耿子軒
(鄭州工程技術學院,河南 鄭州 450000)
食用菌營養豐富,味道鮮美,含有很多人體必需的多糖、維生素、礦物質、氨基酸等營養成分,屬于低脂肪、高蛋白的保健食品,食用菌還可以促進其他營養物質的吸收[1],含有很多稀有氨基酸,如2-二氨基異丁酸、4-氨基異丁酸、C-氨基-3-L-脯氨酸等,這些稀有氨基酸使很多蘑菇風味鮮美、味道獨特,蘑菇中維生素的種類數目也遠高于普通食物,富含葉酸、生物素、毗哆醇、泛酸、煙酸、維生素B12、維生素B2、維生素B1等多種維生素。作為一種很好的蛋白質來源,食用菌有著“素中之葷”的稱號,很多食用菌中還含有珍貴的藥用成分,然而食用菌被采后仍然會保持旺盛的呼吸作用,因此常溫下食用菌很快就會褐變、開傘、變味、品質敗壞,難以長期儲存[2]。選取新鮮鳳尾菇(Pleurotussajor-caju)提取出一種水提液,在提取水提液的過程中,會得到很多菌絲體和大量代謝產物,這些物質中富含生物活性,對腎、心血管、肝臟、神經系統等人體器官可以起到治病防病的作用,還具備提高免疫力、延緩衰老、消炎、抗腫瘤、抗細菌等功效。當前食用菌水提液的提取技術發展迅速,利用新型提取技術對食用菌水提液進行提取,獲取食用菌的菌絲體,提取食用菌水提液和菌絲體中的有效成分,并將其應用在醫藥保健領域的研究目前已經獲得了很大進展,利用食用菌水提液制成的營養液、口服液、食品添加劑等已經被人們接受。并且,食用菌水提液的提取技術在食品工業領域也有極大的發展潛力,特別是食用菌水提液具備一定的抗疲勞能力,可能成為未來人類蛋白質的主要來源。因而,通過小鼠運動試驗,對食用菌水提液的抗疲勞能力進行了驗證。
首先對鳳尾菇水提液進行制備。選取市售新鮮鳳尾菇1 kg, 將鳳尾菇清洗干凈,加1000 mL蒸餾水,利用高速組織搗碎機將鳳尾菇打成懸液,并用pH為6.8~7.0、體積約懸液4倍的涼開水對懸液進行約30 min的浸提,將其放置于冰箱中約12 h。用紗布對沉淀物進行過濾,在過濾物中加入NaCl,平均100 mL濾液中需要加入0.7 g NaCl,將濾液煮沸并裝進無菌瓶中密封。為了防止鳳尾菇水提液變質,將其儲存于冰箱中備用[3]。試驗中用到的小鼠種類是昆明種小鼠,由昆明醫科大學醫學部的動物試驗科提供,選取雄性、體重在18 g~22 g范圍內的小鼠共150只。將動物室調整為50%濕度、 25℃恒溫的環境,放入小鼠對其進行3 d適應性飼養,飼養期間自由飲水、給予基礎飼料[4]。
試驗中需要用到的試劑與儀器見表1、表2。

表1 試驗試劑Tab.1 Experimental reagents

表2 試驗儀器Tab.2 Experimental instruments
將適應性飼養的小鼠分為鳳尾菇水提液組、對照組、空白組3組,每組30只小鼠[5]。在鳳尾菇水提液組中,分別用體積為 83 g·L-1、165 g·L-1、330 g·L-1的鳳尾菇水提液對小鼠進行灌胃,灌胃周期為30 d,每天1次;對照組和空白組分別用體積相同的紅牛飲料和結化水進行灌胃,灌胃周期和次數與蘑菇水提液組完全相同。期間每周對小鼠進行2次游泳訓練,每次的訓練時間為10 min,如圖1所示。

