血液中循環腫瘤抗體ABCC3在乳腺癌早期診斷中的意義

郝芳時，崔春國，計國義

(吉林大學中日聯誼醫院，吉林 長春130033)

有證據顯示多重耐藥(MDR)的發生可能和三磷酸腺苷結合轉運蛋白(ABC)的過表達相關，目前已知有49個基因參與編碼了ABC[1]。這些ABC轉運蛋白可以分為7個亞組，其中ABCC1-3和ABCG2等蛋白的表達被證實可能和多種惡性腫瘤的治療失敗呈相關性[2]。值得注意的是，這些ABC轉運蛋白的過表達會通過腫瘤相關抗原的呈遞在患者血液中表現出相關抗體表達的依賴性。有研究已經證實食管癌和肺癌患者中血液中ABCC3循環抗體的表達升高[3]。為了進一步證實ABCC3循環抗體是否在乳腺癌等其他腫瘤患者血液中有表達差異，現將結果報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2016年4月至2017年12月我院乳腺外科確診121例乳腺癌患者，平均年齡54.1±9.2歲。其中導管癌101例，小葉癌20例。101例導管癌按照國際婦產科聯盟(Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO)臨床分期標準分為I-IV期四個亞組。所有患者留取血液標本，留取時間均在治療開始之前。82例對照組健康女性患者來自于本地區社區醫院，平均年齡52.3±8.2歲，病史中否認腫瘤病史。全部患者均為中國籍漢族，并在入組前簽署了知情同意書。本研究已經獲得單位倫理委員會的批準。

1.2 循環抗體的檢測

酶聯免疫吸附試驗(ELASA)利用自制的兩條線性肽鏈抗原完成[4]。實驗前，96孔板中48孔利用0.1毫升/孔的ABCC3抗原包被，另外一半用0.1毫升/孔濃度的對照抗原包被。包被后的96孔板放入4攝氏度下靜置12 h。清洗3次后，滴入已1∶150稀釋的對象血清。室溫下靜置2 h，清洗3次。加入1∶30 000稀釋的羊抗人抗體室溫下中和1 h。加入顯色劑并孵育25 min，加入50 μl終止溶劑。進行光密度(OS)測定，特異性結合指數(SBI)由如下公式計算得出：

SBI=(OD試驗組-OD陰性對照)/(OD對照組-OD陰性對照)。

1.3 統計分析

全部數據以平均值±標準差顯示。利用方差分析(ANOVA)檢測不同組間ABCC3表達的差異性。

2 結果

2.1 乳腺癌患者血液中 ABCC3循環抗體的表達水平

ANOVA分析結果顯示，與健康對照組相比較，ABCC3循環抗體的表達在乳腺癌患者組中顯著降低(P=0.0003)。其中，ABCC3表達在乳腺導管癌患者人群中表達變化(P=0.0006)趨勢超過乳腺小葉癌(P=0.086),見表1。

表1 循環ABCC3抗體在乳腺導管癌和小葉癌血液中的水平比較

*與對照組相比較，P<0.01

2.2 ABCC3循環抗體的表達水平和乳腺癌的臨床分期的相關性

在不同臨床分期亞組的比較過程中，發現ABCC3的高表達和各個不同臨床分期有一定相關性。尤其是腫瘤Ⅱ期(P=0.0012)和Ⅲ期(P=0.0008)患者中，與對照組相比差異性明顯,見表2。

3 討論

乳腺癌是女性患者中最常見的惡性腫瘤，2011年我國共有248620例新發乳腺癌病例，早期有效、敏感的生物學標志物的發現對于乳腺癌的早發現、早治療具有重要的現實意義[5]。循環腫瘤抗體檢測在惡性腫瘤篩查中具有一定的臨床意義，在肝癌、肺癌等領域取得了良好的應用效果，可以作為預測腫瘤發生、提前預警復發，具有廣闊的研究前景。

表2 循環ABCC3抗體在不同分期乳腺癌(導管癌)患者血液中的水平

*與對照組相比較，P<0.01

ABCC3是MDR相關蛋白家族中的一員，被發現在多個惡性癌中有高表達。研究發現在乳腺癌中超過28.1% HER2陽性和7.3%HERZ2陰性的腫瘤標本中有ABCC3的高表達，說明ABCC3可能是預警乳腺癌的良好生物學標志物。本研究中，乳腺癌患者循環血液中ABCC3抗體表達明顯降低，并和其臨床分期呈一定相關性，說明ABCC3循環抗體檢測可能是一個乳腺癌預測、診斷的良好生物學標志物。

理論上，ABCC3在癌組織中的高表達會導致患者血液中循環腫瘤抗體的高表達。本研究發現乳腺癌患者ABCC3循環抗體表達顯著降低。其中可能的機制是腫瘤特異性的免疫耐受。鑒于本研究中樣本數量有限，還需要后續更大樣本的研究來進一步闡述ABCC3與乳腺癌的相關性及其機制。