蘇云金芽孢桿菌對PAHs的降解研究

雒曉芳 陳麗華 夏苗苗 許淑娟 熊梅

（1. 西北民族大學實驗教學部，蘭州 730030；2. 西北民族大學化工學院，蘭州 730030；3. 西北民族大學生命科學與工程學院，蘭州 730030）

多 環(huán) 芳 烴（Polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs）是石油、煤、煙草、各種木材，以及有機高分子化合物等不完全燃燒或在還原條件下經(jīng)熱分解所產(chǎn)生的高毒性、揮發(fā)性化合物，是主要的環(huán)境和食品污染物［1-3]。這些污染物進入土壤之后會經(jīng)歷極其復雜的化學變化，長此以往，將對土壤的正常結(jié)構(gòu)、生態(tài)平衡造成極大的危害［4-5]。PAHs根據(jù)苯環(huán)數(shù)量可分為低環(huán)和高環(huán)（苯環(huán)≥4）PAHs 兩類，有研究發(fā)現(xiàn)，隨著苯環(huán)數(shù)量的增多，其毒性就越高，生物可利用性越差，越不易被降解［6]。此外，若PAHs存在于環(huán)境中的時間越長，其遺傳毒性也會增強，所以及時處理環(huán)境中此類污染物尤為重要。

PAHs在自然界中存在著生物水解、光作用裂解、降解等消除方法［7]，使得環(huán)境中的PAHs含量始終保持著一個動態(tài)的平衡［8-9]。然而近幾年來，人類生產(chǎn)活動的加劇，使環(huán)境中的動態(tài)平衡遭到很大破壞，環(huán)境中的PAHs大量增加。所以多環(huán)芳烴的降解方法已成為了我們現(xiàn)在研究的熱題。多環(huán)芳烴的去除手段主要有3種：一是直接使用物理措施如加熱揮發(fā)、混凝沉淀法、填埋和吸附等；二是化學辦法如光氧化、化學藥劑氧化及臭氧氧化等；三是生物處理法［1]。而對于多環(huán)芳烴的降解現(xiàn)在采用得最多的則是微生物處理法。微生物處理降解多環(huán)芳烴適用范圍廣、成本低，工業(yè)化程度較高，并且研討較多，現(xiàn)已被很多工廠利用，特別是有機污染物廢水處理廠。微生物具備較強的分解代謝能力和較高的代謝速率，且微生物品種多樣化，許多細菌、真菌、藻類如假單胞菌屬（Pseudomonas）、分枝桿菌屬（Mycobacterium）、諾卡氏菌屬（No-cardia）、芽孢桿菌屬（Bacillus）、微球菌屬（Micrococcus）等［10-13]都具有降解多環(huán)芳烴的能力。其中在環(huán)境土壤中發(fā)揮主要貢獻的是細菌［14]。修復 PAHs 污染已成為當前國內(nèi)外環(huán)境科學界的共同話題和主攻熱點，利用微生物降解PAHs是當前控制土PAHs 污染的主要途徑。目前國際上很多學者正在致力于多環(huán)芳烴降解菌的篩選工作，可以降解四環(huán)及四環(huán)以上 PAHs的微生物主要有田頭菇屬（Agro-cybe）、芽孢桿菌（Bacillus）、布克氏菌屬（Burkholderia）、黃桿菌屬（Flavobacterium）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、副球菌屬（Paracoccus）、分枝桿菌屬（Mycobacterium）、寡養(yǎng)食單胞菌（Stenotrophomonas）等［15]。童樂等［16]利用秸稈做載體固定混合菌劑降解多環(huán)芳烴發(fā)現(xiàn)，其降解率較單純投加菌液或菌液與秸稈簡單混合有明顯提高。另外，菌體的疏水性是生物修復中的一個決定性因素，是影響細菌吸收和疏水性物質(zhì)降解的重要因素［17]。

