基層醫院感染病原菌分布及耐藥性分析

潘三妹 劉萬能 張 林 張發蘇

細菌的耐藥性是指致病微生物對于抗菌藥物作用的耐受性和對抗性。它是抗菌藥物、細菌本身及環境共同作用的結果。近年來，隨著抗菌藥物的大量不合理的使用，使細菌的耐藥情況愈加嚴峻。MRSA、ESBLs、CRE的檢出率一直在增加，細菌的多重耐藥檢出率也在不斷增加，耐藥菌的分布及對抗生素耐藥情況在不同地區呈現不同特征，為了解基層醫院感染病原菌的臨床分布及耐藥情況，提高基層社區醫療機構臨床治療水平，2017年3 月-2018 年9 月對蕪湖廣濟醫院及社區醫療機構臨床送檢標本的分離菌進行分布及其耐藥性統計分析。現報告如下：

1 材料與方法

1.1 材料 ①菌株來源：收集蕪湖廣濟醫院及社區醫療機構2017 年3 月-2018 年9 月臨床各類送檢標本分離菌株共171 株（剔除同一患者同一部位的重復菌株）。②試劑與儀器：培養使用培養基購自法國科瑪嘉，細菌鑒定板條購自法國梅里埃公司，藥敏紙片購自英國OXOID公司，藥敏實驗用的MH瓊脂購自杭州濱河微生物試劑有限公司。

1.2 方法

1.2.1 菌株鑒定及藥敏實驗 臨床分離菌株的鑒定均使用梅里埃公司的API鑒定板條，藥敏均采用紙片擴散法（Kirby-Bauer）,質控菌：大腸埃希菌ACTT 25922，銅綠假單胞ATCC 27853，金黃色葡萄球菌ACTT 25923。藥敏試驗結果按CLSI2017 年版判斷標準[1]。

1.2.2 耐碳青霉烯的腸桿菌科細菌（CRE） 對亞胺培南、美羅培南或厄他培南中任一種藥物耐藥者。藥敏試驗結果按CLSI2017 年版判斷標準[1]。

1.2.3 MRSA的檢測 采用頭孢西丁擴散法，挑選來自孵育過夜的瓊脂平板培養物，制備被檢菌株懸液，調整至0.5 號麥氏濁度，后密集劃線，貼頭孢西丁（30μg/片），空氣中33 ℃～35 ℃孵育16～18 h后讀取抑菌圈直徑。藥敏試驗結果按CLSI2017 年版判斷標準[1]。

1.2.4 產ESBLs菌株的檢測 ①篩選方法：頭孢他啶抑菌圈≤22 mm，頭孢噻污抑菌圈≤27 mm。②表型確證試驗：兩個組合中任何一組加克拉維酸比不加克拉維酸的抑菌圈直徑增大值≥5 mm即為產ESBLs。藥敏試驗結果按CLSI2017 年版判斷標準[1]。

1.3 統計學分析 人工使用Excel表格進行統計分析。

2 結 果

2.1 細菌分布 2017年3月-2018年9月共分離非重復菌株171株，其中革蘭陽性菌54株（31.6%），革蘭陰性菌117 株（68.4%）。菌株主要來源于痰液（59.9%），尿液（30.6%）和分泌物（6.8%），其中，痰液中的主要分離菌為銅綠假單胞菌24株（27.3%），鮑曼不動桿菌17 株（19.3%）大腸埃希菌15 株（17.0%）。尿液中的主要分離菌為大腸埃希菌28 株（55.6%），糞腸球菌4 株（8.9%），金黃色葡萄球菌3 株（6.7%），屎腸球菌3 株（6.7%）。分泌物中的主要分離菌主要為金黃色葡萄球菌4 株（40.0%），奇異變形桿菌2株（20.0%）。主要菌株分布見表1。

