聚苯乙烯微塑料和羅紅霉素對斜生柵藻（Scenedesmus obliquus）和大型溞（Daphnia magna）的聯合效應研究

姜航，丁劍楠, ，黃葉菁，陳微懿，鄒華, *，史紅星

1. 江南大學環境與土木工程學院，江蘇 無錫 214122；2. 江蘇省水處理技術與材料協同創新中心，江蘇 蘇州 215009；3. 國民核生化災害防護國家重點實驗室，北京 102205

塑料以其良好的經濟適用性成為生產生活中必不可少的材料。據統計，全球塑料年產量已從1950年的 170萬噸增長到 2016年的 3.4億噸（Murphy et al.，2017；Proki? et al.，2019）。與此同時，大量的塑料被丟棄，不可避免地會進入土壤和水生態系統。這些廢塑料經過機械磨損、熱解、水解和生物降解，逐漸降解成直徑小于5 mm的碎片，即所謂的微塑料（Microplastics，MPs）（Law et al.，2014）。海洋環境中的MPs污染已在世界范圍內普遍證實（Eriksen et al.，2014；Andrady et al.，2011）。近期，在淡水環境中，也報道了MPs的廣泛檢出（Su et al.，2016；Wang et al.，2017；Eerkes-Medrano et al.，2015）。水體中的MPs容易被水生生物誤食或者吸附于生物體表面（Kolandhasamy et al.，2018），通過食物鏈傳遞（Mattsson et al.，2014），進而影響水生生物的生理代謝、生長發育和繁殖等過程（Wright et al.，2013；Mao et al.，2018；Blarer et al.，2016）。

MPs具有比表面積大，疏水性強的特點，極有可能吸附水環境中的其他污染物，形成復合污染（Brennecke et al.，2016；Ziccardi et al.，2016）；這也導致風險源對水生生物的污染脅迫途徑愈發復雜（Savoca et al.，2017），可能會造成不可預知的生態風險。目前，有關MPs與水環境中其他污染物復合污染的研究剛剛起步，且多集中于和多環芳烴、多氯聯苯等傳統污染物的聯合效應研究（Batel et al.，2016；Sleight et al.，2017；Karami et al.，2016；Oliveira et al.，2013），有關MPs與其他新興有機污染物之間的相互作用研究仍然有限。

抗生素是近年來受到較高關注的一類新興有機污染物。由于存在濫用現象，抗生素在我國水環境中的賦存較為廣泛（Liu et al.，2013）。羅紅霉素（Roxithromycin，ROX）是一種大環內酯類抗生素，普遍應用于呼吸道，泌尿和軟組織感染等病癥的治療。目前，ROX已在世界范圍內的水環境中廣泛檢出。在意大利北部波河流域某污水廠進出水中發現ROX 的濃度為 65－290 ng·L-1（Verlicchi et al.，2014）；冬季我國湘江水體中ROX的濃度范圍為1.4－190 ng·L-1（Lin et al.，2018）；Kleywegt et al.（2011）甚至在加拿大飲用水中發現了ROX的賦存（5 ng·L-1）。研究表明，ROX能在水生生物體內累積，并對其神經、代謝和氧化應激等生理生化功能產生影響（Liu et al.，2014；Besseling et al.，2015；Alomar et al.，2017）。然而，水環境中共存的MPs如何影響 ROX在淡水生物的吸收、分布、累積和代謝等毒理動力學過程，是否會引發毒性增敏效應，目前還未可知。

浮游生物是水生生態系統的重要組成部分，對水生生態系統的物質循環、能量生產和傳遞均有重要作用。然而，目前有關MPs水生毒理學的研究多集中于魚類（de Sá et al.，2018），有關MPs和抗生素復合污染對浮游生物的聯合毒性效應研究還較為缺乏。本文以我國淡水水域中常見的浮游植物斜生柵藻（Scenedesmus obliquus）和浮游動物大型溞（Daphnia magna）作為模式生物，探究MPs和ROX復合污染對浮游生物的生理生化過程的交互效應。研究結果可為水環境中新興污染物的生態風險評價和控制提供理論支持，同時可為水體中新興污染物環境標準的制定提供依據。

1 材料與方法

1.1 化學品和試劑

綠色熒光聚苯乙烯（Polystyrene，PS）微球（粒徑為0.1 μm，密度為10 mg·mL-1）購自大鵝（天津）科技有限公司。PS-MPs原液在4 ℃下避光儲存，并在每次使用前進行超聲處理。ROX標準品（純度＞98%）購自上海升德醫藥科技有限公司，在4 ℃下避光保存，使用甲醇制備母液，并在-20 ℃下保存。

