臨床分離洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥譜分析

解春寶 羅江蓉* 羅天華 喻 華 黃文芳

（1 四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院，四川 成都 610072；2 四川省成都市雙流縣協(xié)和社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，四川 成都 610072）

洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）是非發(fā)酵革蘭陰性桿菌中的一種。由于該菌廣泛存在于醫(yī)院環(huán)境中，其主要感染免疫功能較低或者是免疫功能受損的患者，據(jù)文獻(xiàn)[1]報(bào)道該菌多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，臨床醫(yī)師可選的治療該菌的藥物有限。因此本文旨在通過(guò)研究本院臨床分離的該菌的耐藥譜，了解和掌握該菌耐藥現(xiàn)狀，為臨床醫(yī)師合理使用抗菌藥物以及深入研究洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥機(jī)制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株來(lái)源：收集四川省人民醫(yī)院臨床科室2015年7月至2016年6月分離的所有洋蔥伯克霍爾德菌，去除相同患者信息的重復(fù)株。

1.2 抗生素：亞胺培南、阿米卡星、左旋氧氟沙星、頭孢他啶、頭孢唑林、頭孢吡肟、頭孢曲松、氨芐西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、慶大霉素、環(huán)丙沙星、呋喃妥因、妥布霉素和復(fù)方新諾明共15種抗菌藥物。

1.3 儀器與試劑：儀器與試劑來(lái)源如下。法國(guó)生物梅里埃：全自動(dòng)微生物分析儀VITEK-2、VITEK-2配套的藥敏試驗(yàn)板、麥?zhǔn)媳葷醿x。上海博迅實(shí)業(yè)有限公司：生物安全柜。法國(guó)Heraeus：CO2培養(yǎng)箱。鄭州安圖綠科生物公司：血平板。江蘇康健醫(yī)療用品有限公司：一次性接種環(huán)。

1.4 方法：采用法國(guó)生物梅里埃公司的全自動(dòng)微生物分析儀VITEK-2對(duì)菌株進(jìn)行鑒定，利用VITEK-2配套藥敏試驗(yàn)板檢測(cè)15種藥物對(duì)洋蔥伯克霍爾德菌的最低抑菌濃度。根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）提供的MIC解釋標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判斷洋蔥伯克霍爾德菌對(duì)被測(cè)藥物的敏感程度。收集和匯總所有細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果，綜合分析本院洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥譜。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)本類(lèi)型分布：本實(shí)驗(yàn)共收集洋蔥伯克霍爾德菌30株，其標(biāo)本類(lèi)型分布如下：1株為傷口分泌物、1株為尿道分泌物、2株為腹腔引流液、4株為支氣管灌洗液、22株為痰液。

2.2 藥敏結(jié)果：耐藥譜分析發(fā)現(xiàn)本研究中的30株洋蔥伯克霍爾德菌均呈現(xiàn)出多重耐藥現(xiàn)象。對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗生素（本研究中的亞胺培南）的耐藥率為96.7%。對(duì)一代頭孢菌素類(lèi)抗生素頭孢唑林的耐藥率較高，為100%。對(duì)三代（頭孢他啶）和四代（頭孢吡肟）頭孢菌素類(lèi)抗生素的敏感性較高，其敏感率分別為100%、96.7%。對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素的耐藥率均為96.7%。對(duì)呋喃妥因和氨芐西林的耐藥率也高達(dá)100%。對(duì)復(fù)方制劑哌拉西林/他唑巴坦和復(fù)方新諾明的敏感性較高。其具體情況見(jiàn)表1。

表1 30株洋蔥伯克霍爾德菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果[n（%）]

3 討 論

洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）是非發(fā)酵革蘭陰性桿菌中的一種，分布廣泛，是一種較為常見(jiàn)的條件致病菌。據(jù)文獻(xiàn)[1]報(bào)道由于該菌廣泛存在于醫(yī)院環(huán)境中，主要感染免疫功能低下及受損的患者，且該菌多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。研究[2]數(shù)據(jù)顯示洋蔥伯克霍爾德菌的臨床檢出率呈逐年上升趨勢(shì)且對(duì)多種常用藥物的耐藥性不斷增加，給臨床治療帶來(lái)了很大的困難。

本研究中收集的四川省人民醫(yī)院的30株洋蔥伯克霍爾德菌標(biāo)本主要類(lèi)型是痰液標(biāo)本，分離的細(xì)菌均呈現(xiàn)出多重耐藥現(xiàn)象。對(duì)本研究中的碳青霉烯類(lèi)抗生素亞胺培南的敏感率較低，耐藥率為96.7%。對(duì)一代頭孢菌素類(lèi)抗生素頭孢唑林的耐藥率較高，為100%。對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素的耐藥率均為96.7%。據(jù)文獻(xiàn)[3-4]報(bào)道洋蔥伯克霍爾德菌具有很高的固有耐藥，該菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)、一代及二代頭孢菌素、抗假單胞菌青霉素、多粘菌素等呈固有耐藥。本研究中的洋蔥伯克霍爾德菌對(duì)三代（頭孢他啶）和四代（頭孢吡肟）頭孢菌素類(lèi)抗生素的敏感性較高，其敏感率分別為100%、96.7%。對(duì)氨芐西林和呋喃妥因的耐藥率高達(dá)100%。對(duì)復(fù)方制劑哌拉西林/他唑巴坦和復(fù)方新諾明的敏感性較高。本研究結(jié)果與文獻(xiàn)[5-6]報(bào)道的臨分離的洋蔥伯克霍爾德菌呈現(xiàn)多重耐藥譜的結(jié)果較一致。綜上所述，本院洋蔥伯克霍爾德菌的多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，這給臨床醫(yī)師提出了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。該菌的耐藥機(jī)制復(fù)雜，包括產(chǎn)生多種水解酶（如金屬β-內(nèi)酰胺酶、頭孢菌素酶）、外排泵系統(tǒng)、膜孔蛋白缺失、膜通透性下降等。因此為了更好的預(yù)防和控制我院洋蔥伯克霍爾德菌所導(dǎo)致的感染，需進(jìn)一步研究洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥機(jī)制和分子流行病學(xué)特征。