蒽（Anthracene）、芘（Pyrene）、芴（Fluorene）、萘（Naphthalene）、菲（Phenanthrene）等是目前研究PAHs 微生物降解機制的常見環(huán)境污染物的模式化合物［7]。響應(yīng)面法（Response surface methodology，RSM）是在多因素數(shù)量處理實驗的分析中，分析試驗指標（因變量）與多個試驗因素（自變量）間的回歸關(guān)系，而這種回歸可能是曲線或者曲面的關(guān)系［18-19]。本研究主要是探討蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis）在不同溫度、pH、PAHs質(zhì)量條件下對蒽芘芴這3種化合物的降解特性，并利用響應(yīng)面設(shè)計的方法以溫度、pH、PAHs質(zhì)量為自變量，降解率為響應(yīng)值分析各因素之間的交互作用，分別篩選出降解蒽、芘、芴的最優(yōu)條件，為 PAHs 污染環(huán)境的微生物修復提供資源保障和科學依據(jù)。。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis，簡稱BT），由西北民族大學實驗教學部微生物學實驗室保存。

1.1.2 主要藥品 蒽、芘、芴，紅四氮唑（TTC），Tris堿，甲苯（分析純），環(huán)己烷（分析純），濃硫酸，濃鹽酸，凡士林，活性炭等。

1.1.3 儀器 KRQ-400P智能型人工氣候箱（上海齊欣科學儀器有限公司）；TU-1901雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；S.SW-CJ-2F凈化工作臺（上海躍進醫(yī)療器械廠）。

1.2 方法

1.2.1 菌種復活 將蘇云金芽孢桿菌接種于營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h后待用［20]。

1.2.2 菌懸液的制備 在無菌條件下，將前期復壯的蘇云金芽孢桿菌接種于滅菌后的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，包裝后置37℃恒溫培養(yǎng)24 h備用［21]。

1.2.3 單因素實驗設(shè)計 從溫度，pH，PAHs質(zhì)量3個自變量入手，研究其對蘇云金芽孢桿菌降解蒽芘芴的影響。

1.2.3.1 溫度梯度設(shè)定及實驗方法 根據(jù)芽孢桿菌的最適生長溫度范圍是30-38℃［22]，故選擇單因子試驗30、32、34、36及38℃五個梯度。

1.2.3.2 pH梯度設(shè)定及實驗方法 根據(jù)查閱文獻了解到蘇云金芽孢桿菌生長的最適pH為7-8［22-23]，所以設(shè)定pH為5.0、6.0、7.0、8.0、9.0五個梯度。

1.2.3.3 PAHs質(zhì)量梯度設(shè)定及實驗方法 根據(jù)蘇云金芽孢桿菌降解的質(zhì)量百分數(shù)為0.5-2 g/L［24]，故設(shè)計單因子試驗的梯度0.3、0.5、0.7和0.9 g/L 四個梯度試驗。

1.2.4 多因素實驗設(shè)計 在單因素實驗基礎(chǔ)上，利用Box-Behnken實驗設(shè)計原理以溫度，pH，PAHs質(zhì)量3個因素為自變量，降解率為響應(yīng)值設(shè)計三因素三水平的響應(yīng)面實驗，每組實驗重復3次。根據(jù)實驗結(jié)果進行方差分析以及響應(yīng)面分析，從而優(yōu)化實驗模型。響應(yīng)面設(shè)計因素與水平如表1。

表1 試驗因素與水平

1.2.5 模型驗證 通過響應(yīng)面法優(yōu)化蘇云金芽孢桿菌降解蒽、芘、芴的條件，并以優(yōu)化后的條件參數(shù)進行驗證實驗，比較模型預測值和實驗值，從而驗證模型的有效性。

2 結(jié)果

2.1 單因素實驗結(jié)果

2.1.1 溫度單因子條件下蘇云金芽孢桿菌對蒽芘芴的降解率影響 由圖1可知，在溫度的影響下，蘇云金芽孢桿菌對芴的降解率隨溫度的升高而呈逐漸上升趨勢，但在34℃之后降解率升值減緩；對蒽的降解率的影響不太明顯，作用曲線比較平緩，說明在溫度因素影響下蘇云金芽孢桿菌降解蒽的變化不大；而對芘的降解率的影響則出現(xiàn)了兩重性，溫度在30-34℃間降解率上升不明顯，但超過34℃時降解率明顯下降。由此可以得出蘇云金芽孢桿菌對芘的降解率最佳溫度是在34℃左右；在相同溫度影響下，蘇云金芽孢桿菌對蒽的降解率要比對芘和芴的降解率都高。對芘和芴作用在36℃左右出現(xiàn)交叉點。