1.2 受試生物

斜生柵藻和大型溞購自中科院水生生物研究所（武漢）。斜生柵藻在BG11培養基中培養，并置于光照培養箱（GZX-250BSH-Ⅲ，上海新苗醫療器械制造有限公司）內進行擴大繁殖和馴化培養。溫度控制在(25±1) ℃，光照強度為8000 lux，光暗比為12 h∶12 h。每天定期振蕩3次，每隔1－2周移種，以純化藻種并使其同步生長。

大型溞用超純水配制的重組水進行培養，每1000 mL重組水中含有58.5 mg CaCl2·2H2O，24.7 mg MgSO4·7H2O，13.0 mg NaHCO3和 1.2 mg KCl。大型溞置于光照培養箱中培養，溫度控制在(25±1) ℃，光照強度為 2000 lux，光暗比為 12 h∶12 h。在培養期間，培養液每周更換 3次，并每天以斜生柵藻對大型溞進行喂食，喂食的藻細胞密度為105cells·mL-1。

1.3 實驗設置

1.3.1 斜生柵藻暴露實驗

經實驗室培養馴化后，將斜生柵藻分別置于250 mL錐形瓶，將熒光PS-MPs和/或ROX原液添加到藻液。暴露處理包括空白對照、PS-MPs單獨暴露（1000 μg·L-1PS-MPs）、ROX 單獨暴露（2.5 μg·L-1ROX）、PS-MPs與 ROX 共同暴露（1000 μg·L-1PS-MPs+2.5 μg·L-1ROX）。每種暴露處理包括 3個平行試驗，初始藻細胞密度為 1×106cells·mL-1，體積為200 mL。暴露周期為72 h，在暴露的第0、6、12、24、36、48和72小時，測定各暴露組藻細胞密度、葉綠素a含量和最大光化學量子產量（Fv/Fm）等生理指標。在各時間點用玻璃吸管取暴露液樣品后，對樣品進行 10 min的離心（1000×g），離心結束后，將上清液轉移至 15 mL離心管，保存于-80 ℃冰箱中用于測量暴露液中ROX濃度。

1.3.2 大型溞暴露實驗

經實驗室培養馴化后，將空腹24 h的成年大型溞分別置于100 mL燒杯中，每杯加入50 mL培養液，將熒光PS-MPs和/或ROX原液添加到大型溞培養液中，制備試驗溶液。暴露處理包括空白對照、PS-MPs單獨暴露（250 μg·L-1PS-MPs）、ROX 單獨暴露（5 μg·L-1ROX）、PS-MPs與 ROX 共同暴露（250 μg·L-1PS-MPs+5 μg·L-1ROX）。每種暴露處理包括3個平行試驗。喂養實驗選取10只大型溞，投加藻細胞密度為1×106cells·mL-1的斜生柵藻，避光暴露 5 h，測定暴露前后暴露液中斜生柵藻藻細胞密度，以計算大型溞的牧食率以及濾水率。生物標志物實驗選取30－35只大型溞，絕食暴露48 h后，稱重后放入-80 ℃冰箱保存待測。

1.4 生理生化指標檢測

使用血球計數板在光學顯微鏡下檢測藻細胞密度；采用丙酮萃取分光光度法測定藻胞內葉綠素 a濃度（戴欣等，2013），再根據公式：

葉綠素含量(mg·g-1)=葉綠素濃度×提取液體積×稀釋倍數/樣品鮮重 （1）

計算葉綠素含量（關愛農等，2009）；使用FluorCam封閉式葉綠素熒光成像系統（FluorCam 800F）測定Fv/Fm。

參考Ding et al.（2015）的方法對樣品中ROX濃度進行測定。將各時間點取的暴露液樣品，經0.45 μm玻璃纖維過濾器過濾以去除雜質，過HLB固相萃取柱純化，以6 mL甲醇洗脫，氮吹至干，最后用甲醇定容至1 mL。采用超高效液相色譜串聯質譜儀（UPLC/MS/MS）（Waters ACQUITY UPLC Xevo TQ）對ROX進行定量分析。在Acquity BEH C18柱（100 mm×2.1 mm×1.7 μm）上進行層析分離。流動相溶液設定：A為0.1%甲酸溶液，B為100%乙腈。具體流動相梯度如表 1所示。流速設置為0.3 mL·min-1。每次樣品進樣體積為5 μL。質譜檢測的電噴霧電離源（ESI）設定為正模式。ROX的質譜優化參數：停留時間 328 ms；母離子質荷比為837.50；子離子質荷比為158.00；碰撞能量30.0 V；碰撞電壓37.0 V；保留時間1.58 min。外標法定量，ROX標準曲線的R2＞0.99。

