輔助使用葉酸對H型高血壓并冠心病模型大鼠炎性因子的影響*

王長錄，鄭昭芬，鄒瓊超，彭 翔，向媛媛，張 樂，唐銘翔

（湖南省人民醫院心血管內科，湖南 長沙 410000）

H型高血壓屬原發性高血壓，患者同型半胱氨酸（HCY）異常升高，炎性反應嚴重，可導致動脈粥樣硬化等而影響其他心腦血管系統，其中，冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心病）是常見并發癥[1]。因此，及時有效地防治H型高血壓及心功能損傷具有重要意義。近年來多個研究發現，葉酸治療H型高血壓效果較好[2-3]。本研究中探討了葉酸對H型高血壓并冠心病模型大鼠炎性因子及心肌損傷的影響，旨在為葉酸輔助治療該病提供依據。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物、儀器與試藥

動物:SPF級自發性高血壓SD大鼠60只，雄性，8周齡；SPF級SD大鼠，雄性，8周齡，均購自北京維通利華生物有限公司，動物生產許可證號為SCXK（京）2012-0001。標準條件飼養，自由進食、飲水，適宜溫度、濕度，人工黑暗／光照交替喂養。常規標準飼料均購自北京維通利華實驗動物技術有限公司。

儀器:7020型全自動生化分析儀（日本Hitachi公司）；MC4000型大鼠無創血壓測量系統（美國Harvard Apparatus公司）；5418R型離心機（德國Eppendorf公司）。

試藥:異丙腎上腺素（華潤雙鶴藥業股份有限公司，批號為1102）；2%蛋氨酸（張家港市華昌藥業有限公司，批號為20145033）；阿托伐他汀鈣片（輝瑞制藥有限公司，批號為20151407）；馬來酸依那普利片（杭州默沙東制藥有限公司，批號為20160083）；葉酸片（常州制藥廠有限公司，批號為32023302）。

1.2 方法

分組與建模:60只大鼠隨機分為A組、B組和C組，各20只，均飲用含2%蛋氨酸水8周，以建立H型高血壓模型，大鼠血漿HCY＞10 μmol／L即為建模成功。取上述大鼠，腹部皮下注射異丙腎上腺素（30 mg／kg）1次，以建立H型高血壓并冠心病模型。建模成功后，A組和B組大鼠均灌胃阿托伐他汀（每天1次，每次20 mg），馬來酸依那普利（每天1次，每次10 mg）；B組大鼠增加灌胃葉酸（每天1次，每次0.8 mg）；C組大鼠灌胃等體積0.9%氯化鈉溶液，每天1次，均連續2周。

觀察指標:取尾靜脈血2mL，4℃條件下靜置30min，3000 r／min離心10 min，采用全自動生化分析儀測定血漿Hcy、炎性因子[血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）]和心肌酶指標[天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶（CK）]水平，試劑盒均購自上海仁捷生物科技有限公司，按相關說明書操作。采用大鼠無創血壓測量系統測定大鼠血壓，將大鼠尾巴穿過尾套后將尾套連接換能器，36℃預熱15 min，待大鼠尾動脈完全擴張后給尾套加壓，待脈搏信號完全消失后緩慢放氣至脈搏信號恢復正常，連續測定3次取平均值。

1.3 統計學處理

采用SPSS 22.0統計學軟件分析。計數資料以率（%）表示，行 χ2檢驗；計量資料以表示，行t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

與C組比較，A組和B組大鼠血漿Hcy，TNF-α，IL-6，AST，LDH，CK 水平及舒張壓（DBP）均顯著降低（P＜0.05）；與A組比較，B組大鼠上述指標改善程度更優（P＜0.05）。詳見表 1。

表1 3組大鼠檢測指標水平比較（±s，n=20）

表1 3組大鼠檢測指標水平比較（±s，n=20）

注:與 C 組比較，#P＜0.05；與 A 組比較，*P＜0.05。

組別A組B組C組CK（U ／L）156.69 ± 11.89#108.78 ± 8.05#*382.26 ± 12.77 HCY（μmol／L）10.12 ± 1.89#8.62 ± 1.15#*14.87 ± 3.22 DBP（mmHg）102.54 ± 12.78#88.45 ± 10.14#*129.72 ± 13.69 TNF- α（ng ／mL）3.24 ± 0.35#2.81 ± 0.28#*4.29 ± 0.25 IL-6（ng／mL）89.46 ± 6.58#78.21 ± 7.55#*110.78 ±9.45 AST（U ／L）21.15 ± 3.62#16.45 ± 3.87#*27.55 ± 3.06 LDH（U ／L）66.87 ± 7.22#43.65 ± 6.48#*97.22 ± 8.45

3 討論

HCY 異常升高（＞ 10 μmol／L）的原發性高血壓為H型高血壓[4]。血壓長期異常可明顯影響患者的血管功能，導致冠心病等心腦血管疾病的發生，而其高HCY水平與動脈粥樣硬化密切相關，因此，H型高血壓患者可出現心功能損傷和合并冠心病等心血管疾病，可進一步加重其病情而影響預后[5]。本研究中，H型高血壓模型大鼠的心肌酶指標異常升高，證實了H型高血壓可造成明顯的心功能損傷。

HCY是食物蛋氨酸衍生的含巰基氨基酸，亞甲基四氫葉酸還原酶基因單核苷酸多態性降低相關酶活性、B族維生素和輔助因子葉酸缺乏均可導致其生成的增加，而血液中HCY水平異常升高可增加動脈粥樣硬化及腦卒中等腦血管疾病的發病風險，患者心血管功能可出現明顯損傷，心肌細胞亦可受到明顯影響[6-7]。研究認為，HCY是蛋氨酸代謝中間產物，其高HCY水平與體內葉酸缺乏密切相關[8]。因此，葉酸輔助治療H型高血壓可取得較好療效[9-10]。本研究結果顯示，葉酸輔助使用可更快速、有效地降低模型大鼠血壓及HCY水平，證實了HCY高水平與葉酸缺乏有關。

炎性反應亦是高血壓疾病重要病理過程，與血管疾病密切相關[11]。本研究結果顯示，H型高血壓模型大鼠炎性細胞因子表達水平進一步升高，提示高HCY水平可能加重炎性反應，輔助使用葉酸可更快速、有效地降低其炎性因子水平。

綜上所述，輔助使用葉酸可降低H型高血壓并冠心病模型大鼠炎性因子水平。