2.1.2 pH單因子條件下蘇云金芽孢桿菌對蒽芘芴的降解率影響 據(jù)圖2分析，在同一pH值影響的條件下蘇云金芽孢桿菌對各物質(zhì)降解作用的影響也存在不同。蘇云金芽孢桿菌對蒽的作用曲線從pH在5-7時呈逐漸上升趨勢，而pH在7-9時卻有明顯下降趨勢，說明pH7時，蘇云金芽孢桿菌對蒽的降解率最大；而蘇云金芽孢桿菌對芘的降解作用曲線在pH7之前，隨pH的增大而上升，pH在7-8時下降幅度比pH在8-9時的下降幅度大，蘇云金芽孢桿菌對芘的作用曲線在pH8之后可能有回升的趨勢，但pH在5-9范圍內(nèi)，蘇云金芽孢桿菌對芘降解率最大時的pH與物質(zhì)蒽一致，均為pH7。在pH單因素影響下，蘇云金芽孢桿菌對芴的降解率呈不斷升值狀，但在pH7前后上升趨勢有所不同。在相同pH下，蘇云金芽孢桿菌對蒽、芘的降解率較對芴的降解率高很多。

圖2 不同pH條件下蘇云金芽孢桿菌對3種物質(zhì)的降解

2.1.3 PAHs質(zhì)量單因子條件下蘇云金芽孢桿菌對蒽芘芴的降解率影響 從圖3整體來看，分別就3個不同物質(zhì)來說，蘇云金芽孢桿菌降解蒽、芘、芴具有同步性，即隨著PAHs質(zhì)量的增加，其降解率都在逐漸下降，且呈持續(xù)下降的趨勢，只是3種物質(zhì)的下降幅度不同，對蒽和芘來說下降比較緩慢且兩者降解率在數(shù)值上相差不大，而對芴來說，下降坡度大，說明所用蒽、芘、芴的量越少，其被降解的效果就越佳，這對芴的作用相對另兩種物質(zhì)更為明顯。在增加PAHs質(zhì)量為0.9 g時，蘇云金芽孢桿菌對芴的降解率已經(jīng)下降到27.63%。從圖3可以看出，蘇云金芽孢桿菌對蒽和芘的降解率在PAHs質(zhì)量為0.9 g時最小，但其最小降解率比芴的最大降解率要大，說明同等PAHs質(zhì)量條件下蘇云金芽孢桿菌對蒽和芘的降解率均高于芴。

圖3 不同PAHs質(zhì)量條件下蘇云金芽孢桿菌對3種物質(zhì)的降解率

2.2 多因素實驗結(jié)果

2.2.1 蒽三水平因子設(shè)計與結(jié)果

2.2.1.1 蒽響應(yīng)面設(shè)計結(jié)果 根據(jù)單因素實驗結(jié)果，選擇溫度32℃、34℃、36℃，pH6.0、7.0、8.0，PAHs質(zhì)量 0.3 g、0.5 g、0.7 g 三因素三水平，利用Box-Behnken設(shè)計實驗如表2。

2.2.1.2 模型的建立及顯著性檢驗與誤差分析 根據(jù)表2中的數(shù)據(jù)可知：溫度為32.00℃，pH為7.00，PAHs質(zhì)量在0.30 g時降解率達到最大值99.70%；溫度為34.00℃，pH為6.00，PAHs質(zhì)量為0.70 g時，降解率最小為51.65%。利用 Design-Expert 8.0.6 Box-Behnken進行回歸分析，得到蘇云金芽孢桿菌對蒽降解率的二次模型為：

對該模型進行回歸方程系數(shù)顯著性分析見表3，誤差分析見表4。回歸模型P=0.000 6＜0.01 極顯著，表明該模型具有統(tǒng)計學意義。失擬項P=0.104 3＞0.05不顯著，說明外來因素對實驗的影響很小。決定系數(shù)R2=95.66%，R2adj=90.07%，說明響應(yīng)值的變化有95.66%是來源所選的變量［25]。精密度（Adeq precision）=12.438 7，是有效信號與噪音的比值，說明實驗模型合理［26]。

