可疑RA患者臨床診斷中血清學實驗中比較常見的就是類風濕因子（RF）檢測。類風濕因子屬于抗γ球蛋白抗體，在類風濕因子中大約有60%～80%的陽性率，并且類風濕因子陽性和手指關節破壞以及滴度存在一定關系[3-5]。健康人群、各種自身免疫性疾病、感染性疾病中也可能存在類風濕因子，所以，類風濕因子屬于非特異的一個敏感指標[6-7]。絲集蛋白近年研究在其含有的稀有氨基酸-瓜氨酸主要成分即為抗原性表位，瓜氨酸形成實際上是經過肽基精氨酸脫亞胺酶精氨酸產生瓜氨酸，正常人體不會形成抗體，但基于壓力和炎癥作用下機體被當做抗原，形成抗體，導致發生免疫反應。抗環瓜氨酸肽（CCP3）3抗體屬于是類風濕因子高特異的一個新指標。抗CCP3抗體中IgG類抗體為主要類型，類風濕因子特異性大約為96%。