毛木耳多糖的提取及生物活性的研究進展

馬昱陽 賈鳳娟 趙淑芳 弓志青 崔文甲 王延圣 王文亮

摘 要：從毛木耳多糖的提取、藥理功能及免疫活性等方面對其研究現狀進行綜述，為毛木耳多糖的研究提供科學依據。

關鍵詞：毛木耳多糖;提取;藥理功能;免疫活性

毛木耳富含膠體，口感爽滑且清脆，營養物質豐富，環境適應性較好、產量較高，但是針對毛木耳多糖的功能性研究較少。本文綜述了毛木耳多糖的提取純化、藥理功能及其免疫活性等方面的研究進展，為提高毛木耳多糖的得率以及毛木耳多糖功能的研究提供科學依據。

1 毛木耳多糖的提取方法

毛木耳多糖屬于酸性雜多糖，是從毛木耳子實體中經過熱水提取而得到的多糖，含有多種微量元素。毛木耳多糖純化后有2種組分，分別為APP-A、APP-B，它們均由甘露糖、葡萄糖、木糖、巖藻糖和糖醛酸等5種糖類組成[1]。

1.1 熱水浸提法

吳春敏等[2]用熱水浸提法提取毛木耳多糖，將毛木耳粉碎過篩，在80℃左右的熱水中浸提，浸提結束后，進行離心，取上清液濃縮，加乙醇進行多糖的沉淀，烘干脫水得到毛木耳粗多糖半成品。趙爽等[3]將毛木耳篩粉，按照比例料液1∶ 25進行水浴加熱4 h，溫度控制在90℃，接著在離心機2 000 r/min離心10 min，之后取混合液的上層清液，用乙醇來進行多糖的沉淀，最終得到毛木耳粗多糖。清源等[4]用1∶ 10的料液比，浸提時間為3 h，濾液加入乙醇沉淀，Sevage法除去蛋白質，得到粗多糖。

1.2 乙醇浸提法

賈衛梅等[5]用乙醇浸提法提取毛木耳粗多糖，乙醇作為浸提劑，需要2次浸提，第1次浸提需要乙醇的濃度為95%，第2次浸提需要乙醇的濃度為70%，將提取液離心，收集提取液進行濃縮，過濾，真空干燥，得到毛木耳粗多搪。

1.3 超聲波熱水浸提法

張丹鳳等[6]采用超聲波熱水浸提法提取毛木耳多糖，將毛木耳粉碎過篩，浸泡于水中，得到的溶液進行發酵，過濾，然后用超聲波破碎之后，將多糖提取液加入蒸餾水，水浴加熱3 h，最后計算每升發酵液的粗多糖含量。

1.4 酸堿浸提法

魏燕平等[7]為了提高多糖的提取率，采用不同的浸提溫度及料液比來進行試驗，發現料液比為1∶ 30，溫度90℃左右，提取率最高，接著通過酸堿溶液浸提的方法在最優條件下提取多糖，發現采用草酸銨、草酸及NaOH溶液等可提高實體多糖的提取率。

2 毛木耳多糖的藥理作用

2.1 抗凝血作用

在毛木耳的研究中，最多的是毛木耳多糖增加體內的凝血時間的藥理作用。吳春敏等[2]用毛木耳多糖液灌胃小鼠，通過進行體外抗凝血的實驗，發現毛木耳多糖能明顯延長體外血漿凝固時間。鐘韓等[8]研究發現，毛木耳多糖延長凝固血液的時間最主要的一種途徑是通過增加凝固血漿的原酶。經口給予小鼠毛木耳多糖，30d后發現小鼠凝血活酶時間延長。現在研究一般認為，毛木耳多糖主要通過調節內源性凝血系統來達到其抗凝血的作用。

2.2 抗血栓作用

毛木耳多糖抗血栓的作用方式主要有減緩優球蛋白溶解速度、增加纖溶酶活性、降低血小板的數量等。吳春敏等[9]通過進行纖維蛋白溶解時間影響的試驗，將毛木耳多糖灌胃小鼠，發現毛木耳多糖能夠縮短小鼠優球蛋白溶解時間約為34%，增加了纖溶酶的活力，將37 mg/kg毛木耳多糖液喂養小鼠，一段時間后取血，檢驗分析發現小鼠的血小板的數量減少。賈衛梅等[5]對毛木耳多糖進行研究，對毛木耳多糖去掉蛋白質進行試驗，發現它沒有抗血小板凝集的作用，推測毛木耳多糖的抗血小板聚集作用可能與含有蛋白質的多糖有關。

2.3 降血脂作用

吳春敏等[10]研究發現，毛木耳多糖液喂養患有高血脂癥的小鼠一段時間后，測定血清中的膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）及低密度脂蛋白（LDL-C）的含量，結果發現，3種物質的含量明顯降低。

2.4 抗氧化作用

毛木耳多糖在抗氧化作用方面比較顯著，是多糖研究的重點之一，毛木耳多糖提高抗脂質氧化作用的機理是通過清除自由基的方式。研究發現，毛木耳多糖清除自由基的方式主要是通過與羥基自由基發生反應來實現的，而毛木耳多糖對超氧離子的自由基清除率甚至更高[11]。所以推斷，毛木耳多糖抗氧化能力的基本原理是其結構中的活性羥基與羥自由基或者多糖中的活潑氫與活潑的超氧陰離子發生自由基反應，生成穩定的化合物水來實現的[2]。

