A型肉毒毒素治療兒童痙攣型腦癱療效的Meta分析

徐換，徐小靜，宋莎莎，童佩，陸敏

小兒腦性癱瘓簡稱腦癱，是兒科難治病之一，發(fā)病率為0.2%～0.6%，其中以痙攣型最為多見，占65%左右。痙攣型腦癱患兒由于肌張力過高，阻礙了兒童正常生長發(fā)育，部分患兒還會發(fā)生關節(jié)攣縮、畸形、疼痛等，嚴重影響患兒生活質(zhì)量[1]。1989年Dsa等[2]首次使用肉毒素治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷引起的繼發(fā)性肌強直，取得較好療效。近年來，對于A型肉毒毒素(Botulinum toxin A，BTX-A)治療兒童痙攣型腦癱的相關報道較多，但多為小樣本研究，且評價參數(shù)各有不同，統(tǒng)計學檢驗效能較低。筆者基于所有比較BTX-A治療兒童痙攣型腦癱療效對比的隨機對照試驗(Randomized controlled trial，RCT)進行Meta分析，以期望能為臨床工作提供循證醫(yī)學證據(jù)，更好地指導臨床工作。

1 資料與方法

1.1 一般資料 ①研究類型：所有BTX-A治療痙攣型腦癱患者的RCT，無論是否采用盲法。②研究對象納入標準：確診為腦癱，伴有上肢或下肢肌張力增高。腦癱診斷符合2004年全國小兒腦性癱瘓專題研討會制定的標準[3]。排除標準：患兒存在重癥肌無力、運動神經(jīng)元病等神經(jīng)系統(tǒng)疾病；存在關節(jié)僵硬、肌肉攣縮等情況；既往曾行相關手術或肉毒素治療者。③干預措施：試驗組采用常規(guī)康復治療聯(lián)合BTX-A局部注射治療；對照組僅采用常規(guī)康復治療，如物理治療、作業(yè)治療等。④結局指標：改良Ashworth量表(modified Ashworth scale，MAS)評分；粗大運動功能測試量表-88(Gross Motor Function Measure-88,GMFM-88)評分；日常生活活動能力(activities ofdaily living,ADL)評定；綜合痙攣量表(compopsite spasticity scale，CSS)評分；有效率；關節(jié)屈曲度。⑤文獻排除標準：重復發(fā)表的文獻；干預措施、結局指標不符合要求；非中英文文獻。

1.2 方法 ①檢索策略：計算機檢索PubMed、EMbase、Cochrane Library、中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫(CBM)、中國知網(wǎng)(CNKI)和萬方數(shù)據(jù)庫(WanFang Data)。檢索時限均從建庫至2018年11月1日，語言種類限中、英文。英文檢索策略為：‘onabotulinumtoxinA’ OR ‘BOTOX’ OR ‘botulinum toxin’ OR ‘botulinum toxin A’ OR ‘BTX-A’ OR ‘Botulismotoxin’ OR ‘creotoxin’ AND ‘spasticity’ OR ‘spastic’ OR ‘cerebral palsy’。中文檢索策略為：‘肉毒毒素’ OR ‘肉毒素A’ OR ‘A型肉毒素’ AND ‘腦性癱瘓’ OR ‘腦癱’。②文獻篩選及資料提取：由2位評價員獨立篩選文獻、提取資料并交叉核對。首先閱讀文題和摘要對文獻進行篩選，在排除明顯不相符的文獻后，進一步閱讀全文，以確定最終是否納入。資料提取內(nèi)容主要包括：第一作者，發(fā)表年份，患者數(shù)量，年齡，實驗跨度，治療方式，MAS評分，GMFM-88評分，ADL評分，CSS評分，有效率，關節(jié)屈曲度。③納入研究的質(zhì)量評價：采用Cochrane 系統(tǒng)評價員手冊5.1.0版質(zhì)量評價標準對納入的RCT進行質(zhì)量評價，標準包括：隨機分配方案的產(chǎn)生；分配方案的隱藏；治療方案實施者和研究對象施盲；研究結果測量者施盲；結果數(shù)據(jù)的完整性；選擇性報告研究結果；其他偏倚。每個項目包括低風險，高風險和不清楚3個等級。完全滿足上述質(zhì)量標準，發(fā)生偏倚的可能性最小，為A級；部分滿足上述質(zhì)量標準，發(fā)生偏倚的可能性為中度，為B級；完全不滿足上述質(zhì)量標準，發(fā)生偏倚的可能性為高度，為C級。

