膿毒癥患者外周血 1-酸性糖蛋白、凝血酶敏感蛋白1的表達水平及意義

劉鳳鳴　覃慧嬋　覃先連　謝馥懋　黃貴　梁桂榮

[摘要] 目的 探討膿毒癥患者外周血α1-酸性糖蛋白（AAP）、凝血酶敏感蛋白1（TSP1）表達水平及其臨床意義。方法 選取2017年6月～2018年6月在南寧市第一人民醫院（以下簡稱“我院”）進行健康體檢者（30名）或者治療患者90例。根據研究對象的健康狀況分為正常組、非膿毒癥的SIRS組（30例）、輕度膿毒癥組（30例）、嚴重膿毒癥組（30例），分別獲取其清晨空腹血清。比較四組患者C反應蛋白（CRP）、降鈣素原（PCT）、AAP、TSP1表達水平差異。 結果 非膿毒癥的SIRS組、輕度膿毒癥組、嚴重膿毒癥組的CRP、PCT表達水平均顯著高于正常組，差異有統計學意義（P < 0.05）。輕度膿毒癥組、嚴重膿毒癥組的AAP、TSP1表達水平均顯著高于正常組，差異有統計學意義（P < 0.05）。輕度膿毒癥組、嚴重膿毒癥組的PCT、AAP、TSP1表達水平均高于非膿毒癥的SIRS組，差異有統計學意義（P < 0.05）;嚴重膿毒癥組的AAP表達水平高于輕度膿毒癥組，差異有統計學意義（P < 0.05）。 結論 PCT在診斷膿毒癥中具有優勢，AAP在膿毒癥嚴重程度分級中具有優勢，兩者聯合可以較好地判斷非膿毒癥的全身炎癥反應綜合征及膿毒癥患者的嚴重程度，為臨床早期治療提供參考依據。

[關鍵詞] 膿毒癥;α1-酸性糖蛋白;凝血酶敏感蛋白1;臨床意義

[中圖分類號] R459.7? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）06（a）-0084-04

Expression and significance of α1-acid glycoprotein and thrombospondin-1 in peripheral blood of patients with sepsis

LIU Fengming? ?QIN Huichan? ?QIN Xianlian? ?XIE Fumao? ?HUANG Gui? ?LIANG Guirong

Department of Intensive Care Unit， the First People′s Hospital of Nanning， Guangxi Zhuang Autonomous Region， Nanning? ?530022， China

[Abstract] Objective To investigate the expression levels of α1-acid glycoprotein （AAP） and thrombospondin 1 （TSP1） in peripheral blood of patients with sepsis and its clinical significance. Methods From June 2017 to June 2018， 30 patients who underwent physical examination or 90 patients who were treated in the First People′s Hospital of Nanning （"our hospital" for short） were selected. According to the health status of the subjects， they were divided into normal group， non-sepsis SIRS group （30 cases）， mild sepsis group （30 cases）， severe sepsis group （30 cases）， and their early morning fasting serum were obtained. The differences in expression levels of C-reactive protein （CRP）， procalcitonin （PCT）， AAP， and TSP1 were compared between the four groups. Results The expression levels of CRP and PCT in non-sepsis SIRS group， mild sepsis group and severe sepsis group were significantly higher than those in normal group （P < 0.05）. The expression levels of AAP and TSP1 in mild sepsis group and severe sepsis group were significantly higher than those in normal group （P < 0.05）. The expression levels of PCT， AAP and TSP1 in mild sepsis group and severe sepsis group were higher than those in non-sepsis SIRS group （P < 0.05）， and the expression level of AAP in severe sepsis group was higher than that in mild sepsis group （P < 0.05）. Conclusion PCT has advantages in the diagnosis of sepsis， AAP has advantages in the severity classification of sepsis. The combination of the two can better judge the severity of non-sepsis SIRS and sepsis patients， and provide reference for early clinical treatment.