表1 流動相梯度變化Table 1 Change in mobile phase for target compound

按照商業試劑盒（中國蘇州科銘生物科技有限公司）說明書要求測定超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）和過氧化氫酶（Catalase，CAT）等細胞水平生物標志物。

1.5 數據分析

牧食率和濾水率是大型溞喂養實驗的常規指標，常用來驗證外源污染物的富集是否會影響其對食物的攝入。牧食率（I）指某特定時間內每只大型溞所消耗的綠藻的藻細胞個數，單位為cell·(ind·h)-1；濾水率（F）指一定量水樣中大型溞個體在單位時間內濾過的含有一定數量綠藻的水樣量，單位可表示為μL·(ind·h)-1。濾水率和牧食率的計算公式為：

式中C0和Ct分別表示為起始和終點斜生柵藻的藻細胞密度（cell·μL-1）；t為試驗時間；n 表示容器中大型溞的個數；V為試驗水樣體積；Ct′為對照組終點藻細胞密度；A是指修正系數。

研究結果采用SPSS 22.0進行統計分析，單因素方差分析進行差異性檢驗（One-way ANOVA，Duncan檢驗），分析結果用平均值±標準誤（Mean±SE）表示。

2 結果與討論

2.1 暴露液中ROX的濃度變化

圖1 72 h暴露期間ROX單獨暴露組和PS-MPs與ROX共同暴露組暴露液中ROX濃度隨時間變化Fig. 1 Temporal change in ROX concentration in media in ROX-alone treatment and PS-MPs+ROX co-treatment during 72 h exposure

如圖1所示，在ROX單獨暴露組中，暴露開始時（0 h），暴露液中ROX的平均濃度為(2.4±1.0)μg·L-1。暴露開始24 h后，暴露液中ROX的濃度顯著降低（P＜0.05），此時 ROX 的平均濃度為(1.5±0.3) μg·L-1；隨后，暴露液中的 ROX 濃度趨于平衡。而在MPs與ROX共同暴露組中，暴露開始時（0 h），ROX 的平均濃度為(2.7±0.4) μg·L-1。暴露開始 24 h后，暴露液中 ROX的濃度顯著降低（P＜0.05），其平均濃度為(1.2±0.3) μg·L-1。暴露 72 h結束時，單獨暴露組和共同暴露組中 ROX濃度比初始暴露濃度分別下降了76.1%和83.8%。暴露液中 ROX濃度的下降可能是由斜生柵藻細胞、PS-MPs以及容器器壁的吸附導致（Smets et al.，1990）。Ding et al.（2015）發現在 20 μg·L-1ROX 暴露下，斜生柵藻會在暴露開始后數小時內迅速吸附富集暴露液中的ROX，且在24－36 h左右達到富集平衡狀態，最終暴露液中 ROX濃度僅為初始暴露濃度的44.7%。在本實驗中，暴露6 h后，共同暴露組中ROX的濃度要低于ROX單獨暴露組（圖1），這表明PS-MPs吸附了暴露液中的ROX。MPs具有疏水性，并且能夠通過靜電作用在水中吸附多種抗生素（Li et al.，2018），有學者甚至發現MPs能夠對磺胺類抗生素磺胺甲惡唑產生不可逆的吸附作用（Razanajatovo et al.，2018）。實際水環境中，污染物組成更加復雜，MPs很可能吸附許多不同種類的污染物，并不同程度上改變復合污染體系中污染物的環境行為及毒理效應，帶來不可預知的環境風險。因此，有必要深入研究MPs與抗生素等有機污染物的聯合生態效應。

