TP-ELISA、TRUST以及兩種方法聯(lián)合檢測在梅毒感染診斷中的價值

(濮陽市紅十字中心血站，河南 濮陽 457000)

梅毒是由梅毒螺旋體(Treponema pallidum,TP)感染所引起的慢性性傳播疾病，其傳染力強，危害性大，臨床癥狀千變?nèi)f化，早期侵犯皮膚與生殖器，進一步會隨淋巴系統(tǒng)、血液循環(huán)向全身擴散，造成全身各臟器損傷，甚至威脅生命安全。如能早期發(fā)現(xiàn)、正規(guī)治療對患者預后具有積極意義 。目前臨床上對于梅毒螺旋體感染的檢測常采用梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(Treponema pallidum enzyme-linked immunosorbent assay,TP-ELISA)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(Toluidine red unheated serological test，TRUST)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(Treponema pallidum particle assay，TPPA)等方法進行[1]。其中TPPA 法檢測梅毒具有靈敏度、特異度均較高的優(yōu)點，普遍將其作為梅毒診斷的“金標準”，但該方法費用昂貴，操作繁瑣，專業(yè)要求較高，在基層篩查中難以廣泛使用。TP-ELISA、TRUST兩種方法因其實用、方便、快捷等優(yōu)點而被廣泛使用，但其存在假陽性、假陰性等現(xiàn)象，檢測準確性尚未明確[2]。本次研究以219例疑似梅毒患者血清作為研究對象，以TPPA法檢測結(jié)果作為標準，評價TP-ELISA法、TRUST法以及兩種方法聯(lián)合檢測對梅毒的診斷價值，為梅毒的早期診斷提供參考依據(jù)。報告如下。

1 資料與方法

1.1 樣本來源

血清樣本來自2017年1月～2017年12月在濮陽市紅十字中心血站就診初步診斷為疑似梅毒的219例患者，患者中男133例，女86例；年齡24～53歲，平均(32.7±6.9)歲。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 所有患者血清均使用TP-ELISA、TPPA、TRUST等方法進行檢測。TP-ELISA將微孔板用特異性原包裹后再檢測血清中的抗TP-IgM、抗TP-IgG抗體，采用酶標儀儀器(美國Molecular Devices，型號：SpectraMax M5)450 nm讀取吸光度(A值)，A值小于臨界值為陰性，A值大于臨界值為陽性；試劑盒由上海實業(yè)科華公司生產(chǎn)。TPPA將菌株純化后進行抗原抗體反應，檢測血清中的抗體，采用稀釋液在U形板上將每份血清樣本作倍比稀釋，加致敏粒子孔≥1∶80凝集為陽性，試劑盒由日本富士株式會社生產(chǎn)。TRUST在血清凝集后對非特異性抗體檢測，試劑盒由上海榮盛藥業(yè)有限公司提供。所有操作均嚴格按照說明書要求進行。

1.2.2 觀察指標 以TPPA法檢測結(jié)果作為標準，對比TRUST法、TP-ELISA法和兩種方法聯(lián)合檢測所得靈敏度和特異度。靈敏度是指檢查(或篩檢)方法將實際有病的人正確判斷為患者的能力，靈敏度=(試驗陽性的患者數(shù)/患者數(shù))*100%，假陰性率=1-靈敏度；特異度是指檢查(或篩檢)方法將實際無病的人正確判斷為非患者的能力，特異度=(試驗陰性的非患者數(shù)/非患者數(shù))*100%，假陽性率=1-特異度；約登指數(shù)=靈敏度+特異度-1。

1.3 統(tǒng)計學方法

研究數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行，計數(shù)資料用%表示，組間比較用χ2檢驗，以P<0.05為差別有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 TP-ELISA和TRUST兩種方法對疑似梅毒診斷結(jié)果比較

