結直腸癌組織中MMP-7和SLC12A5表達的檢測意義

張 晴 李 丹 岳 欣 王旭波

（南京中醫藥大學附屬徐州市中醫院，江蘇 徐州 221000）

結直腸癌是較為常見的一種消化道惡性腫瘤，其發生以及發展是涉及多步驟和多基因的復雜過程[1-2]。MMP-7以及SLC12A5在多種惡性腫瘤組織中均具有較高的表達水平，其可能在腫瘤的轉移及侵襲過程中發揮著重要的作用。本研究主要探討了結直腸癌組織以及癌旁正常組織中MMP-7和SLC12A5表達水平的臨床檢測意義，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2014年6月至2018年6月在我院病理科采取胃腸腫瘤外科手術切除的60例結直腸癌組織，患者資料：男34例，女26例；年齡34～75歲，平均（49.36±10.23）歲；腫瘤分化程度：低分化患者19例，中分化患者27例，高分化患者14例；腫瘤直徑：＜5 cm者27例，≥5 cm者33例；肝轉移13例；淋巴結轉移31例；脈管浸潤16例；TNM分期：Ⅰ期患者5例，Ⅱ期患者7例，Ⅲ期患者28例，Ⅳ期患者20例。并且取腫瘤組織超過5 cm，病理組織學檢查結果為正常的60例結直腸癌旁正常腸組織作為對照。

1.2 研究方法：采取免疫組化PV-9000兩步法檢測結直腸癌和癌旁正常腸組織MMP-7和SLC12A5的表達水平。對石蠟標本常規進行切片、脫蠟以及水化；使用3%過氧化氫10 min，將內源性的過氧化物酶滅活；然后滴加一抗，保持4 ℃的溫度過夜；采取磷酸緩沖鹽溶液沖洗2 min，共沖洗3次，再滴加試劑1，使用溫箱孵育20 min；采取磷酸緩沖鹽溶液沖洗2 min，共沖洗3次，再滴加試劑2，使用溫箱孵育半個小時；采取磷酸緩沖鹽溶液沖洗2 min，共沖洗3次，采取二氨基聯苯胺法進行染色，給予蘇木精復染、蒸餾水沖洗、梯度乙醇脫水、中性樹膠封固以及二甲苯透明。判定方法：MMP-7僅有少量的陽性染色表達在細胞膜，大部分的陽性染色集中在細胞質中，呈褐色或者棕黃色的顆粒；SLC12A5僅有少量的陽性染色表達在細胞核，大部分的陽性染色集中在細胞質中，呈褐色或者棕黃色的顆粒。3分表示深黃色，2分表示黃色，1分表示淺黃色，0分表示無著色。4分表示＞75%，3分表示51%～75%，2分表示26%～50%，1分表示6%～25%，0分表示＜5%；將上述二者分數進行相乘，“+++”表示9～12分，“++”表示5～8分，“+”表示1～4分，“－”表示0分。比較結直腸癌組織中以及結直腸癌旁正常組織的MMP-7和SLC12A5表達水平。

1.3 統計學分析：采用SPSS19.0軟件，組間對比用t檢驗，組間率的比較用χ2檢驗，以P＜0.05表明差異有統計學意義。

2 結果

MMP-7在結直腸癌組織中陽性表達率為81.67%（49/60），明顯高于結直腸癌旁正常組織的28.33%（17/60）（χ2=12.341，P＜0.05），見表1。

表1 MMP-7在結直腸癌組織與正常組織中的表達（n）

SLC12A5在結直腸癌組織中陽性表達率為83.33%（50/60），明顯高于結直腸癌旁正常組織的31.67%（19/60）（χ2=11.379，P＜0.05），見表2。

表2 SLC12A5在結直腸癌組織與正常組織中的表達（n）

3 討 論

結直腸癌的轉移以及浸潤是一個復雜的、漸進的過程，會對細胞外基質造成破壞[3]。MMPs家族可以對細胞外基質中的所有成分進行降解，因此在結直腸癌患者的發展過程中發揮著重要的效果[4-6]。MMP-7作為一種基質分解素，其表達具有較高的腫瘤細胞特異性，可以降解層黏蛋白、纖維結合素以及蛋白多糖等。因而，MMP-7在惡心腫瘤的浸潤轉移方面得到廣泛的關注[7]。SLC12A5可以通過抑制核酸內切酶-G以及凋亡誘導因子介導的凋亡信號通路，發揮抗凋亡效果，而促轉移效果則是通過對基質體系結構的纖維連接蛋白以及基質金屬蛋白酶等關鍵要素進行調節[8-9]。本研究結果發現，MMP-7在結直腸癌組織中陽性表達率為81.67%（49/60），明顯高于結直腸癌旁正常組織的28.33%（17/60）（χ2=12.341，P＜0.05）；SLC12A5在結直腸癌組織中陽性表達率為83.33%（50/60），明顯高于結直腸癌旁正常組織的31.67%（19/60）（χ2=11.379，P＜0.05）。表明結直腸癌組織中具有較高的MMP-7和SLC12A5表達水平。SLC12A5的異常高表達在結直腸癌患者的發生和演進過程中具有重要的作用，而SLC12A5誘導的MMP-7過表達則有可能是促進結直腸癌患者發生轉移和浸潤的一個重要途徑。

綜上所述，結直腸癌組織中具有較高的MMP-7和SLC12A5表達水平，應采取免疫組化法對其表達進行檢測。