Th9/Th22 比例與小兒哮喘病情嚴重程度的相關性

張偉 張旭力

哮喘是兒童最常見呼吸系統疾患，近年由于環境污染等因素，發病率呈上升趨勢，已嚴重影響小兒的身心健康與生長發育[1-2]。在臨床實踐中，通過明確的癥狀體征、同時排除其他器質性疾病所致喘息胸悶，多可確診哮喘，但具體哮喘病情嚴重程度的判斷仍存在一定難度。CD4+T細胞是體內調節免疫反應、炎癥反應的重要細胞群，其中Th9、Th22是近年來新發現的兩種CD4+T細胞亞群，已有研究報道Th9 / Th22失調與肺炎[3]及變態反應性疾病[4]的發生發展密切相關。但是，目前關于Th9、Th22細胞分布在哮喘患兒病情進展中扮演的角色尚不明確。為此，本文將以哮喘患兒為研究對象、具體分析外周血Th9 / Th22比例并探討其與哮喘病情的內在聯系，以期為日后小兒哮喘病情嚴重程度評估尋找簡便的血液學指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年8月—2018年8月本院首診收治的哮喘患兒98例作為哮喘組，納入標準：（1）符合中華醫學會兒科學會呼吸學組制定的《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》中哮喘的診斷標準[5]；（2）年齡5～12周歲；（3）智力與年齡段吻合、可配合相關檢查；（4）監護人簽署知情同意書。排除標準：（1）合并嚴重先天性疾患；（2）入組前3月內有下呼吸道感染史；（3）合并嚴重自身免疫性疾病。另取同期在本院進行體檢的健康小兒100例作為正常對照組。

哮喘組中男性50例、女性48例，年齡5～11周歲，平均（8.19±1.25）周歲，足月兒90例、早產兒8例，既往肺炎病史：有26例、無72例；正常對照組中男性51例、女性49例，年齡5～12周歲，平均（8.20±1.31）周歲，足月兒92例、早產兒8例，既往肺炎病史：有23例、無77例。兩組小兒的性別、年齡、足月 / 早產、既往肺炎病史等基線資料分布差異無統計學意義（P ＞0.05）。經本院倫理委員會審核、此次研究獲批。

1.2 研究方法

1.2.1 Th9/Th22細胞分布比例檢測 哮喘組小兒發作期（未經治療前）、正常對照組小兒體檢時，留取空腹外周靜脈血標本2.0～3.0 mL，采用流式細胞儀測定其中Th9、Th22細胞分布比例。

1.2.2 哮喘病情相關指標檢測 同樣留取兩組小兒的外周血標本，采用放射免疫法測定其中免疫球蛋白E（immunoglobulin E ，IgE）、半胱氨酰白三烯（ cysteinyl leukotriene ，CysLts）等過敏指標的水平；采用酶聯免疫吸附法測定炎癥介質單核細胞趨化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein -1，MCP-1）、轉化生長因子-β1（ transforming growth factor-β1，TGF-β1）、嗜酸性粒細胞（eosinophil，EOS）計數。采用肺功能儀測定兩組小兒的肺功能參數水平，包括第1秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in 1 second，FEV1）、呼氣峰流速（peak expiratory velocity，PEF）。

1.3 統計學方法 本次研究數據計算所用統計學軟件為SPSS 20.0。Th9 / Th22細胞比例、過敏指標、炎癥指標、肺功能參數水平屬于計量資料，以（均數±標準差）表示，兩組間比較選擇獨立樣本t檢驗。相關性分析采用Pearson檢驗。計算所得統計值P＜0.05則判定差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Th9/Th22比例

哮喘組患兒外周血中Th9細胞比例、Th22細胞比例均顯著高于正常對照組小兒，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 過敏指標

哮喘組患兒外周血中IgE、CysLts的水平均顯著高于正常對照組小兒，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 炎癥指標

哮喘組患兒外周血中MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均顯著高于正常對照組小兒，差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表3。

2.4 肺功能參數

哮喘組患兒的FEV1、PEF水平均顯著低于正常對照組小兒，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表4。

2.5 相關性分析

Pearson檢驗發現，哮喘患兒外周血中Th9細胞比例與過敏指標IgE、CysLts的水平，炎癥指標MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均呈正相關，r分別為0.294、0.335、0.273、0.412、0.384；與肺功能參數FEV1、PEF的水平呈負相關，r分別為-0.293、-0.341。哮喘患兒外周血中Th22細胞比例與過敏指標IgE、CysLts的水平，炎癥指標MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均呈正相關，r分別為0.313、0.235、0.391、0.441、0.367；與肺功能參數FEV1、PEF的水平呈負相關，r分別為-0.277、-0.351。以上P均＜0.05。