3 毛木耳多糖免疫功能作用的研究

3.1 毛木耳多糖對免疫器官的影響

脾臟和胸腺是機體中免疫功能的重要免疫器官，因此脾臟與胸腺的重量變化也是用來進行免疫評價的標準之一。吳春敏等[2]通過用毛木耳多糖進行免疫反應的研究，發現毛木耳多糖能夠提高免疫抑制小鼠的脾指數。余夢瑤等[12]研究發現，毛木耳多糖能夠明顯提高小鼠免疫臟器的重量，反映出多糖能夠影響其免疫臟器的指數。

3.2 毛木耳多糖對免疫細胞的影響

在免疫應答過程中要有免疫細胞直接或者間接的參與，淋巴細胞和輔助細胞在免疫應答過程中扮演了重要的角色。其中，淋巴細胞在免疫應答過程中扮演著重要的角色，而起著輔助作用的兩種免疫細胞則是吞噬細胞和樹突狀細胞。吳春敏等[13]對小鼠進行毛木耳多糖的注射，然后吸取腹腔洗液制片觀察，發現注射75 mg/kg和150 mg/kg的小鼠體內吞噬率分別增加21%和53%，吞噬指數增加31%和95%。余夢瑤等[12]對小鼠進行碳粒廓清能力試驗，通過毛木耳多糖灌胃30d后發現，多糖促使碳粒廓清指數明顯提高，成正比例劑量關系，這些數據反映了毛木耳多糖對免疫功能低下的小鼠腹腔巨噬細胞具有較好的非特異性免疫促進作用，能夠加速淋巴細胞的轉化率。王道福[13]通過進行反向離子對高效液相色譜的方法來測定小鼠腹腔巨噬細胞蛋白激酶A活性，發現毛木耳多糖能夠引起小鼠腹腔巨噬細胞蛋白激酶A的活性升高，并且具有一定濃度劑量依賴性。

3.3 毛木耳多糖對免疫球蛋白的影響

在動物的血液血清、淋巴液、組織液及其他外分泌液中都含有一種具有免疫功能的物質——免疫球蛋白。余夢瑤等[12]通過對小鼠隨機分組，給予口服不同劑量的毛木耳多糖液，增加空白組，一段時間后在尾部靜脈注射墨汁進行血清溶血素抗體生成實驗，發現毛木耳多糖灌胃的小鼠，血清溶血素抗體生成的能力水平明顯比空白組高，且差異明顯。陳瓊華等[11]進行毛木耳多糖的分離、分析及免疫藥理活性的研究，發現小鼠灌胃毛木耳多糖后測定半數溶血值HC50，HC50值比空白對照組提高，而且吞噬指數K明顯提高，這些實驗說明毛木耳多糖具有明顯增強免疫的功效。

4 研究展望

毛木耳具有較高的經濟價值和社會生態效益，提高毛木耳多糖的提取率，研究毛木耳的藥理功能作用及提高免疫的作用，對毛木耳多糖生物活性研究和發展具有重要意義。

參考文獻

[1]和壽英，熊子仙.毛木耳多糖的分析研究[J].云南師范大學學報（自然科學版），1999（4）：40-42.

[2]吳春敏，陳瓊華.毛木耳多糖的分離、分析及免疫藥理活性的研究[J].中國藥科大學學報，1991（2）：97-100.

[3]趙爽，劉宇，許峰，等.毛木耳多糖降血脂功效研究[J].食品科技，2013（6）：192-195.

[4]清源，余夢瑤，羅霞，等.毛木耳子實體中活性多糖APPⅡA的分離純化與結構初探[J].菌物學報，2009，28（6）：813-818.

[5]賈衛梅，何國襄，劉晶.毛木耳對血小板聚集作用的成分研究[J].中國食用菌，1991（2）：45-47.

[6]張丹鳳，鄭仕棟，陳國平，等.白背毛木耳胞內多糖的提取與純化[J].食用菌學報，2010，17（3）：51-54.

[7]魏燕平，楊梅.白背木耳子實體多糖和菌絲體多糖提取方法的研究[J].寧德師范學院學報（自然科學版），1998（1）：71-73.

[8]鐘韓，楊振湖，李惠英，等.毛木耳粗多糖止血機制初探[J].中國食用菌，1991（2）：14-15.

[9]吳春敏，陳瓊華.毛木耳多糖的抗凝血和降血脂作用[J].中國藥科大學學報，1991（3）：164-166.

[10]吳春敏，陳瓊華.毛木耳多糖對實驗性血栓形成的影響[J].中國生化藥物雜志，1992（2）：45-46.

[11]吳春敏，陳瓊華.毛木耳多糖耐缺氧作用及對心臟和血壓的影響[J].中國生化藥物雜志，1992（1）：21-23.

[12]余夢瑤，張劍，朱小牧，等.毛木耳多糖對小鼠免疫功能的影響[J].時珍國醫國藥，2012，23（11）：2711-2713.

[13]王道福，邵林萍，菊保文，等.毛木耳多糖對小鼠腹腔巨噬細胞蛋白激酶 A活性的影響[J].解放軍藥學學報，2002，12（1）：102-103.

Abstract：This paper reviewed the research advancement of Auricularia polytricha polysaccharides from three aspects of extraction，pharmacological function and immune activity to afford scientific basis for future research and development.

Keywords：Auricularia polytricha polysaccharide;extraction;pharmacological function;immune activity

（責任編輯 唐建敏）