表2 蒽三水平因子實驗設(shè)計及結(jié)果

表3 回歸方程方差分析

2.2.1.3 響應(yīng)面交互作用分析 根據(jù)回歸模型，本實驗選取交互效果最好的曲面圖和等高線圖。將PAHs質(zhì)量固定，可以得到溫度和pH兩因素交互作用的響應(yīng)面圖及對應(yīng)等高線圖，如圖4反映了溫度和pH兩因素交互對降解率的影響顯著，表現(xiàn)為其等高線為橢圓形，且響應(yīng)面曲線走勢陡。3D圖上的最大響應(yīng)值在曲面上，與沿著某一因素坐標軸走向的最大值不重合，表明溫度、pH兩因素之間有交互影響。由響應(yīng)面曲線圖可以看出在pH為7.0-7.5，溫度在35.0-36.0℃時蘇云金芽孢桿菌對蒽的降解率最高，能達92%左右。

表4 回歸方程誤差統(tǒng)計分析

圖4 溫度和pH交互影響蘇云金芽孢桿菌降解蒽的響應(yīng)面圖及等高線圖

2.2.1.4 實驗結(jié)果優(yōu)化 根據(jù)實驗設(shè)計，得到降解蒽的優(yōu)化條件為溫度35.53℃，pH為7.16，PAHs質(zhì)量0.30 g，降解率預期可達92.13%。

2.2.2 芘三水平因子設(shè)計與實驗結(jié)果分析

2.2.2.1 芘響應(yīng)面設(shè)計結(jié)果 根據(jù)單因素實驗結(jié)果，選擇溫度32、34和36℃，pH6.0、7.0、8.0，PAHs質(zhì)量0.3 g、0.5 g、0.7 g 三因素三水平利用Box-Behnken設(shè)計實驗如表5。

表5 芘三水平因子實驗設(shè)計及結(jié)果

2.2.2.2 模型的建立及顯著性檢驗 根據(jù)表5中的數(shù)據(jù)降解率在溫度為34.00℃，pH為6.00，PAHs質(zhì)量在0.30 g時達到最大值95.32%。而在溫度為36.00℃，pH為7.00，PAHs質(zhì)量為0.70 g時，降解率最小為79.16%。利用 Design-Expert 8.0.6 Box-Behnken進行回歸分析，得到蘇云金芽孢桿菌對芘降解率的二次模型為：

對該模型進行回歸方程系數(shù)顯著性分析見表6，誤差分析見表7。回歸模型P＜0.000 1＜0.01極顯著，表明該模型具有統(tǒng)計學意義。失擬項（P=0.135 7＞0.05不顯著，即該模型在被研究的整個回歸區(qū)域內(nèi)擬合較好，因此可用該回歸方程代替實驗真實點對實驗結(jié)果進行分析。決定系數(shù)R2=97.40%，R2adj=94.05%＞80%，說明響應(yīng)值的變化有97.40%是來源所選的變量，且只有5.95%的變異能由該模型解釋。說明各試驗因素與響應(yīng)值之間線性關(guān)系顯著，試驗方法可靠。精密度（Adeq precision）=18.021 1，說明實驗設(shè)計合理。因此，該回歸方程可以描述各因素對蘇云金芽孢桿菌降解芘的影響，可利用該響應(yīng)面近似模型進行后續(xù)的優(yōu)化設(shè)計。模型中B、C、AC、BC、A2、B2、C2（P＜0.01）， 說 明 pH、PAHs質(zhì)量及兩者的二項式、PAHs質(zhì)量與溫度、pH交互項、溫度二項式具有極顯著影響，A、AB（P＞0.05），說明溫度、溫度與pH交互影響不顯著，表明實驗因素對響應(yīng)值是一種非線性關(guān)系。

表6 回歸方程方差分析

表7 回歸方程誤差統(tǒng)計分析

2.2.2.3 響應(yīng)面交互作用分析 根據(jù)芘的回歸模型，選取將PAHs質(zhì)量固定在一定水平，溫度和pH兩因素交互作用的響應(yīng)面圖及對應(yīng)等高線圖。圖5反映了溫度和pH兩因素交互對降解率的影響顯著性不是很理想，表現(xiàn)為其等高線偏離橢圓形，響應(yīng)面曲線走勢較陡，可從3D圖上中找到最大降解值。由響應(yīng)面曲線圖可以看出在pH為6.0-7.0，溫度在34.0-35.0℃蘇云金芽孢桿菌對芘的降解率最高，能達86%左右。

