循環腫瘤細胞輔助診斷乳腺癌的研究進展與展望

劉德總 李坤鵬 楊穎濤

【摘 要】乳腺癌是威脅女性健康最常見的癌癥類型之一，其發病率居于女性惡性腫瘤首位。常規的診斷、藥物療效評估、疾病狀態監測方法主要采用超聲、鉬靶X射線、磁共振等。但在早期乳腺癌診斷方面，診斷手段仍然非常匱乏，從而導致患者初診時已經是中晚期甚至已經有其他臟器轉移，大大縮短了患者的總生存期，也給患者家庭和社會也帶來了巨大的負擔。研究已證實，循環腫瘤細胞（Circulating Tumor Cells，CTCs）在藥物療效評估及預后預測方面比現有的臨床手段更具優勢，關于循環腫瘤細胞在乳腺癌輔助診斷中價值的研究也有開展，本文從循環腫瘤細胞在乳腺癌疾病診斷中的價值方面進行綜述，旨為臨床診療、科研工作提供參考。

【關鍵詞】乳腺癌;循環腫瘤細胞;診斷;液體檢測;

【Abstract】Breast cancer is one of the most common type of cancer threat to women's health， the incidence of malignant tumors in women. Conventional methods of diagnosis， drug efficacy evaluation and disease status monitoring were mainly used such as ultrasound， molybdenum target X-ray and magnetic resonance. However， in the early diagnosis of breast cancer， the diagnostic means are still very poor， which leads to the initial diagnosis of patients in the middle and late stage or even other organs metastasis， which greatly shortens the overall survival of patients， and also brings a huge burden to the patient's family and society. Research has confirmed that Circulating Tumor Cells （Circulating Tumor Cells， CTCs） in the evaluation of drug efficacy and prognosis prediction has more advantages than the existing means of clinical， auxiliary diagnostic value on Circulating Tumor Cells in breast cancer research also has carried out， this article from the value of Circulating Tumor Cells in breast cancer diagnosis were summarized， aim to provide reference for clinical diagnosis and treatment and scientific research.

【Keywords】breast cancer;circulating tumor cells;diagnosis;liquid detection;

引言

2018年全球新發乳腺癌2 088 849 例，占女性惡性腫瘤的24.2%死亡626 679例，占女性惡性腫瘤的15.0%，是女性最常見的癌癥且是癌癥死亡的主要原因[1]。近幾年，利用外周血液標本進行循環腫瘤細胞計數并檢測其分子生物學特性，能夠無創實時監測患者對藥物治療的反應、疾病進展，根據其分子生物學特性探索個體化精準的治療方案。2018 年 6 月美國癌癥聯合委員會（American Joint Committee on Cancer，AJCC）指南將 CTCs 列為繼 ER/PR、HER2、Ki67和腫瘤組織學分級4項生物學指標之后的又一乳腺癌預后評估指標。

如何使乳腺癌患者受益最大化，不僅取決于根據不同個體的分子分型和臨床分期等為患者提供精準的、個性化的治療，采用不同的評估方法監測對藥物的反應，適時更改治療方案以提升病理完全緩解率，延長患者總生存期，也取決于采用先進的技術手段在疾病早期階段即發現乳腺癌并接受治療。循環腫瘤細胞在乳腺癌輔助診斷領域的價值也得到了證實了，其在乳腺癌輔助診斷中很大程度上彌補了其他方法的不足。

1 CTCs檢測技術在乳腺癌輔助診斷領域的研究

Yap等利用無標簽微流控平臺進行一項了研究，收集了108名乳腺癌患者的外周血樣本，其中大多數為轉移性乳腺癌患者（76/108;70.4%）。結果：乳腺癌標本檢出率75.9% （n = 108;中位：8 CTCs /7.5 ml血） [2]。

K?nigsberg等利用利用CTCs和血細胞密度的差異進行密度梯度離心的方法進行了一項研究，入組26例不同分期的轉移性乳腺癌患者，旨在分析轉移性乳腺癌患者原發腫瘤組織上皮細胞粘附分子（EpCAM）表達與相應患者CTCs檢出率的相關性。 結果：總檢出率為76.9%（20/26）; T1、T2、T3、T4檢出率分別為81.8%（9/11）、66.7%（6/9）、100%（1/1）、80.0%（4/5）[3]。Cognart等[4]對轉移性癌48例和轉移性黑素瘤22例患者的116個連續血樣標本進行分析，其中乳腺癌患者血樣21例，上皮來源標本檢出率56.0%（47/84）;乳腺癌檢出率52.4%（11/21）。

