郭 梅
龍巖人民醫院,福建省龍巖市 364000
目前,ABO血型不合新生兒溶血病的血清學檢測方法主要為三項試驗,即紅細胞直接抗球蛋白試驗、血清游離抗體檢測試驗、紅細胞放散液鑒定試驗[1]。臨床多采用試管法抗人球蛋白試驗(Tube anti-human globulin test,TAT),雖具有良好診斷效能,但其操作步驟多、時間長,且易受操作者熟練程度等主觀因素影響[2]。近年來,微柱凝膠卡式檢測法(Microcolumn gel cassette detection,MGCP)在國內外交叉配血中得到規范應用,其操作相對簡便、準確度高,為新生兒溶血病的早期診斷指明了新方向[3]。本文選取我院疑似ABO血型不合新生兒溶血病患兒80例,均行MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗,旨在探究MGCP對ABO血型不合新生兒溶血病三項試驗陽性檢出率的影響。報道如下。
1.1 一般資料 選取2018年9—10月我院疑似ABO血型不合新生兒溶血病患兒80例作為觀察對象,其中女31例,男49例,胎齡37~42周,平均胎齡(39.60±1.06)周。
1.2 儀器與試劑 (1)儀器:戴安娜微柱凝膠抗人球蛋白卡購自溫州東亞醫療器械有限公司,37 ℃孵育器、專用低速離心機均由溫州東亞醫療器械有限公司提供。(2)試劑:抗人球蛋白試劑、ABO標準血清、ABO標準紅細胞,均由上海血液生物制品有限公司生產;單特異性抗-C3、單特異性抗-IgG、多特異性抗人球蛋白試劑,均購自上海血液中心。
1.3 方法 采集所有患兒靜脈血2ml,行乙二胺四乙酸(Ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝處理,分別行MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗。
1.3.1 TAT:操作由專業人員嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》進行,其中放散試驗采用熱放散,肉眼或顯微鏡下可見的凝集為陽性反應。
1.3.2 MGCP:操作由專業人員嚴格按照說明書進行,以紅細胞聚集在凝膠帶上部或凝膠中為陽性。
1.3.3 結果判定:三項試驗同時陽性可確診陽性;三項試驗結果有陰性時,以放散試驗陽性為診斷標準;若直抗及游離試驗1項或2項陽性判定為可疑陽性,需結合臨床具體分析。
1.4 觀察指標 (1)MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗陽性檢出率。(2)分析MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗的靈敏度、檢測所用時間、操作條件要求、不同操作者判定結果的差異。(3)分析MGCP、TAT檢測的凝集強度。
1.5 統計學方法 所得數據處理采用SPSS22.0軟件分析處理,計數資料以[n(%)]表示,行χ2檢驗;P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗陽性檢出率比較 80例血液標本中,采用TAT行紅細胞直接抗球蛋白試驗、血清游離抗體檢測試驗、紅細胞放散液鑒定試驗,合計檢出陽性61例;采用MGCP試驗檢出陽性74例;兩種檢測方法的新生兒溶血病三項試驗陽性檢出率對比差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗陽性檢出率對比[n(%)]
2.2 MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗的靈敏度及方法學特點比較 本組共80例疑似ABO血型不合新生兒溶血病患兒,其中MGCP紅細胞放散液鑒定試驗檢出的74例患兒,出生后1周內出現皮膚鞏膜黃染,血紅蛋白水平降低,檢測血清膽紅素值明顯高于正常值,并伴有新生兒溶血病臨床特征,診斷為新生兒溶血病,并以此設立陽性診斷標準,MGCP新生兒溶血病三項試驗診斷新生兒溶血病的靈敏度較TAT高(P<0.05),檢測所用時間較TAT短,操作條件要求、不同操作者判定結果的差異較TAT低。見表2。

表2 MGCP、TAT新生兒溶血病三項試驗的靈敏度及方法學特點對比
2.3 MGCP、TAT檢測的凝集強度比較 采用TAT行紅細胞直接抗球蛋白試驗、血清游離抗體檢測試驗、紅細胞放散液鑒定試驗檢出新生兒溶血病陽性血液標本,經MGCP檢測全部為陽性,此外,MGCP同時檢出TAT紅細胞直接抗球蛋白試驗、血清游離抗體檢測試驗、紅細胞放散液鑒定試驗的12例、12例、13例陰性血液標本,判讀結果時,MGCP檢測的凝集強度較TAT高1+~2+。
母嬰ABO血型不合是引起新生兒溶血病的常見因素之一,主要表現為核黃疸、貧血、黃疸等,其臨床后果雖然沒RhD血型不合新生兒溶血病嚴重,但其發生率較高,對新生兒的危害性更大,盡早確診并給予有效治療對防止發生嚴重后遺癥具有重要意義[4]。
三項試驗作為臨床檢測ABO血型不合新生兒溶血病的主要血清學方法,其中血清游離抗體檢測試驗可檢出IgG的存在,其結果陽性表示患兒血液中存在針對紅細胞抗原的抗體,可起到良好輔助診斷作用[5]。紅細胞直接抗球蛋白試驗、紅細胞放散液鑒定試驗主要用于檢查紅細胞是否受到IgG抗體致敏,但患兒紅細胞A、B抗原較少,且發育不成熟,致使直抗檢測反應較弱,有時甚至無法檢出,而紅細胞放散液鑒定試驗為三項試驗敏感度最高的試驗,因為其試驗中應用的紅細胞比直抗試驗多數百倍,相關研究指出,放散試驗一旦檢出陽性結果,則可明確診斷為ABO血型不合新生兒溶血病[6]。因此,如何提高ABO血型不合新生兒溶血病三項試驗陽性檢出率及敏感度,一直是臨床研究的重點之一。TAT作為臨床檢測新生兒溶血病的常規方法,能較敏感檢出紅細胞膜上的不完全抗體及補體,但其操作繁瑣、耗時、重復性差,對操作者要求高,結果無法保存,難以標準化,致使其應用具有一定局限性[7]。而MGCP屬于改良的抗人球蛋白試驗,省略了洗滌步驟,有效縮短檢測用時,且具有血清量少、靈敏度高、操作便捷、結果清晰、可修復性好等優勢,有逐漸取代TAT的趨勢[8]。本文將MGCP、TAT應用于新生兒溶血病三項試驗,結果顯示,MGCP最終檢出新生兒溶血病陽性74,陽性檢出率為92.50%,明顯高于TAT的61例、76.25%,且采用MGCP行新生兒溶血病三項試驗的診斷靈敏度均高于TAT(P<0.05)。可見MGCP顯著提高ABO血型不合新生兒溶血病陽性檢出率,可有效減少漏診。檢測方法學方面,MGCP檢測所用時間短于TAT,操作條件要求低于TAT,不同操作者判定結果的差異小于TAT,判讀結果時,MGCP檢測的凝集強度較TAT高1+~2+。進一步證實MGCP更適合應用于ABO血型不合新生兒溶血病三項試驗。
綜上可知,采用MGCP行新生兒溶血病三項試驗的靈敏度較高,能顯著提高ABO血型不合新生兒溶血病陽性檢出率,可有效減少漏診,且MGCP檢測更簡單、便捷、直觀,可為臨床診斷新生兒溶血病提供可靠依據,具有較高應用價值。