白地霉液體發(fā)酵條件優(yōu)化研究

劉詩(shī)音

摘要：利用單因素試驗(yàn)篩選培養(yǎng)基碳氮源及氮源分別為玉米粉及豆柏粉，正交試驗(yàn)確定最佳培養(yǎng)時(shí)間為2天時(shí)，最佳液體發(fā)酵條件轉(zhuǎn)速200 r/min，溫度30℃，裝液量為50ml∕250ml，起始pH5.0。

關(guān)鍵詞：白地霉;液體發(fā)酵;生物量;正交實(shí)驗(yàn)

1 緒論

白地霉是一種常見(jiàn)的真菌[1]，菌體細(xì)胞含有蛋白質(zhì)，具有十分重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值[2-5]。目前對(duì)白地霉液體發(fā)酵系統(tǒng)研究報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)計(jì)劃通過(guò)搖瓶液體培養(yǎng)法，確定白地霉藥瓶液體發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基和最佳培養(yǎng)條件，進(jìn)一步確定最佳的放大培養(yǎng)工藝，為提高營(yíng)養(yǎng)成分和有效成分提供理論數(shù)據(jù)[4-5]。

2供試菌種與方法

2.1供試菌種

白地霉保藏菌種：由長(zhǎng)春醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校提供。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1碳源篩選

碳源選擇葡萄糖、玉米粉、可溶性淀粉、纖維飼料、麩皮，氮源為蛋白胨，其余成份不變。按10%接種量接入100ml培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)速150r/min， 29℃培養(yǎng)3d，測(cè)其生物量。

2.2.2氮源篩選

氮源選擇蛋白胨、豆柏粉、魚(yú)粉、棉子餅粉、尿素，碳源為葡萄糖，其余成份不變。10%接種量接入100ml培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)速150r/min， 29℃培養(yǎng)3d，測(cè)其生物量。

2.2.3發(fā)酵周期試驗(yàn)

碳源及氮源分別為為葡萄糖及蛋白胨，配制搖瓶液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為29℃，150r/min，接種量10%，裝液量100ml，培養(yǎng)1d、2d、3d、4d、5d，并測(cè)定其生物量。

2.2.4液體發(fā)酵條件的優(yōu)化[7]

利用玉米粉和豆柏粉為碳氮源，配制搖瓶液體培養(yǎng)基，設(shè)計(jì)四因素（溫度、轉(zhuǎn)速、裝液量、起始pH），分別培養(yǎng)2天。正交試驗(yàn)確定最佳組合。

2.2.5生物量測(cè)定[8]

將發(fā)酵液用40目篩過(guò)濾、抽濾，用蒸餾水反復(fù)沖洗，60℃烘干至恒重，精確稱(chēng)重，計(jì)算生物量。

生物量（g/L）=菌絲體干重（g）/發(fā)酵液體積（ml）×1000

3 結(jié)果與分析

3.1碳源篩選結(jié)果

3.2 氮源的篩選結(jié)果

3.3發(fā)酵周期試驗(yàn)結(jié)果

3.4液體發(fā)酵條件的正交試驗(yàn)結(jié)果

4結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)單因素試驗(yàn)確定白地霉液體發(fā)酵的適宜碳源及氮源為玉米粉及豆柏粉，最佳培養(yǎng)時(shí)間為2天。通過(guò)正交試驗(yàn)確定白地霉最佳液體深層發(fā)酵條件為：轉(zhuǎn)速200 r/min，溫度30℃，起始pH5.0，裝液量50ml∕250ml。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉亞男，馮娜，薛憬花，吳平，魏孝義.白地霉的化學(xué)成分研究.熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2008，28（5）27-32.

[2]鄭莉莉，劉天明，王慧，需美鑫，孫丙升.白地霉的應(yīng)用研究進(jìn)展.食品研究開(kāi)發(fā)，2008，18（6）16-18.

[3]白地霉的培養(yǎng)及其核酸降解液的制備.農(nóng)業(yè)科技通訊，1970.6，41（8）12-15.

[4]楊慶堯.食用菌生物學(xué)[M].上海科學(xué)技術(shù)出版社，1981，36（4）：56-58.

[5]汪維云，朱金華.食用菌液體發(fā)酵技術(shù)研究進(jìn)展及展望[J].中國(guó)食用菌，1997，17（2）：11-15.

[6]王莘.發(fā)酵工藝原理試驗(yàn)技術(shù)[M].吉林科學(xué)技術(shù)出版社，2005，28（8）：46-47.

[7]周劍麗，胡建鋒，陳秀勇，牛曉娟，邱樹(shù)毅.響應(yīng)面法優(yōu)化白地霉發(fā)酵麻瘋樹(shù)餅粕產(chǎn)蛋白質(zhì)飼料工藝條件.中國(guó)飼料，2009，52：169-175.

[8]周鍵，孫培龍，趙培城.食用菌深層發(fā)酵的研究進(jìn)展[J ].微生物學(xué)通報(bào)，2003，30 （6）：111-114.