[Key words] Sepsis; α1-acid glycoprotein; Thrombin-sensitive protein 1; Clinical significance

全身炎癥反應綜合征（SIRS），是指因感染或非感染病因作用于機體而引起的機體失控的自我持續放大和自我破壞的全身性炎癥反應[1-3]。SIRS按照發病原因可分為非膿毒癥的SIRS和膿毒癥兩種類型。膿毒癥主要是指由感染引起的SIRS，病情進展迅速，發病率高、病死率高及治療耗資巨大，然而早診斷、早治療可降低膿毒癥患者的病死率及改善預后[4-5]。但膿毒癥與非膿毒癥的SIRS的鑒別在臨床上仍存在相當大的困難，除了根據患者的癥狀、體征，目前臨床上用于毒癥與非膿毒癥的SIRS的鑒別的血清生物學標志物有C反應蛋白（CRP）、降鈣素原（PCT）及白細胞介素類（IL-6、IL-10）其敏感性及特異性均較差[6-7]。有研究[8-9]發現α1-酸性糖蛋白（AAP）、凝血酶敏感蛋白1（TSP1）與機體炎性反應有關。AAP及TSP1的表達水平能否用于膿毒癥診斷及嚴重程度分級，目前尚未發現相關研究報道。本研究旨在探討AAP及TSP1在膿毒癥患者中的表達水平及臨床意義，以期為膿毒癥診治提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年6月～2018年6月在南寧市第一人民醫院（以下簡稱“我院”）進行救治的膿毒癥患者作為研究對象。納入標準：（1）符合膿毒癥的診斷標準[10]（確定感染引起+SIRS癥狀≥2條）。其中SIRS癥狀如下：①體溫>38℃或<36℃;②心率>90次/min;③呼吸>20次/min或過度通氣，PaCO2<32 mmHg（1 mmHg=0.133 Kpa）;④血白細胞計數>12×109/L或<4×109/L（>12 000/μL或<4000/μL或未成熟粒細胞>10%）。（2）患者及家屬完全知情并同意本研究。排除標準：①合并有腫瘤患者;②合并有血液系統疾病者;③合并自身免疫性疾病者。符合納入標準和排除標準的患者共60例，根據膿毒癥患者是否合并有器官功能障礙，分為嚴重膿毒癥組（合并器官功能障礙）和輕度膿毒癥組（未合并器官功能障礙）。其中嚴重膿毒癥組30例，男15例，女15例;年齡34～72歲，平均（50.63±11.06）歲。輕度膿毒癥組30例，其中男15例，女15例;年齡35～70歲，平均（49.86±10.29）歲。選擇同期在我院進行救治的非膿毒癥SIRS患者30例作為非膿毒癥的SIRS組，其中男15例，女15例;年齡28～75歲，平均（49.33±11.47）歲。納入標準：①符合SIRS癥狀（同上4條）;②非感染因素引起;③患者及家屬完全知情并同意該研究。排除標準：①合并有腫瘤患者;②合并有血液系統疾病者;③合并自身免疫性疾病者。選擇同期在我院進行健康體檢者30例患者作為正常組，其中男15例，女15例;年齡30～70歲，平均（51.29±10.38）歲。所有入組對象或家屬均簽署知情同意書，本研究經我院醫學倫理委員會批準同意。四組年齡、性別比較，差異均無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集所有入組對象的清晨空腹肘靜脈血10 mL，靜置10 min，置于4℃保存，離心處理，離心半徑9.4 cm，轉速3000 r/min，離心時間為10 min，收集上清液，冰上分裝后-80℃冰箱保存，備用。CRP含量采用免疫比濁法進行檢測（儀器：瑞士羅氏公司cobasc 602）。PCT含量采用雙抗體夾心免疫發光法檢測（瑞士羅氏公司，cobasc 702）。AAP、TSP1含量采用速率散射比濁法檢測（儀器：全自動微量蛋白分析儀，型號：IMMAGE800，生產廠家：BECKMAN公司）。其中AAP采用IBL公司的相關試劑盒，TSP1采用江萊生物的相關試劑盒。全程由經驗豐富的檢驗科醫生負責操作，并嚴格按照相關操作說明進行操作。

1.3 觀察指標

詳細記錄四組患者的CRP、PCT、AAP、TSP1表達水平。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，計量資料數據用均數±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t或SNK-q檢驗，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 四組AAP、TSP1表達水平比較

四組CRP、PCT、AAP、TSP1表達水平比較，差異有統計學意義（P < 0.05）。非膿毒癥的SIRS組、輕度膿毒癥組、嚴重膿毒癥組的CRP、PCT表達水平均顯著高于正常組，差異有統計學意義（P < 0.05）。輕度膿毒癥組、嚴重膿毒癥組的AAP、TSP1表達水平均顯著高于正常組，差異有統計學意義（P < 0.05）。輕度膿毒癥組、嚴重膿毒癥組的PCT、AAP、TSP1表達水平均高于非膿毒癥的SIRS組，差異有統計學意義（P < 0.05）;嚴重膿毒癥組的AAP表達水平高于輕度膿毒癥組，差異有統計學意義（P < 0.05）。其余兩兩比較，差異無統計學意義（P > 0.05）。見表1。