2.2 PS-MPs與ROX對斜生柵藻的種群增長影響

如表2和圖2所示，在暴露48 h后，各單獨暴露組中斜生柵藻藻細胞密度、葉綠素 a含量以及Fv/Fm均已顯著低于空白對照組（P＜0.05）；暴露72 h后，PS-MPs單獨暴露組中斜生柵藻的各項生理指標相較于空白實驗組分別下降了9.4%、9.2%、8.6%，這表明PS-MPs對斜生柵藻的生長具有抑制作用，同時對其光合作用效率產生了一定的負面影響。Besseling et al.（2014）將斜生柵藻連續72 h暴露于PS-MPs，同樣觀察到PS-MPs抑制了藻類種群生長并降低了藻類的葉綠素a含量，該學者認為納米級PS-MPs會吸附在綠藻細胞膜表面，減少藻類對CO2的吸收，從而導致細胞內活性氧物質（ROS）的產生，造成了氧化損傷，最終抑制了藻類的生長。Mao et al.（2018）研究了 PS-MPs暴露下，小球藻（Chlorella pyrenoidosa）在整個生長期內的生理指標變化，結果顯示 PS-MPs暴露濃度為 10、50和100 mg·L-1時，藻類生長最大抑制率分別為21.0%、29.0%和38.5%，其中100 mg·L-1PS-MPs暴露下，小球藻的Fv/Fm最大抑制率高達93.5%；該研究者指出附著在藻類上的PS-MPs顆粒可以增強光衰減并降低營養和氣體交換的有效性，從而引起對藻類的生長、呼吸和光合作用的不利影響。在本實驗中，ROX單獨暴露72 h后，斜生柵藻的藻細胞密度、葉綠素a含量以及Fv/Fm分別下降了10.2%、7.6%和7.3%。Yang et al.（2008）通過72 h的暴露實驗分析了 12種抗生素對月牙藻（Pseudokirchneriella subcapitata）生長的影響，發現超過半數的抗生素對月牙藻的生長產生抑制作用，該研究者認為抗生素會結合亞基50S核糖體，抑制肽的轉運和干擾蛋白質的合成，從而抑制綠藻的生長。

表2 暴露72 h后不同暴露組中斜生柵藻各項生理指標抑制率Table 2 Inhibition rates of different exposure groups on physiological indexes of S. obliquus after exposure for 72 h

圖2 不同暴露處理72 h期間斜生柵藻（A）藻細胞密度，（B）葉綠素a含量及Fv/Fm（C）的變化Fig. 2 ( A) Algal cell concentration, (B) Chlorophyll-a concentration and(C) Fv/Fm variation of S. obliquus with different exposure treatments during 72 h exposure

MPs和 ROX聯合暴露對斜生柵藻藻細胞密度、葉綠素a含量以及Fv/Fm的影響見圖2和表2，隨著暴露時長的增加，在暴露48 h之后，PS-MPs與 ROX共同暴露組中斜生柵藻的各項生理指標均顯著低于空白對照組（P＜0.05），PS-MPs與ROX共同暴露組中斜生柵藻的藻細胞密度相較于空白實驗組下降了13.3%，葉綠素a含量下降了9.5%，Fv/Fm下降了 9.3%，但是與各單獨暴露組無顯著性差異（P＞0.05），這意味著PS-MPs與ROX共同暴露對斜生柵藻生長的抑制效果并沒有比二者的單獨暴露更為明顯。Zhu et al.（2019）研究了 4種不同類型的MPs和三氯生（TCS）對中肋骨條藻（Skeletonema costatum）的聯合毒性，發現由于 TCS的吸附，使得 MPs的疏水性增加，導致MPs在水中沉淀，減少了MPs與微藻細胞之間的接觸機會，從而降低了MPs和TCS的毒性。在本實驗，共同暴露組中的PS-MPs對ROX的吸附可能導致二者接觸斜生柵藻藻胞的機率降低，導致聯合毒性效應并沒有比單一毒性更加顯著。Zhang et al.（2018）研究了氨基修飾的聚苯乙烯納米粒子（nPS-NH2）和草甘膦對銅綠微囊藻（Microcystis aeruginosa）聯合毒性的影響，發現nPS-NH2與草甘膦共暴露對藻類生長的抑制具有拮抗作用；該學者認為，草甘膦對銅綠微囊藻有很強的抑制作用，但由于 nPS-NH2對草甘膦具有很強的吸附能力，顯著減輕了草甘膦對銅綠微囊藻的生長抑制作用。雖然本研究中PS-MPs和ROX的聯合暴露對斜生柵藻的急性毒性影響并沒有比單一暴露更為顯著，但是自然水環境中，MPs與抗生素很可能是長期共存的，而它們對浮游植物產生的長期聯合效應還未可知，因此有關MPs與抗生素的慢性毒性實驗亟待展開。

