參絨潔陰粉對小鼠霉菌性陰道炎的藥效學(xué)觀察

李會影 李瑞麗 于映霞 劉建璇

（1 吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院，吉林 長春 130012；2 長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130012）

參絨潔陰泡沫劑是由苦參、赤芍、白鮮皮等7味中藥組成復(fù)方制劑，具有清熱解毒，理血疏風(fēng)，殺蟲止癢之功效，臨床用于治療霉菌性、細(xì)菌性陰道炎等癥具有很好的治療效果，經(jīng)比較該品種優(yōu)于市場上某些同類中成藥物，且劑型獨特，具有較好的開發(fā)價值[1]。為進(jìn)一步將其開發(fā)為中藥新藥提供科學(xué)的實驗依據(jù)，我們對參絨潔陰粉進(jìn)行了相對應(yīng)的藥效學(xué)實驗研究。

1 試驗材料

1.1 受試藥品：參絨潔陰泡沫劑（shenrongjieyinpaomoji），是由苦參、赤芍、白鮮皮、鶴虱、蒲公英、火絨草、薄荷腦等七味中藥組成復(fù)方制劑，實驗用參茸潔陰，為干膏粉，本品呈棕褐色，味微苦、澀。每克粉相當(dāng)于4.58 g生藥，批號：20180815，由長春中醫(yī)藥大學(xué)提供。該藥具有清熱解毒，理血疏風(fēng)，殺蟲止癢之功效。

1.2 試驗動物：昆明種小鼠，SPF級，雌性，體質(zhì)量30～35 g，動物合格證號：SCXK(遼）2015-0001。由遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司提供。飼養(yǎng)動物室為清潔級，室溫26 ℃，相對濕度為40%，通風(fēng)良好，采用標(biāo)準(zhǔn)營養(yǎng)飼料飼養(yǎng)，自由飲水，人工照明，每周紫外線消毒一次。

1.3 菌株：菌株分別來源于感染了白色念珠菌的復(fù)發(fā)性陰道炎患者，由吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院第一臨床醫(yī)院檢驗科提供。白色念珠菌菌懸液濃度，109cfu/mL。

2 試驗方法

2.1 參絨潔陰粉對小鼠霉菌性陰道炎模型的影響：取昆明種小鼠60只，雌性，于頸背部皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.05 mL，濃度為2 mg/mL，連續(xù)3次，1次/2天。于第6天將濃度為109cfu/mL的白色念珠菌菌懸液20 μL，注入手術(shù)吸收性止血海綿中，將已注入菌懸液的手術(shù)吸收性止血海綿塞于小鼠陰道內(nèi)，于接種后的第4天取陰道分泌物涂片鏡檢，觀察菌絲及芽生袍子的生長情況，以確定感染成功。挑選出50只感染成功的小鼠，隨機分成5組，每組10只。第1～3組為參絨潔陰粉高、中、低劑量組，劑量分別為5.44 g、2.72 g、1.36 g生藥/kg，第4組為陽性對照組，陽性藥物選擇潔爾陰洗液，劑量為36 mg/kg，第5組為模型對照組。將同批只塞了注入生理鹽水的手術(shù)吸收性止血海綿且陰道分泌物鏡檢為陰性的小鼠，隨機挑選出10只作為空白對照組。各組小鼠分別按各組劑量灌胃給藥或蒸餾水，連續(xù)7 d，每天1次，于停藥后第1、4天取陰道分泌物涂片鏡檢，2次鏡檢結(jié)果均為白色念珠菌陰性者為轉(zhuǎn)陰，以確定其轉(zhuǎn)陰情況。

2.2 參絨潔陰粉對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響：取昆明種小鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量20～22 g，隨機分成5組，每組10只。第1～3組為參絨潔陰粉高、中、低劑量組，劑量分別為5.44 g、2.72 g、1.36 g生藥/kg，第4組為陽性對照組，陽性藥物選擇阿司匹林，劑量為0.3g/kg，第5組為模型對照組。實驗時，第1～4組按劑量灌胃（ig）給藥，每天1次，連續(xù)14 d，模型對照組按參絨潔陰粉高劑量組給予同體積蒸餾水。給藥后20 min，用微量注射器吸取二甲苯30 μL均勻涂布于小鼠左耳耳廓前后兩面引起炎癥。致炎0.5、1、2 h后，各組小鼠分別用相應(yīng)濃度的藥物在左耳耳廓前后涂藥，用藥量為5 mL/kg，模型組同時凃抹相同劑量的蒸餾水。4 h后，將各組小鼠頸椎脫臼處死，迅速剪下左、右兩耳，用8 mm打孔器分別在左右耳相同部位打下耳片，用電子天平分別稱重。計算耳腫脹度=左耳重一右耳重；腫脹抑制率=（模型對照組平均腫脹度一給藥組平均腫脹度）/模型對照組平均腫脹度×100%。