圖5 溫度和pH交互影響蘇云金芽孢桿菌降解芘的響應(yīng)面圖及等高線圖

2.2.2.4 實驗結(jié)果優(yōu)化 根據(jù)實驗設(shè)計，得到降解芘的優(yōu)化條件為溫度35.69℃，pH為6.16，PAHs質(zhì)量0.30 g，降解率預期可達87.08%。

2.2.3 芴三水平因子設(shè)計與實驗結(jié)果分析

2.2.3.1 芴響應(yīng)面設(shè)計結(jié)果 根據(jù)單因素實驗結(jié)果，選擇溫度32、34和36℃，pH 6.0、7.0、8.0，PAHs質(zhì)量0.3 g、0.5 g、0.7 g 三因素三水平利用Box-Behnken設(shè)計實驗如表8。

2.2.3.2 模型的建立及顯著性檢驗 根據(jù)表8中的數(shù)據(jù)降解率在溫度為36.00℃，pH為6.00，PAHs質(zhì)量在0.50 g時達到最大值89.71%。而在溫度為32.00℃，pH為7.00，PAHs質(zhì)量為0.70 g時，降解率最小為41.46%。利用 Design-Expert 8.0.6 Box-Behnken進行回歸分析，得到蘇云金芽孢桿菌對芴降解率的二次模型為：

對該模型進行回歸方程系數(shù)顯著性分析見表9，誤差分析見表10。回歸模型P=0.013 3＜0.05，說明試驗所采用的二次模型是顯著的，具有統(tǒng)計學意義。失擬項P=0.256 0＞0.05不顯著，說明外來因素對實驗的影響小，可用該回歸方程代替實驗真實點對實驗結(jié)果進行分析。決定系數(shù)R2=91.65%，R2adj=86.65%＞80%，說明響應(yīng)值的變化有91.65%是來源所選的變量，擬合度良好。因此，可用來對蘇云金芽孢桿菌降解芴的研究進行初步分析和預測。模型中AC（P＜0.01），說明溫度與PAHs質(zhì)量的交互項具有極顯著的影響，A、C、AB、A2（P＜0.05），溫度、PAHs質(zhì)量、溫度與pH交互項、溫度二項式對蘇云金芽孢桿菌降解芴影響顯著。

表8 芴三水平因子實驗設(shè)計及結(jié)果

表9 回歸方程方差分析

表10 回歸方程誤差統(tǒng)計分析

2.2.3.3 響應(yīng)面交互作用分析 根據(jù)回歸模型，選取將pH固定在一定水平，溫度和PAHs質(zhì)量兩因素交互作用的響應(yīng)面圖及對應(yīng)等高線圖。等高線近橢圓，反映了溫度和PAHs質(zhì)量兩因素交互對降解率的影響顯著。在回歸方程中，二次項系數(shù)為負，所表現(xiàn)為響應(yīng)面曲線走勢較陡，開口向下，可以確定最大降解率。由圖6可知，在溫度為34.0-35.0℃，PAHs質(zhì)量為0.4-0.5 g時，蘇云金芽孢桿菌對芴的降解率達到最大值83%左右。

圖6 溫度和PAHs質(zhì)量交互影響蘇云金芽孢桿菌降解芴的響應(yīng)面圖及等高線圖

2.2.3.4 實驗結(jié)果優(yōu)化 根據(jù)Design Expert Box-Behnken design中Optimization，得到降解芴的優(yōu)化條件為溫度34.91℃，pH為7.17，PAHs質(zhì)量為0.40 g，降解率預期可達83.56%。

2.3 驗證實驗

同多因素實驗方法，分別進行3個物質(zhì)的最后驗證試驗（表11）。將實際的實驗結(jié)果與響應(yīng)面設(shè)計分析所得的預測實驗結(jié)果進行對比，計算相對誤差，從而判斷優(yōu)化模型是否合理。