3 討論

膿毒癥是臨床上危重癥患者常見并發癥。美國疾病控制中心（CDC）的數據[11]顯示：美國新發嚴重膿毒癥患者超過75萬/年，占到總死亡人數的9%，居第3位，可見膿毒癥已成為嚴重危害人類健康的疾病之一。為喚起公眾對膿毒癥患者重視，2012年9月13日被定為第一個世界膿毒癥日[12]。膿毒癥病情若控制不佳，可迅速進展為膿毒癥休克和多器官功能障礙綜合征，影響患者的預后。尋找一種可早期快速診斷膿毒癥并對嚴重程度進行分級的生物標志物顯得尤為重要。目前，用于膿毒癥早期診斷及嚴重程度評估的生物標志物如PCT、CRP、內毒素、血小板計數（PLT）、IL-2、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子（TNF-α）等，在診斷的靈敏度及特異度上仍達不到臨床的要求。

[9]? 劉華偉.急性細菌感染性疾病患者血清α1酸性糖蛋白水平測定的臨床探討[J].標記免疫分析與臨床，2014，21（6）：683-684.

[10]? 紀根寶，黃嶸，吳勇，等.基于Sepsis 3.0診斷標準之膿毒癥患者死亡危險因素分析[J].廣西醫學，2018，40（19）：2355-2357.

[11]? Angus DC，Linde-Zwirble WT，Lidicker J，et al. Epidemiology of severe sepsis in the United States：analysis of incidence，outcome，and associated costs of care [J]. Crit Care Med，2001，29（7）：1303-1310.

[12]? New hope for sepsis [J]. Lancet 2012，379（9825）：1462.

[13]? 李波，要志宏，胡艦，等.iTRAQ在蛋白質組學中的應用進展[J].食品安全導刊，2017（18）：119.

[14]? 劉洋，程慶礫，楊光.糖尿病腎病的蛋白質組學研究進展[J].中華腎病研究電子雜志，2018，7（4）：182-185.

[15]? 辛向博.Myostatin基因對骨骼肌代謝機制影響的定量蛋白組學與磷酸化蛋白組學研究[D].天津：天津農學院，2018.

[16]? 姚振宇，武一，吉尚戎.CRP變構及其促炎機制研究進展[J].中國科學：生命科學，2017，47（8）：863-870.

[17]? Meisner M. Update on procalcitonin measurements [J]. Ann Lab Med，2014，34（4）：263-273.

[18]? 中國醫藥教育協會感染疾病專業委員會.感染相關生物標志物臨床意義解讀專家共識[J].中華結核和呼吸雜志，2017，40（4）：243-257.

[19]? Karon BS，Tolan NV，Wockenfus AM，et al. Evaluation of lactate，white blood cell count，neutrophil count，procalcitonin and immature granulocyte count as biomarkers for sepsis in emergency department patients [J]. Clin Biochem，2017，50（16/17）：956-958.

[20]? Lin C，Lu J，Chen Y，et al. Diagnostic value of serum procalcitonin，lactate，and high-sensitivity C-reactive protein for predicting bacteremia in adult patients in the emergency department [J]. Peer J，2017，5：e4094.

[21]? 賀政新，張麗娜，安黎云，等.α1-酸性糖蛋白、觸珠蛋白、銅藍蛋白評價炎性狀態及與C反應蛋白相關性分析[J].中國實驗診斷學，2015，19（3）：468-470.

[22]? Xiao K，Su L，Yan P，et al. α-1-Acid glycoprotein as a biomarker for the early diagnosis and monitoring the prognosis of sepsis [J]. J Crit Care，2015，30（4）：744-751.

[23]? 張東華，朱雪娟，鄒霞，等.α1-酸性糖蛋白糖鏈檢測對慢乙肝相關肝硬化的早期診斷及其臨床應用[J].現代免疫學，2015，35（4）：306-310.

[24]? 肖林，郭梅，胡加萍.尿和血清α1-酸性糖蛋白在早期糖尿病腎病診斷中的應用價值[J].海南醫學，2016，27（24）：3988-3990.

（收稿日期：2018-11-20? 本文編輯：王? ?蕾）