2.3 參絨潔陰粉對角叉菜膠所致大鼠足拓腫脹的影響：取SD大白鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量180～220 g，隨機分為5組，每組動物10只。第1～3組為參絨潔陰粉高、中、低劑量組，劑量分別為3.76 g、1.88 g、0.94 g生藥/kg，第4組為陽性對照組，陽性藥物選擇阿司匹林，劑量為0.2 g/kg，第5組為模型對照組。實驗時，第1～4組按劑量灌胃（ig）給藥，每天1次，連續(xù)14 d，模型對照組按參絨潔陰粉高劑量組給予同體積蒸餾水。實驗前用自制窄帶尺測量大白鼠左后足踝關(guān)節(jié)周長。于末次給藥60 min后，分別在大白鼠右后足皮下，注射1%角叉菜膠混懸液（用生理鹽水配制）0.1 mL/只。分別于1、2、3、4、6 h測右后足踝關(guān)節(jié)周長1次。以每鼠左后足自身為對照，以左右后足踝關(guān)節(jié)周長之差為炎癥腫脹度（mm）。

3 試驗結(jié)果

3.1 參絨潔陰粉對小鼠霉菌性陰道炎模型的影響：見表1。結(jié)果表明：模型對照組小鼠陰道分泌液鏡檢有8只為陽性，與空白對照組小鼠比較，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，提示小鼠白色念珠菌性陰道炎模型造模成功。參絨潔陰粉高劑量組停藥后，小鼠陰道分泌液鏡檢白色念珠菌轉(zhuǎn)陰數(shù)為8只，與模型對照組比較，P＜0.01,差異具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義。參絨潔陰粉中、低劑量組小鼠白色念珠菌轉(zhuǎn)陰數(shù)與模型對照組比較，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。可見，轉(zhuǎn)陰率隨藥物劑量增加而升高，呈一定的量效正相關(guān)。說明參絨潔陰粉各劑量組對小鼠霉菌性陰道炎模型均有一定的治療作用。

3.2 參絨潔陰粉對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響：見表2。結(jié)果表明：參絨潔陰粉高劑量組對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹試驗的耳腫脹度與模型對照組比較，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；腫脹抑制率隨藥物劑量的增加而升高，并呈一定的量效正相關(guān)。

表1 參絨潔陰粉對小鼠霉菌性陰道炎模型的影響

表2 參絨潔陰粉對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

3.3 參絨潔陰粉對角叉菜膠所致大鼠足拓腫脹的影響：見表3。結(jié)果表明，參絨潔陰粉高劑量組對角叉菜膠致大鼠足腫脹的1～6 h均具有明顯的抑制作用。

表3 參絨潔陰粉對角叉菜膠致大鼠不同時間足腫脹程度的影響（mm，）

表3 參絨潔陰粉對角叉菜膠致大鼠不同時間足腫脹程度的影響（mm，）

注：與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

4 討 論

臨床上常見的陰道炎有霉菌性陰道炎、細(xì)菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎、老年性陰道炎等，且陰道炎在各年齡層次的婦女均可發(fā)生[2]。80%～90%的霉菌性陰道炎是由白色念珠菌引起的，細(xì)菌性陰道炎的發(fā)生與陰道正常生態(tài)平衡遭受破壞有關(guān)。中醫(yī)婦科無陰道炎之病名，以帶下增多、陰部瘙癢為主癥，故屬“帶下病”“陰癢”之范疇[3-4]。中醫(yī)藥在治療陰道炎方面著重于整體調(diào)節(jié)，參絨潔陰粉是純中藥制劑，本組資料結(jié)果證實，參絨潔陰粉不同劑量對霉菌性、細(xì)菌性陰道炎模型小鼠均有明顯治療作用，為進(jìn)一步將其開發(fā)為婦科新藥提供了可靠的藥理學(xué)依據(jù)。