1.3 統(tǒng)計學方法 使用 Review Manager 5.3及State 12軟件對提取的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。納入研究結果間的異質(zhì)性采用Q檢驗和I2統(tǒng)計量進行評價，若P≥0.1且I2≤50%，說明研究間具有同質(zhì)性，選用固定效應模型進行分析；若P<0.1，I2>50% ，認為研究間存在較大異質(zhì)性，采用隨機效應模型進行分析，對其異質(zhì)性來源進行分析，根據(jù)可能出現(xiàn)的異質(zhì)性因素進行亞組分析，必要時采用敏感性分析來檢驗結果的穩(wěn)定性[4-5]。文獻的發(fā)表偏倚使用漏斗圖、Begg′s 檢驗和Egger′s 檢驗進行檢驗,P<0.05認為存在發(fā)表偏倚。

2 結果

2.1 文獻檢索結果 共檢出相關文獻676篇，PubMed(167篇)、EMbase(62篇)、Cochrane Library(46篇)、CBM(113篇)、CNKI(156篇)和WanFang Data(132篇)。剔除交叉文獻及重復發(fā)表后獲得261篇，經(jīng)2名研究人按照納入和排除標準閱讀摘要及全文進一步剔除239篇，最終納入22篇合格文獻[6-27]，其中英文4篇[6-9]，中文18篇[10-27]。

2.2 納入研究的方法學質(zhì)量評價 6個研究采用隨機數(shù)字表法分組[6,7,19,23-25]，1個研究采用分層隨機法[20]，3個研究按接診順序隨機[18,21,27]，隨機序列的產(chǎn)生選擇“低風險”其他12個研究均提及“隨機”[8-17,22,26]，但并未說明隨機的方法。3個研究采用分配方案隱藏和雙盲的方法[6,7,9]，1個研究采用單盲的方法[8]，所有研究均完整報道了研究結果，均無選擇性報道。3個研究質(zhì)量等級為A級[6,7,9]，19個研究為B級[8,10-27]。對所納入研究中每個偏倚風險項目所占百分比的判斷見圖1。

2.3 Meta分析結果

2.3.1 MAS評分 13篇文獻報道了治療后MAS評分情況[9,13-15,18-24,26,27]，各研究間無異質(zhì)性(P=0.11，I2=34%)，采用固定效應模型。Meta分析結果顯示：2組差異有統(tǒng)計學意義[MD =-0.82，95%CI(-0.86，-0.79)，Z=50.34，P<0.05]。提示BTX-A治療組痙攣程度低于對照組。本文再以小腿三頭肌、踝跖屈肌群和上肢肌群治療部位的不同及BTX-A<10U/kg、10U/kg≤BTX-A<15U/kg和BTX-A≥15U/kg治療劑量的不同進行亞組分析，結果顯示各亞組內(nèi)及亞組間仍無異質(zhì)性，提示治療組不同肌群，不同治療劑量的療效相似，BTX-A治療后痙攣程度低于對照組。見圖2。