表11 模型驗證

在驗證試驗中，降解蒽的優(yōu)化條件為溫度35.53℃，pH為7.16，PAHs質(zhì)量0.30 g，降解率預期可達92.13%。經(jīng)驗證試驗得實際值為91.60%，相對誤差在±0.58%，說明該優(yōu)化的實驗模型有效性高，能夠有效預測蘇云金芽孢桿菌對蒽的降解情況。降解芘的優(yōu)化條件：溫度35.69℃，pH為6.16，PAHs質(zhì)量0.3 g，降解率預期可達87.08%。實際試驗值為86.62%，相對誤差在±0.53%。相對誤差在±2%以內(nèi)，即可以說明該實驗模型的有效性。降解芴的優(yōu)化條件為溫度34.91℃，pH為7.17，PAHs質(zhì)量0.40 g，降解率預期可達83.56%，與實際試驗值82.95%相對誤差為±0.73%。3個優(yōu)化實驗模型的相對誤差均在±2%以內(nèi)，說明33個模型有效性高，表明3個模型均能有效反映蘇云金芽孢桿菌在各自條件下對3種物質(zhì)的降解。

3 討論

當蒽、芘及芴的濃度達到 0.9 g/L 時，蘇云金芽孢桿菌對其三者的降解效果明顯降低，這可能是由于有毒有害的代謝產(chǎn)物在高濃度芘降解過程中積累，對微生物的生長及對3種物質(zhì)的利用產(chǎn)生了一定的抑制作用。陳曉鵬等［27]和Lu等［28]的相關(guān)研究也表明，微生物在降解芘的過程中，降解效果隨著芘初始濃度的升高而降低。

另外，響應(yīng)面方法RSM 也是一種尋找多因素系統(tǒng)中最佳條件的數(shù)學統(tǒng)計方法，是數(shù)學方法和統(tǒng)計方法結(jié)合的產(chǎn)物，已被廣泛應(yīng)用到微生物培養(yǎng)基優(yōu)化中，但以響應(yīng)曲面法來優(yōu)化芘共代謝降解條件的研究比較少。因此，本次實驗主要利用Design Expert 8.0.6.1軟件中的Box-Behnken設(shè)計版塊對前期實驗進行設(shè)計以及對實驗結(jié)果進行了方差分析以及對實驗模型進行了優(yōu)化。在多因素實驗中，不同物質(zhì)在不同條件交互影響下降解效果不同。對于蒽物質(zhì)來說，溫度和pH交互作用的響應(yīng)面曲線較陡，等高線近橢圓且變化較稀疏，說明溫度和pH交互項對降解率影響顯著；對芘來講，響應(yīng)面曲線較陡，等高線偏離橢圓形，說明溫度與pH兩者的交互作用微弱，表明溫度和pH對降解率峰值的影響不太大；對于芴，溫度與PAHs質(zhì)量兩因素交互作用對降解率的影響顯著。且從回歸方程可見，各具體實驗因子對響應(yīng)值的影響不是簡單的線性關(guān)系，二次項和交互項對響應(yīng)值都有很大關(guān)系。因為回歸方程中各項系數(shù)絕對值的大小也直接反映各因素對響應(yīng)值影響程度，系數(shù)的正負反映了影響的方向［29]。殘差分析是借助圖形分析工具進行評價的，殘差分析可以診斷響應(yīng)面優(yōu)化模型的正確性［30-31]，正確合理的模型要求殘差呈正態(tài)概率分布且誤差方差齊性檢驗合理. 此方面與國外微生物菌系降解多環(huán)芳烴方面的研究較近，具有良好的工業(yè)應(yīng)用前景［32-33]。在驗證試驗中，3種物質(zhì)在相應(yīng)的優(yōu)化條件下的實際降解率值與響應(yīng)面預測值的相對誤差均在2%以內(nèi)，說明該優(yōu)化的實驗模型有效性高，表明3個模型均能有效反映蘇云金芽孢桿菌在不同條件下對3種物質(zhì)的降解，并可將此實驗模型投入大型實驗田中。因此，選用響應(yīng)面優(yōu)化分析多種共代謝底物對降解率的影響，可有效提高微生物對難降解有機物的降解率，為治理PAHs 污染土壤提供理論依據(jù)。

4 結(jié)論

本研究表明，溫度與pH交互項對蒽、芘的降解影響顯著，溫度與PAHs質(zhì)量交互對芴的降解影響顯著。在優(yōu)化實驗中，3個優(yōu)化模型相對誤差均在2%以內(nèi)，表明3個實驗模型均可用于分析及預測蘇云金芽孢桿菌對蒽芘芴的降解效果。