2.3 PS-MPs與ROX對大型溞的毒理效應

如圖 3所示，在本實驗各暴露組中，大型溞的牧食率和濾水率均有明顯的降低，其中，PS-MPs單獨暴露組中大型溞的牧食率和濾水率相較于空白實驗組分別下降了38.1%和39.4%，表明大型溞的覓食行為受到了PS-MPs的顯著抑制。Cole et al.（2013）將15種浮游動物暴露于PS-MPs后，發現包括大型溞在內的 13種浮游動物均具有攝食暴露液中PS-MPs的能力，并且攝入的PS-MPs能夠累積在浮游動物體內，導致攝食器官和消化道堵塞，造成能量缺乏，從而抑制其牧食率。在 ROX單獨暴露組中，大型溞的牧食率和濾水率相較于空白實驗組分別下降了58.9%和58.7%，表明ROX同樣抑制了大型溞的覓食行為。Pan et al.（2017）在喹諾酮類抗生素諾氟沙星對大型溞的急性毒性實驗中同樣發現了覓食行為受到抑制的現象；該研究者認為隨著抗生素濃度的增加，機體為了減少能量損失，適應環境脅迫，選擇減少運動，進而導致了牧食率的降低。同樣的，Yan et al.（2019）也發現磺胺類抗生素磺胺二甲嘧啶能夠影響輪蟲（Brachionus calyciflorus）的神經信號傳遞，抑制消化酶活性，最終導致攝食能力的下降。

圖3 不同暴露處理48 h后大型溞（A）牧食率和（B）濾水率變化Fig. 3 (A) Ingestion rates and (B) filtration rates variation of D. magna with different exposure treatments after 48 h exposure

在暴露48 h后，PS-MPs與ROX共同暴露組中大型溞的牧食率和濾水率相較于空白實驗組分別下降了 31.3%和31.6%。在本實驗中，共同暴露組中大型溞的牧食率和濾水率與 PS-MPs單獨暴露組無顯著差異（P＞0.05），但遠高于 ROX單獨暴露組（P＜0.05），說明 ROX對大型溞覓食行為的抑制效果要強于PS-MPs，但是在二者共存的情況下，PS-MPs能夠降低ROX對大型溞覓食行為的影響。Zhang et al.（2019）研究了PS-MPs和ROX的交互效應對紅羅非魚（Oreochromis niloticus）的生理生化影響，觀察到聯合暴露下的紅羅非魚腦神經系統中乙酰膽堿酯酶（AChE）活性受抑制程度要明顯小于ROX單獨暴露，這表明PS-MPs存在的情況下，能夠減輕ROX對紅羅非魚的覓食和運動等功能的抑制作用，該研究者認為吸附在PS-MPs表面上的ROX不能直接與AChE相互作用，從而減輕抑制作用。Fonte et al.（2016）近期研究了抗生素頭孢氨芐和聚乙烯（Polyethylene，PE）MPs對蝦虎魚（Pomatoschistus microps）的聯合效應，發現聯合暴露和PE-MPs單獨暴露96 h后對蝦虎魚捕食性能的影響沒有顯著差異，但是蝦虎魚在聯合暴露后的捕食性能略高于抗生素單獨暴露后的捕食性能，這表明 PE-MPs的存在降低了頭孢氨芐的毒性；該作者認為 PE-MPs可能在生物體內發生改性，使得本要進入生物細胞內的頭孢氨芐被 PE-MPs結合，導致頭孢氨芐的毒性降低。雖然MPs和抗生素復合污染對水生生物覓食行為的影響機理目前還不完全清楚，但本實驗研究顯示在環境相關濃度的MPs和ROX暴露下，大型溞的攝食能力受到了顯著抑制，這可能會導致機體缺乏營養供應，從而對大型溞的繁殖能力產生抑制作用。

2.4 PS-MPs與ROX對大型溞的生理生化影響

生物體受到某些外源污染物的脅迫時，會引起其體內 ROS的含量增多。當 ROS的含量水平超出生物體自身的清除能力時，氧化脅迫隨即出現。作為抗氧化酶，SOD和CAT廣泛存在于動物、植物和微生物中。SOD能夠催化超氧化物陰離子發生歧化作用，生成過氧化氫和氧氣，然后通過CAT作用將過氧化氫分解生成水（Piddington et al.，2001）。CAT通常與 SOD聯合作用，建立起生物體對ROS脅迫的應激防御機制。在本實驗中，各暴露組大型溞的SOD活性和CAT活性相較于空白實驗組都有較明顯的降低（圖 4）；PS-MPs單獨暴露組和 ROX單獨暴露組中大型溞的 SOD活性相較于空白實驗組分別下降了 26.1%和13.7%，CAT活性分別下降了24.0%和56.0%，這表明MPs與ROX的存在使得大型溞受到污染脅迫，產生了大量 ROS，而大型溞體內的抗氧化酶SOD和CAT不足以抵抗污染物引起的氧化脅迫，從而導致氧化損傷。有學者認為，當污染脅迫超過一定限度后，將會抑制抗氧化酶的合成，這時，抗氧化酶的清除速率低于ROS產生速率，導致其體內積累過量的ROS而受到毒害（Basha et al.，2003），這可能是導致大型溞抗氧化酶活性降低的原因。