圖1 納入研究偏倚風險比例圖

圖2 2組治療后MAS評分比較的森林圖

2.3.2 GMFM-88評分 10篇文獻報道了治療后GMFM-88評分情況[6,9,16,18,20,22-24,26,27]，各研究間無異質(zhì)性(P=0.09，I2=40%)，采用固定效應模型。Meta分析結果顯示：2組差異有統(tǒng)計學意義[MD =9.22，95%CI(7.80，10.65)，Z=12.70，P<0.05]，提示BTX-A治療組運動功能優(yōu)于對照組。本文再以小腿三頭肌、踝跖屈肌群和上肢肌群治療部位的不同及BTX-A<10U/kg、10U/kg≤BTX-A<15U/kg和BTX-A≥15U/kg治療劑量的不同進行亞組分析，結果顯示：劑量<10U/kg的亞組內(nèi)存在異質(zhì)性(P=0.06，I2=59%)。敏感性分析發(fā)現(xiàn)剔除贠國俊[22]的研究后，各項研究間異質(zhì)性消除，表明該研究可能存在一定偏倚。盡管如此，納入該研究后，合并效應量仍都具有統(tǒng)計學意義且森林圖結果方向未發(fā)生改變。見圖3。

2.3.3 ADL評分 3篇文獻報道了治療后ADL評分情況[10,11,25]，各研究間無異質(zhì)性(P=0.27，I2=23%)，采用固定效應模型。Meta分析結果顯示：2組差異有統(tǒng)計學意義[MD =11.38，95%CI(7.51，15.24)，Z=5.77，P<0.05]。提示BTX-A治療組日常生活活動能力優(yōu)于對照組。見圖4。

2.3.4 CSS評分 2篇文獻報道了治療后CSS評分情況[17,20]，各研究間存在異質(zhì)性(P<0.05，I2=93%)，采用隨機效應模型。Meta分析結果顯示：2組差異有統(tǒng)計學意義[MD =-1.9，95%CI(-3.45，-0.35)，Z=2.4，P<0.05]。提示BTX-A治療組痙攣程度低于對照組。見圖5。

2.3.5 有效率 3篇文獻報道了治療有效率情況[6,7,12]，各研究間無異質(zhì)性(P=0.97，I2=0%)，采用固定效應模型。Meta分析結果顯示：2組差異有統(tǒng)計學意義[RR =1.3，95%CI(1.13，1.5)，Z=3.63，P<0.05]。提示BTX-A治療組有效率高于對照組。見圖6。

2.3.6 關節(jié)屈曲度 2篇文獻報道了關節(jié)屈曲度情況[8,11]，各研究間無異質(zhì)性(P=0.65，I2=0%)，采用固定效應模型。Meta分析結果顯示：2組差異有統(tǒng)計學意義[MD =0.7，95%CI(0.39，1.02)，Z=4.4，P<0.05]。提示BTX-A治療組關節(jié)屈曲度優(yōu)于對照組。見圖7。

2.3.7 發(fā)表偏倚 MAS評分指標的漏斗圖不對稱，發(fā)表偏倚Egger′s 檢驗(P =0.003)、Begg′s 檢驗(P=0.36)，表明存在一定發(fā)表偏倚。GMFM-88評分指標的漏斗圖基本對稱，發(fā)表偏倚Egger′s 檢驗(P =0.969)、Begg′s 檢驗(P=0.474)表明不存在發(fā)表偏倚。而其他指標因研究數(shù)量有限，未能進行漏斗圖分析。

3 討論

3.1 有效性分析 BTX于1897年被發(fā)現(xiàn)，于1977年應用于臨床，現(xiàn)已成功用于治療賁門失馳緩癥、斜視、眼瞼痙攣等疾病[28]。目前國際市場主要有3種 A 型肉毒毒素，即美國的 Botox，英國的Dysport和德國的Xeomin[1]，而在國內(nèi)使用的肉毒素品牌有2種，一種是美國愛兒健公司生產(chǎn)的Botox，一種是中國蘭州生產(chǎn)的衡力牌。BTX-A是革蘭氏陽性梭狀芽孢桿菌產(chǎn)生的一種嗜神經(jīng)毒素，選擇性地作用于外周膽堿能性神經(jīng)末梢，抑制突觸前膜釋放乙酰膽堿，抑制肌梭神經(jīng)元傳遞，改變反射亢進狀態(tài)，從而引起肌肉松弛性麻痹，起到緩解痙攣和強直的治療作用[6,29]。

