王芳,肖雷,朱沛,朱建波
(1.云南省畜牧獸醫科學院,云南 昆明 650224; 2.開遠市動物疫病預防控制中心,云南 開遠 661600)
藍舌病是由藍舌病病毒(Bluetongue Virus,BTV)引起的一種通過媒介昆蟲庫蠓傳播的非接觸性病毒性傳染病。世界動物衛生組織(OIE)將其列為法定報告的多種動物共患傳染病,我國將其列為一類動物傳染病[1]。BTV 屬于呼腸弧病毒環狀病毒屬病毒,目前已確認存在至少27 種血清型[2,3],其中,BTV-8(藍舌病歐洲8型)近年來曾在比利時、荷蘭、法國、德國等歐洲國家暴發,引起綿羊和牛大量發病,造成了嚴重的經濟損失。我國自1979 年在云南省師宗縣首次分離出BTV[4]后,至今在全國范圍內已分離到11 個血清型的BTV 毒株[5],在我國31個省(市、自治區)都發現有藍舌病抗體陽性動物。為進一步了解2018年藍舌病在我國的流行分布情況,對來自重慶、新疆、吉林、湖北、內蒙古、貴州、河北、廣西和云南等9個省(市、自治區)93個縣(市、區、旗)的牛羊血清進行藍舌病C-ELISA抗體檢測及BTV-8型中和抗體檢測。
血清樣品由各省(市、自治區)的動物疫病預防控制中心負責采集,送云南省畜牧獸醫科學院熱帶亞熱帶動物病毒病重點實驗室-20℃保存。樣品采集情況見表1。
BTV C-ELISA抗體檢測試劑盒、BTV-8標準株均由云南省畜牧獸醫科學院熱帶亞熱帶動物病毒病重點實驗室提供。
在ELISA板中每孔分別加入10μL的待測血清、陽性血清、弱陽性血清、陰性血清(每份加2孔),置37℃溫育30min;用試劑盒提供的樣品稀釋液按照1:100倍稀釋兔抗BTV抗體 (競爭抗體),每孔加50μL競爭抗體,在37℃溫箱里溫育60min;……