2.2 主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥性

2.2.1 葡萄球菌屬 葡萄球菌屬中的MRSA和MRCNS的檢出率分別59%和100%（僅1株）。MSRA對其余抗菌藥物的耐藥率明顯高于MSSA，葡萄球菌屬對替考拉寧全敏感。具體藥敏結果見表2。

表1 2017-2018年臨床分離菌株的分布

表2 葡萄球菌屬細菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率(%)

2.2.2 腸球菌屬 腸球菌屬中糞腸球菌共5 株（62.5%），屎腸球菌3 株（37.5%）。腸球菌屬中屎腸球菌對多數測試藥物的耐藥率顯著高于糞腸球菌。屎腸球菌對呋喃妥因、利奈唑胺、慶大霉素全敏感。糞腸球菌對氨芐西林、利奈唑胺和呋喃妥因全敏感。具體藥敏結果見表3。

表3 腸球菌屬細菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率(%)

2.3 主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率

2.3.1 腸桿菌科細菌 大腸埃細菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯和產酸克雷伯）和奇異變形桿菌產ESBL的菌株檢出率分別為44.4%、36.4%和50%。產ESBL的菌株對其余檢測藥物的耐藥率明顯高于非產ESBL株。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬對氨芐西林的耐藥率為100%。大腸埃希菌對碳青霉烯類藥物的敏感性為91%，即CRE的檢出率為9%。克雷伯菌屬的CRE檢出率為38%。變形桿菌屬對哌拉西林/他唑巴坦的敏感率為100%。具體藥敏結果見表4。

表4 腸桿菌科細菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率(%)

2.3.2 不發酵糖的革蘭陰性桿菌 銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率均為24%。鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率均為82%，鮑曼不動桿菌對氨基糖苷類，青霉素類和酶抑制劑類藥物的耐藥性全部大于75%。見表5。

表5 不發酵糖革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率（%）

2.3.3 沙門菌屬 分離出1 株乙型副傷寒沙門菌，此株沙門菌對氨芐西林、復方磺胺和頭孢曲松耐藥。

3 討 論

本研究2017 年3 月-2018 年9 月共分離出非重復菌株171 株，占前五位的分別是大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、金黃色葡萄球菌和克雷伯菌屬。與2017 年中國CHINET細菌耐藥性監測的數據略有所不同（CHINET的前五位分別是大腸埃希菌、克雷伯菌屬、不動桿菌屬、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌）[2]。

本次監測結果顯示，MRSA的檢出率為59%，高于2017 年中國CHINET細菌耐藥性監測的結果[2]。MSRA對其余抗菌藥物的耐藥率明顯高于MSSA。因凝固酶陰性的葡萄球菌只分離出來一株，且為MRCNS，不足以說明問題。腸球菌屬中屎腸球菌對多數測試藥物的耐藥率顯著高于糞腸球菌。與2017 年中國CHINET細菌耐藥性監測數據一致[2]。且糞腸球菌和屎腸球菌對呋喃妥因和利奈唑胺全敏感。

在腸桿菌科細菌中，克雷伯菌屬的檢出率為21.3%，明顯低于2017 年中國CHINET細菌耐藥性監測的數據[2]。大腸埃細菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯和產酸克雷伯）和奇異變形桿菌產ESBL的菌株檢出率分別為44.4%、36.4%和50.0%。產ESBL的腸桿菌科細菌對體外敏感實驗頭孢噻污的耐藥率高于對頭孢他啶的耐藥率。大腸埃希菌的CRE的檢出率分別為9%，顯示大腸埃希菌對碳青霉烯類的抗菌藥物仍有較高的敏感性，基本與徐添天等[3]報道保持一致。克雷伯菌屬CRE的檢出率為38%，高于王健等[4]耐藥監測結果，CRE的檢出率有所上升，需要引起我們的關注。

總之，必須加強對細菌耐藥性的監測及防控，協助基層社區醫療機構提高診療水平，促進抗菌藥物的合理使用。