遺傳高風險乳腺癌患者BRCA1/2 編碼區SNP 突變頻率及其與腫瘤臨床病理特征相關研究

胡泓 周文斌

乳腺癌是臨床發病率較高的一種惡性腫瘤，且近年來其發病率不斷升高。在女性惡性腫瘤中其發病率居第一位，死亡率居第5位。而隨著細胞生物學和分子生物技術的不斷發展，乳腺癌發病機制也取得了長足進展。既往研究證實，乳腺癌與遺傳易感基因的突變密切相關，乳腺癌致病基因突變及基因多態性高危位點如何進行鑒定，是遺傳傾向性乳腺癌的研究重點[1]。乳腺癌易感基因1/2（breast cancer susceptibility gene 1/2，BRCA1/2）是公認的惡性腫瘤易感基因，參與染色體重組、轉錄、調控、細胞周期調節及DNA損傷修復等[2]。本研究中，選取85例遺傳高風險乳腺癌患者和85例健康人員進行，檢測其BRCA1/2編碼區SNP突變頻率，探討遺傳高風險乳腺癌患者BRCA1/2編碼區SNP突變頻率及其與腫瘤臨床病理特征相關性。現具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年月—2018年3月我院收治的85例遺傳高風險乳腺癌患者作為乳腺癌組，另外選取同期健康人員85例為健康對照組，所有入組人員均自愿簽署研究知情同意書，經病理學診斷確診為遺傳高風險乳腺癌[3]；發病年齡≤50歲，至少有1個一級或二級親屬為發病年齡≤50歲的乳腺癌患者。排除同時合并其他類型腫瘤或乳腺癌為繼發性腫瘤者。乳腺癌組患者年齡35～75歲，平均年齡（56.91±7.12）歲；BMI18.3～25.1 kg/m2，平均BMI（22.48±0.94）kg/m2。健康對照組受檢人員年齡35～75歲，平均年齡（57.10±7.63）歲；BMI18.2～24.8 kg/m2，平均BMI（22.57±1.01）kg/m2。兩組人員的基線資料比較差異無統計學意義（P ＞0.05），研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

取受檢者外周靜脈血5 mL，置于抗凝管中備用。提取基因組DNA，對BRCA1和BRCA2基因所有編碼區及內含子和外顯子拼接區進行聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）。PCR產物經變性高效液相色譜分析篩查，若出現異常峰型的PCR樣品則進行DNA直接測序。

核酸序列位置編碼在美國國家生物技術信息中心網站和乳腺癌信息中心網站數據庫上進行查詢比對[4]，對無報道的致病意義不明的編碼區突變位點分類為未知功能突變，將非編碼區或不引起氨基酸改變的突變位點分類為基因多態性位點。

1.3 觀測指標

記錄入組遺傳高風險乳腺癌患者BRCA1/2編碼區SNP突變頻率，突變率＞5%作為高頻突變位點評判標準；比較遺傳高風險乳腺癌患者與健康人員BRCA1/2編碼區SNP突變頻率；單因素分析rs80356892位點多態性和與腫瘤臨床病理特征相關性。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 遺傳高風險乳腺癌患者BRCA1/2編碼區SNP突變頻率

研究中共發現34個BRCA1/2編碼區SNP基因位點，其中14個SNP位點位于BRCA1基因，20個SNP位點位于BRCA2基因。所有SNP基因位點中，根據突變率＞5%，共有19個SNP基因位點屬于高頻突變位點。乳腺癌患者共有22個SNP基因位點的突變頻率高于正常人群，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 rs80356892位點多態性和與腫瘤臨床病理特征相關性

rs80356892基因位點突變與遺傳高風險乳腺癌患者是否有家族遺傳性、腫瘤位置、淋巴結轉移、ER陰性以及PR陰性有密切聯系（P＜0.05）。見表2。

3 討論

既往研究證實，遺傳性乳腺癌主要與多種基因的高外顯性突變有關[5]。基因突變一般是由于堿基的插入或缺失引起，可導致基因功能的改變，導致蛋白翻譯的中斷或改變[6]。大數據顯示，所有基因突變中，致病性突變占60%～70%[7-8]。BRCA1/2基因作為公認的，與乳腺癌關系密切的抑癌基因[9-10]。本研究中，共發現34個BRCA1/2編碼區SNP基因位點，其中14個SNP位點位于BRCA1基因，20個SNP位點位于BRCA2基因。所有SNP基因位點中，根據突變率＞5%，共有14個基因位點屬于高頻突變位點。乳腺癌患者共有22個SNP位點的突變頻率高于正常人群（P＜0.05）。此外，針對過往研究[11-12]中證實與乳腺癌發生有密切聯系的rs80356892基因位點，本研究中發現其突變與遺傳高風險乳腺癌患者是否有家族遺傳性、腫瘤位置、淋巴結轉移、ER陰性以及PR陰性有密切聯系（P＜0.05）。由此可見，部分BRCA1/2編碼區SNP基因位點可能參與乳腺癌的發生與發展。

表1 遺傳高風險乳腺癌患者BRCA1/2 編碼區SNP 突變頻率

表2 rs80356892 位點多態性和與腫瘤臨床病理特征相關性

綜上所述，BRCA1/2基因的有害突變可能是遺傳性乳腺癌發生的原因之一，部分BRCA1/2基因編碼區突變與遺傳高風險乳腺癌臨床病理特征有密切聯系。