以TPPA法診斷結(jié)果作為金標準，219例疑似梅毒患者中130例診斷為梅毒。TP-ELISA法檢測199例符合診斷，其中陽性114例符合診斷，陰性85例符合診斷；TRUST法檢測175例符合診斷，其中陽性92例符合診斷，陰性83例符合診斷；TP-ELISA+ TRUST聯(lián)合檢測209例符合診斷，其中陽性123例符合診斷，陰性86例符合診斷。TP-ELISA+ TRUST組對疑似梅毒診斷準確率高于TP-ELISA組和TRUST組，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=27.90，P<0.05)。見表1。

表1 TP-ELISA 和TRUST兩種方法與TPPA法檢測梅毒螺旋體結(jié)果比較 n(%)

2.2 TP-ELISA和TRUST兩種方法對梅毒診斷價值比較

結(jié)果顯示，TP-ELISA法和TRUST法對梅毒感染診斷的靈敏度分別為87.69%和70.77%，特異度分別為95.51%和93.26%，約登指數(shù)分別為0.8320和0.6403。而TP-ELISA+TRUST聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度、約登指數(shù)均較高，分別為94.62%、96.63%、0.9125。見表2。

表2 TP-ELISA和TRUST兩種方法對梅毒診斷價值的比較

3 討論

由于梅毒的唯一宿主是人類機體，其病程較為漫長，癥狀復雜，人體感染后會出現(xiàn)兩種抗體，其中一類是非特異性抗體，梅毒螺旋體在破壞機體組織過程中產(chǎn)生的一種抗原性心磷脂，使得機體產(chǎn)生反應素，但該類抗體不會直接針對梅毒螺旋體，無特異性；另一類則為抗梅毒螺旋體的特異性抗體，常侵犯機體各組織、器官，增加診斷難度[3]。臨床研究指出，機體感染梅毒后IgM抗體與IgG抗體分別在2周、4周后形成，非特異性抗體物質(zhì)的反應素則晚于特異性抗體，在5～7周后形成[4]。

TP-ELSIA法也被稱為雙抗原夾心法，是一種臨床較為普遍使用的特異性檢測技術，通過檢測梅毒螺旋體特異性IgM抗體和IgG抗體進行診斷，其操作簡單、快捷、全自動化檢測等特征，且價格較低，儀器操作規(guī)范，資料便于保存，適合樣本量大的體檢、流行病學調(diào)查[5]。TRUST作為非特異性抗體試驗，抗原為心磷脂加入活性炭組成復合物，通過檢測血清中抗心磷脂抗體滴度進行診斷，具有操作簡單、價格低等優(yōu)點，但其檢測結(jié)果與其他疾病會出現(xiàn)同樣的非特異性反應，易于形成假陽性結(jié)果[6]。

本次研究219例初診疑似梅毒患者中130例通過TPPA試驗結(jié)合臨床癥狀最終確診。研究結(jié)果顯示TP-ELISA法和TRUST法對疑似梅毒診斷準確率分別為90.87%和79.91%，兩種方法單獨診斷雖然特異度均較高，但靈敏度卻相對較低，漏診率較高，但如果將兩種方法聯(lián)合使用對梅毒感染診斷準確率可達到95.43%，而且可明顯提高診斷的靈敏度以及降低漏診率，約登指數(shù)達到0.9125，具有較高診斷價值。提示在臨床工作中 ，TP-ELISA法和TRUST法雖然操作簡單、快捷，但梅毒鑒別診斷較為復雜，單一檢測容易受其它因素影響，出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果，從而影響進一步治療，但將兩種方法聯(lián)合檢測可以以較低的成本獲得更好檢查效果。

綜上所述，TP-ELISA、TRUST兩種方法診斷梅毒感染快捷、實用、操作簡單，但單獨使用靈敏度相對較低，漏診率較高，將兩種方法聯(lián)合使用可顯著提高靈敏度，增強發(fā)現(xiàn)病人的能力，減少漏診的發(fā)生，對梅毒感染診斷價值較高，值得在臨床廣泛應用。