圖4 不同暴露處理48 h后大型溞（A）SOD活性和（B）CAT活性的變化Fig. 4 (A) SOD activity and (B) CAT activity variation of D. magna with different exposure treatments after 48 h exposure

在暴露48 h后，PS-MPs與ROX共同暴露組中大型溞的SOD和CAT活性相較于空白實驗組均受到顯著抑制。在PS-MPs與ROX聯合暴露下，SOD的活性抑制率為 20.8%，高于 ROX單獨暴露的抑制率（13.7%），低于 PS-MPs單獨暴露的抑制率（26.1%），這說明在 PS-MPs（250 μg·L-1）與 ROX（5 μg·L-1）的聯合作用下，對大型溞SOD活性產生了簡單相加作用；而CAT的活性在PS-MPs與ROX聯合暴露下的抑制率為 60%，略大于 PS-MPs和ROX單體暴露的抑制率（抑制率分別為 24%和56%），因此我們認為在 PS-MPs（250 μg·L-1）與ROX（5 μg·L-1）共同存在的情況下，會對大型溞CAT活性產生輕微的協同作用。此外，在本實驗中，共同暴露組中大型溞的SOD活性與PS-MPs單獨暴露組和 ROX單獨暴露組均沒有顯著性差異（P＞0.05），這表明二者共同暴露并沒有顯著增加對大型溞的氧化脅迫。Zhang et al.（2019）等將大型溞暴露于的粒徑為 1 μm 的 PS-MPs（100 μg·L-1）和 ROX（10 μg·L-1）后也發現聯合暴露組與單一暴露組中大型溞的SOD活性沒有顯著性差異，并且觀察到了PS-MPs單一暴露或者與ROX聯合引起的谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GPx）的顯著降低，這表明二者單獨或共存情況下均會對大型溞造成氧化損傷。Fonte et al.（2016）在研究頭孢氨芐與PE-MPs對蝦虎魚的聯合效應時，同樣發現二者聯合暴露與PE-MPs單獨暴露對蝦虎魚的脂質過氧化損傷（Lipid Peroxidation，LPO）影響沒有顯著差異，該學者認為水中 PE-MPs會在一定程度上減輕頭孢氨芐對蝦虎魚的毒性。此外，有研究者者發現PS-MPs與 ROX共存能夠顯著降低紅羅非魚肝臟中丙二醛（MDA）含量，該學者認為 PS-MPs可以通過吸附其他污染物減輕對生物體的氧化損害（Zhang et al.，2019）。現階段有關MPs和抗生素聯合毒性的研究大多集中于魚類、貽貝等高營養級水生生物，而有關大型溞等浮游動物的毒性研究卻鮮有報道，本研究結果顯示在MPs和ROX共存情況下，對大型溞的抗氧化酶活性產生的明顯的抑制作用，但是其中的機理還尚未明晰，亟待開展深入研究。

3 結論

本文研究了0.1 μm PS-MPs和ROX對浮游生物斜生柵藻和大型溞的單一與聯合毒性。結果表明，MPs和ROX單一與聯合暴露對斜生柵藻的生長以及光合作用均有明顯的抑制作用，但是二者聯合毒性并沒有比單一毒性更加顯著；MPs和 ROX單一與聯合暴露對大型溞的牧食率和濾水率均有明顯的抑制作用，在二者共存的情況下，PS-MPs能夠降低ROX對大型溞覓食行為的影響；MPs與ROX對大型溞的SOD和CAT等抗氧化酶活性有著一定的抑制作用，在二者共存條件下，會對大型溞SOD活性產生相加作用，對CAT活性產生輕微的協同作用。本研究結果可為新興污染物在水環境中聯合毒性的深入了解提供科學依據，同時可為其在水環境中的生態風險評價和控制提供理論依據和技術支持。