圖3 2組治療后GMFM-88評分比較的森林圖

圖4 2組治療后ADL評分比較的森林圖

圖5 2組治療后CSS評分比較的森林圖

圖6 2組治療后有效率比較的森林圖

圖7 2組治療后關節(jié)屈曲度比較的森林圖

多項研究表明，BTX-A治療后肌肉松弛伸長，肌張力下降，關節(jié)活動范圍增加，運動能力提高[13,16,20]。Lowe等[30]報道 42例痙攣型腦癱患兒上肢注射 BTX-A的情況，提倡應用小劑量、高濃度 BTX-A 定位注射的方法，可以有效緩解肢體痙攣，提高上肢運動功能。本研究分別有13篇和10篇文獻報道了治療后肌張力及運動功能情況，Meta分析合并效應量顯示:BTX-A治療組對肌張力及運動功能的改善優(yōu)于對照組。有學者提出，BTX-A注射后24～48 h即開始進行康復訓練，可以進一步提高治療效果[12,14]。納入的22篇研究均為BTX-A結合康復治療，且均取得滿意療效，因此在臨床應用中，可以將BTX-A注射視為1項輔助治療，BTX-A治療后及時開展規(guī)律、持續(xù)的康復訓練，才能最大限度地提高患兒的運動功能。

3.2 安全性分析 BTX-A治療過程中應嚴格把握治療劑量，劑量偏小，療效持續(xù)時間較短，劑量過多或濃度過大則會引起相關的并發(fā)癥[31]。Baker等[6]報道了94例接受BTX-A治療的痙攣型腦癱患兒，結果顯示發(fā)熱、上呼吸道感染、疼痛加重、嘔吐、哮喘、腹瀉等不良事件發(fā)生率為51.06%，而常規(guī)康復治療發(fā)生率為32.26%。同樣，有學者認為注射會造成無力[32]，不會導致比單獨康復訓練更好的效果。納入的22篇研究中，僅Baker[6]1篇研究報道了治療過程中不良反應發(fā)生情況，故未能就不良反應這一變量進行Meta分析。對于最佳治療劑量的相關報道較少，劉建軍等[15]應用不同劑量BTX-A對61例痙攣型腦癱患兒進行治療，最終提出用藥劑量計算公式為劑量(IU)=(MAS評分+2.5)×體重(kg)，但該公式僅適用于小腿三頭肌。對于BTX的臨床應用有待于進一步規(guī)范化。Baker等[6]分析了10U/kg、20 U/kg及30 U/kg3種劑量的療效，結果顯示20 U/kg為最佳治療劑量。由于納入文章有限，本文未能進一步對相同肌群的不同治療劑量進行Meta分析，相關問題有待于大樣本、高質(zhì)量的研究進行進一步論證。

3.3 局限性分析 納入的22個研究均對基線資料進行了詳細描述，試驗組與對照組具有可比性，但仍存在以下局限性：①納入文章質(zhì)量有限；②部分英文相關RCT的效應指標為非均數(shù)±標準差，故未能納入本文，可能存在發(fā)表偏倚；③由于并不是每個研究結果均能獲取所需數(shù)據(jù)，對于ADL、CSS及有效率等指標的報道較少，且尚有其他評價療效的指標未能納入統(tǒng)計等，使得偏倚發(fā)生可能性增大；④康復治療方法不統(tǒng)一，納入的研究大多以被動關節(jié)活動訓練、抗阻肌力訓練為基礎，但部分研究的康復治療加入了針灸、推拿等。將來的研究尚需從以下幾方面進一步完善：要有正確的隨機方法及分配隱藏方案；要有足夠的隨訪時間，把近期的效果與遠期的效果相統(tǒng)一；對同一部位的不同治療劑量的療效及相關不良事件進行探討[33]。

綜上所述，BTX-A能夠明顯地改善痙攣型腦癱患兒的肌肉緊張狀態(tài)、肢體運動功能及生活質(zhì)量，是1種有效的治療兒童痙攣型腦癱的方法；但在臨床應用過程中應嚴格把握治療劑量，根據(jù)患兒病情綜合考慮。