復方牛磺酸滴眼劑對紫外照射眼損傷模型兔眼的修復作用及其劑量組合優化研究

劉錫軍，才 鳳，肖春瑩

（1.遼寧中醫藥大學附屬醫院，遼寧 沈陽 110032； 2.遼寧省食品檢驗檢測院，遼寧 沈陽 110015）

牛磺酸是一種特殊的氨基酸，是人體必不可少的營養元素[1]。眼藥中的牛磺酸具有強化角膜的自我修復能力和對抗眼疾的作用[2-3]。有研究表明，維生素與眼病的發生及視力關系密切[4]。復方牛磺酸滴眼劑由牛磺酸、鹽酸萘甲唑啉、維生素B6、馬來酸氯苯那敏組成，外源性的牛磺酸能順利通過晶體細胞膜，不需要載體，且不消耗能量，對維持眼代謝功能十分重要，臨床主要用于防治近視和眼疲勞[5-6]。本研究中通過正交試驗篩選出復方牛磺酸滴眼劑對家兔眼刺激損傷后的最佳修復劑量組合，現報道如下。

1 材料

1.1 試藥

復方牛磺酸滴眼劑，4種單一成分，9種劑量組合，規格為10 mL，空白基質為透明質酸鈉和氯化鈉，均由遼寧省藥物研究院提供。4種成分為牛磺酸（A）、鹽酸萘甲唑啉（B）、維生素 B6（C）、馬來酸氯苯那敏（D），以常用量為中劑量，適當增減。因素水平見表1。

表1 樣品成分因素水平表（%）

1.2 動物

日本大耳白種家兔50只，普通級，體質量2.1～2.5 kg，雌雄兼用，由中國醫科大學第二臨床學院醫學實驗動物中心提供，合格證號為SCXK（遼）2003-0013。

1.3 儀器

UV-1601型紫外燈，功率30 W，波長254 nm，沈陽市東陵燈具廠生產。

1.4 統計學處理[7]

采用SPSS 20.0統計學軟件進行分析。計量資料以表示，行t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 方法與結果[8]

取家兔45只，隨機分為9組，每組5只（10眼）。家兔以兔夾固定，將254 nm波長紫外燈置兔眼前40 cm處照射，照射強度為5000 μW／cm2。第1天上午照射3 h，下午1 h，第2，3天上午照射2 h，下午2 h，共照射12 h，以建立家兔紫外照射眼損傷模型。照射后立即給藥，給藥時，將家兔眼瞼提起，藥物滴入結膜囊內，停留10 s以上，中間閉合眼瞼3次。每天滴眼藥4次，連續6d，每次每眼1滴（0.05 mL），間隔 2 h。另取 5只家兔作為空白對照組（等容量空白基質）。

觀察紫外燈照射前及照射后第6天，家兔眼球結膜、角膜、虹膜的受損程度及眼分泌物，參照《化學藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則》（國食藥監注[2005]106號，以下簡稱“化學藥原則”）中的評分標準（見表2）進行評分。將每只家兔的瞼球結膜、角膜、虹膜的刺激反應分值相加即為該兔眼刺激反應的總積分，將每只家兔眼刺激性反應總積分相加后除以家兔數，即為該受試物對家兔刺激性的最后分值。分析樣品對模型兔眼球結膜、角膜、虹膜及分泌物的影響，結果見表 3至表 6。優化的劑量組合分別為 A2B2C2D2，A2B2C2D3，A2B2C2D2，A2B2C2D2。

表2 兔眼刺激損傷評分標準

3 討論

目前，對于藥物的安全性評價，大多采用“化學藥原則”，該方法由于具有客觀、全面的特性，廣泛用于藥物的刺激性評價，且效果良好。劉彥群等[9]曾將1%的殼聚糖液滴入家兔眼睛，觀察家兔的眼角膜、虹膜、結膜變化，用該評價標準對殼聚糖進行評價，結果表明，1%的殼聚糖對家兔眼部無刺激。本試驗中參照該標準設計，結果對家兔眼球結膜、角膜、虹膜及分泌物有影響的是牛磺酸、鹽酸萘甲唑啉和維生素B6。優化劑量組合為A2B2C2D2，即牛磺酸1%、鹽酸萘甲唑啉0.02%、維生素B60.02%、馬來酸氯苯那敏0.03%。以上結果表明，優化劑量的復方牛磺酸滴眼劑治療眼疲勞作用明顯，這為該藥治療眼疲勞的適應證提供了實驗基礎。

表3 對模型兔眼球結膜的影響（分值）

表4 對模型兔眼角膜的影響（分值）

表5 對模型兔眼虹膜的影響（分值）

表6 對模型兔眼分泌物的影響（分值）