另一項研究共納入503例腫瘤晚期患者，包括肺癌、肝癌、乳腺癌、胃癌、腸癌和胰腺癌等腫瘤，其中乳腺癌患者66例。外周血CTCs計數>1個/3.2ml 定義為CTCs 陽性。503例患者外周血中CTCs陽性率為59.84%（301/503），上皮來源標本檢出率61.6%（255/414）;乳腺癌檢出率66.7%（44/66）（P<0.05）[5]。ShiomiMouri的試驗入組98例晚期或轉移性乳腺癌患者，采集外周血7.5ml使用CellSearch 系統對CTCs計數，同時測量CEA和CA15-3， CTCs計數分為C 0 （外周血檢測不到CTCs，CTCs陰性）和C1 （外周血檢測到1個及1個以上CTCs，CTCs陽性）。根據CTCs與CEA和CA15-3水平的關系，評價CTCs的臨床意義。結果CTCs分界值為1， CTCs陰性53例（54.1%），CTCs陽性45例（45.9%）。CTCs陽性組患者的生存質量低于CTCs陰性組（p<0.0001）[6]。李蕾等[7]采用循環腫瘤細胞檢測系統對240 例不同臨床分期、不同病理類型的轉移性乳腺癌患10ml外周血中的CTCs進行檢測，結果：其檢出率為 57.5%（138/240），其中26例早期乳腺癌CTCs檢出率為23.1%（6/26）。

Saucedo Zeni等[8]進行的試驗，入組了12例經過病理證實為非小細胞肺癌患者和12例經過病理證實為乳腺癌患者，利用CellCollector技術平臺進行CTCs檢測，證明其準確性。總檢出率為91.6%（22/24）;乳腺癌檢出率為83.3%（10/12）。

李健斌等[9]進行了一項多中心臨床觀察，入組復發轉移性乳腺癌患者（n=127）及確診為良性腫瘤患者（n=63），利用循環腫瘤細胞采集儀技術平臺收集MBC及良性患者的CTCs。將20克大小的收集循環腫瘤細胞裝置置于患者肘正中靜脈，30 min后取出金屬絲并置于緩沖液中進行洗脫、固定。MBC患者中，其檢出率達到74.8%（95/127）;對良性組患者檢測，檢出率為0。

2 展望

既往的研究結果表明[10]，傳統的超聲、鉬靶X線、MRI或三者聯合，X線鉬靶與彩超對鈣化敏感性均高于MRI，彩超與MRI對腫塊內部結構的敏感性均高于X線鉬靶，差異有統計學意義 （P<0.05）。X線鉬靶、彩超、MRI的診斷符合率分別為89.1%、82.6%、78.3%。以上研究中，循環腫瘤細胞在乳腺癌中的檢出率高達83.3%，顯示出了很好的研究價值。與傳統檢查方法如骨髓活檢、組織病理學 檢查 、影像學檢查 、腫瘤細胞播散檢查相比較 ，CTC 檢 查有許多優點 ，該方法取材方便 ，損傷小 ，可多次重復檢測 ，能實時動態監測 ，且具有較高敏感性[11 ] 。

越來越多的研究證明了循環腫瘤細胞對乳腺癌輔助診斷、療效評估及預后預測中的價值，有望為乳腺癌的診療提供更多可靠的循證學依據，但挑戰也是非常嚴峻的，目前 CTCs檢測方法參差不齊，國際上暫無相關的指南共識，主要問題有1.捕獲率偏低，更高的臨床需求要求更準確的檢測方法，更高的捕獲效率、選擇性和回收率，才能保證后續分析具有充足的樣本;2.靈敏度低，采用更先進的技術降低假陽性率和假陰性率;3.CTCs陽性臨界值無法確定，需要更多的臨床研究根據不同病理類型或不同分期或不同治療方法確定CTCs陽性臨界值參考標準;4.檢測經濟成本高。但循環腫瘤細胞檢測技術的臨床應用價值仍較高，隨著技術的進步發展，解決技術難題，CTCs的價值將更多地被轉化到臨床。

參考文獻

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聲明：本文作者之間不存在利益沖突。

作者簡介：

劉德總（1989-），男，漢，河南鄭州，在讀碩士;醫師，研究方向：乳腺疾病的基礎與臨床研究。

李坤鵬（1991-），男，漢，河南鄭州，碩士，研究方向：乳腺疾病的基礎與臨床研究。

通訊作者：

楊穎濤（1976-） ，男，漢，河南鄭州，醫學博士，副主任醫師，碩士生研究生導師，副教授，研究方向：乳腺疾病的基礎與臨床研究。