圖1 小鼠游泳訓練圖Fig.1 Mouse swimming training chart
完成最后1次灌胃后,讓小鼠休息30 min,使小鼠尾根部負荷重量為自身重量的5%,將負重的小鼠放入游泳箱中。游泳箱中的水溫保持在(25.0±1.0)℃,水深高于30 cm,對各組小鼠的力竭游泳時間進行記錄,力竭游泳時間是指從開始游泳到小鼠口鼻進入水中8 s未抬頭的時間。小鼠結束負重游泳后,不加抗凝劑,分別對其進行眼球采血,將采集的血液在冰箱中放置3 h,當血液完全凝固后,在速度為3000 r·min-1的條件下進行離心處理,離心時間為15 min。將分離出的血清取出備用。利用二乙酰一肟法對血清尿素氮進行測定。血清尿素氮的含量取決于血清中的SOD活力,而SOD活力中的催化反應式為:

利用SPSS 11.5軟件對試驗數據進行處理,利用均數正負標準差的形式表示試驗結果,并利用單因素方差對各個組別進行分析,P<0.01表示差異具有非常顯著性,P<0.05表示差異具有顯著性。
運動抗疲勞能力增強的最直接證據就是運動耐力得到延長。根據表3小鼠運動時間的試驗數據,在用鳳尾菇水提液給小鼠灌胃30 d后,其負重游泳時間相較空白組得到了很大提升,各個灌胃劑量的組別記錄均高于空白組。而對照組小鼠負重游泳時間相較空白組則并沒有很大的差異。相較于空白組,體積為 330 g·L-1、165 g·L-1、83 g·L-1的 3 個鳳尾菇水提液組,其小鼠負重游泳時間增長量分別為56.83%、34.46%、22.45%,試驗結果證明鳳尾菇水提液能夠明顯提升小鼠的運動耐力,即能夠提升小鼠的運動抗疲勞能力。

表3 小鼠運動時間試驗數據Tab.3 Experimental data of mouse exercise time
而血清尿素氮也是靈敏、理想的運動抗疲勞指標。在進行運動時,機體會加強肌肉收縮、增大肌糖原消耗量,導致能量供給失衡,此時蛋白質會進行代謝,最終產生血清尿素氮。因此,運動后,機體的血清尿素氮含量會急劇升高,機體的運動負荷量越高,蛋白質代謝越快,就會形成越多的尿素,血清尿素氮含量就會越高。通過圖2可知,3組蘑菇水提液組在運動后血清尿素氮的含量均低于對照組與空白組。說明鳳尾菇水提液能夠顯著增強小鼠的運動耐受能力與運動負荷能力,也就是鳳尾菇水提液具有顯著的運動抗疲勞能力。

圖2 運動后小鼠血清尿素氮含量Fig.2 Serum urea nitrogen content in mice after exercise
運動后機體在多種因素的作用下會感受到疲勞,而疲勞最客觀、最直接的表現就是機體的運動耐力會降低,力竭游泳時間可認為是運動耐力的代表反映指標。通過表3可知,與對照組相比,鳳尾菇水提液能夠有效提高小鼠負重游泳時間,與空白組相比提升效果則更顯著,并且鳳尾菇水提液的劑量越高,小鼠的負重游泳時間越長,運動耐力越高,即提升運動抗疲勞能力的效果越顯著。而當機體進行運動時會比較缺氧,為滿足機體能量會進行蛋白質代謝從而產生血清尿素氮通過圖2可知,與對照組相比,鳳尾菇水提液能夠降低小鼠體內血清尿素氮含量,增強小鼠的運動耐受能力與運動負荷能力,與空白組相比效果則更顯著,并且鳳尾菇水提液的劑量越高,小鼠的血清尿素氮含量越低,即提升運動抗疲勞能力的效果越顯著。綜上所述,通過對小鼠進行血清尿素氮含量測定與負重游泳時間測試,可以發現鳳尾菇水提液能夠顯著提升小鼠的運動耐受能力、運動負荷能力與運動耐力,具備很好的運動抗疲勞效果。
鳳尾菇水提液中的多糖具備調節機體免疫機能、抗自由基、抗病毒、抗腫瘤等多種作用,是一種優秀的免疫增強劑,并且通過試驗證明,鳳尾菇水提液還能夠提升機體的運動抗疲勞能力,因此有必要對鳳尾菇水提液的機能與提取工藝進行更深層次的研究。