表1 兩組小兒外周血Th9 / Th22 比值的比較

表1 兩組小兒外周血Th9 / Th22 比值的比較

組別 例數 Th9（%） Th22（%）正常對照組 100 0.71±0.09 0.92±0.15哮喘組 98 1.33±0.16 1.58±0.23 t 值 - 33.692 23.963 P 值 - 0.000 0.000

表2 兩組小兒外周血過敏指標水平的比較

表2 兩組小兒外周血過敏指標水平的比較

組別 例數 IgE（mg/L） CysLts（ng/mL）正常對照組 100 0.67±0.08 21.29±3.40哮喘組 98 2.19±0.35 52.66±7.21 t 值 - 42.317 39.281 P 值 - 0.000 0.000

表3 兩組小兒外周血炎癥指標水平的比較

表3 兩組小兒外周血炎癥指標水平的比較

組別 例數 MCP-1（pg/mL） TGF-β1（ng/mL） EOS（×108 個/L）正常對照組 100 29.47±4.51 10.28±1.53 256.81±32.54哮喘組 98 54.23±7.95 34.16±5.22 473.29±58.01 t 值 - 27.023 43.867 32.469 P 值 - 0.000 0.000 0.000

表4 兩組小兒FEV1、PEF 水平的比較

表4 兩組小兒FEV1、PEF 水平的比較

組別 例數 FEV1（%） PEF（L/min）正常對照組 100 90.12±13.21 381.25±54.92哮喘組 98 78.51±11.32 293.41±59.23 t 值 - 9.191 8.282 P 值 - ＜0.05 ＜0.05

3 討論

Th9是主要分泌IL-9的CD4+T細胞亞群，其可促進呼吸道中IgE的分泌并增加氣道反應性[6-7]；Th22經配體依賴轉錄因子調節IL-22的表達，具有促進呼吸道上皮修復、縮小炎癥反應等作用[8-9]。Th1 / Th2等免疫細胞在哮喘中的作用研究已經開展十分廣泛，而Th9 / Th22的作用則尚不明了。文中哮喘患兒外周血中Th9細胞比例、Th22細胞比例均較同齡健康小兒有了大幅提升，說明高表達的Th9、Th22細胞參與哮喘病程，推測Th9高表達直接促進哮喘氣道炎癥、Th22反應性表達增加是機體的一種自我保護機制。關于Th9 / Th22分布比例與小兒哮喘病情的具體內在聯系，下文從過敏反應、炎癥反應、肺功能三方面展開闡述。

較多研究認為，哮喘屬于I型變態反應，高表達的IgE是哮喘急性發作的典型特征[10-11]，CysLts也是典型的過敏指標，在變態反應性疾病患者中呈高表達，可促進氣道平滑肌劇烈收縮以及一系列哮喘癥狀出現[12]。文中哮喘患兒外周血中IgE、CysLts的水平顯著高于健康同齡小兒，這與疾病的變態反應本質吻合。相關性分析指出，哮喘患兒外周血中Th9、Th22細胞分布比例與上述過敏指標水平呈正相關，說明Th9、Th22細胞分布比例可客觀反映哮喘患兒的過敏嚴重程度。

變態反應發生后小兒氣道內大量炎癥介質合成分泌，是氣道高反應性出現及維持的重要機制，具體氣道局部及全身炎癥反應程度與哮喘病情間存在良好的相關關系。MCP-1、TGF-β1是單核巨噬細胞及白細胞等分泌的炎癥因子；EOS是典型的炎癥細胞，相關的研究已經證實其在哮喘患兒中存在異常高表達。文中哮喘患兒外周血中MCP-1、TGF-β1、EOS的水平顯著高于健康小兒，與既往研究結論吻合。相關性分析指出，哮喘患兒外周血Th9、Th22細胞比例與上述炎癥指標的水平呈正相關，說明Th9、Th22細胞比例可客觀反映哮喘患兒的全身炎癥反應程度、間接反映哮喘病情嚴重程度。

哮喘反復發作可導致患兒通氣功能發生顯著異常，主要表現為FEV1、PEF水平下降，這也是臨床癥狀不典型患兒進行疾病診斷的最主要肺功能參數指標。文中哮喘患兒的FEV1、PEF水平低于健康小兒，相關性分析進一步發現哮喘患兒外周血中Th9、Th22細胞分布比例與上述肺功能參數水平呈負相關，說明Th9、Th22細胞分布比例可客觀反映哮喘患兒的肺功能損傷程度，也同樣間接反映哮喘整體病情嚴重程度。

綜上可知，哮喘患兒存在外周血Th9、Th22細胞分布比例的異常增高，且其增高幅度與患兒過敏程度、全身炎癥反應程度及肺功能損傷程度均直接相關，可能是反映哮喘病情的有效指標之一。