精加力復合肉堿在精子體外處理中的應用

沙 漠

（新疆醫科大學附屬中醫醫院，新疆 烏魯木齊 830000）

精子活力是胚卵受精一個非常重要的前提，由于精子活力下降相較于精子密度低下以及異常形態精子數量的增加有更大的意義。在男性不育治療中，人工授精技術得到了快速普及，并提出了一種通過體外來實現對精子活力以及功能進行改善的實驗方法。為了有效提升精子活力同時強化弱精子癥的精液受精能力，人們已經進行了多種化學刺激試劑和制備技術的研制，并將精子同活力刺激藥物混合孵育來實現對人工授精成功率的有效改善[1]。精加力復合肉堿是一種由N-乙酰神經氨酸（燕窩酸，唾液酸）與左旋肉堿組成，其能夠在脂質酸線粒體進行氧化期間進行有效的轉運效果，并因此參與到機體代謝中，實現對活性氧來進行控制來實現對生精細胞穩定性的提升[2]。基于該原理，我們在對精子進行體外處理過程中，運用精加力復合肉堿，旨在對其在精子動力改善中的最佳時間和濃度進行改善，為人工受精提供客觀依據。

1 材料與方法

1.1 精液收集與準備：自我院2016年1月至2017年1月接診的不孕不育男性中選取35例作為本研究對象。所有患者均需禁欲3～5 d，通過手淫的方式對精液進行采集，并將其置于干燥的玻璃容器中，放置于37 ℃的水浴箱中，在精液逐漸液化之后，再運用全自動精液分析儀對精液樣本進行測定，主要檢測精子活動率（a+b+c）級精子、密度以及前向運動（a+b）級精子。若精子的前向運動（a+b）精子在50/%范圍內，精子的密度超過了20×10-9/L，即可將其納入試驗。

1.2 精加力復合肉堿溶液制備：取精加力復合肉堿（全名為精加力左旋肉堿復合營養素，15克/包），每包中含有N-乙酰神經氨酸（燕窩酸，唾液酸）與左旋肉堿。對精加力復合肉堿進行配制，使其成為濃度分別為1 mg/mL和2 mg/mL的溶液。另精子營養液則運用含有10%Fcs的Earke液。

1.3 方法：依次從35例弱精癥男性的精液標本中抽取0.3 mL，將其分別裝置在5個試管中，并將其分為5組，各組7例標本。分別向35例標本中加入0.5 mL的精子營養液，保留1組用于對照，另4組則分別加入0.3 mL精加力復合肉堿溶液。其中A組加入1 mg/mL的精加力復合肉堿溶液，持續進行30 min的孵育；B組加入2 mg/mL的精加力復合肉堿溶液，持續進行30 min的孵育；C組加入1 mg/mL的精加力復合肉堿溶液，持續進行60 min的孵育；D組加入2 mg/mL的精加力復合肉堿溶液，持續進行60 min的孵育。將各組試管充分混合之后，將其放置到37 ℃的恒溫環境下進行孵育。運用CASA系統進行分析處理，并對各例標本進行6個視野的觀察。

1.4 觀察指標：各例均以精子活動率（a+b+c）級精子、前向運動（a+b）級的變化，來對精子的判定結果進行提升。①顯效：處理后，精子的精子活動率、前向運動較之處理前，提升幅度達到了15%。②有效：處理后，精子的精子活動率、前向運動較之處理前，提升幅度達到了5%～15%。③無效：處理后，精子的精子活動率、前向運動較之處理前，提升幅度不足5%。

1.5 統計學方法：運用統計學軟件SPSS17.0行數據的分析處理，運用相關性分析計數資料，并通過χ2進行檢驗。

2 結 果

2.1 四組精子活動率變化：A、B、C、D組精子活動率與空白對照組比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）；B、C、D組精子活動率與A組比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）；B、C組精子活動率與D組比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 四組體外精子活動率比較[n（%）]

2.2 四組精子前向運動率變化：A、B、C、D組精子前向運動率與空白對照組比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）；B、C、D組精精子前向運動率與A組比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）；B、C組精子前向運動率與D組比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 四組精子前向運動率比較[n（%）]

3 討 論

針對弱精子癥所引起的男性不孕不育，在臨床給藥未達到效果后，普遍通過人工授精技術進行處理。在對人工授精進行處理的過程中，通過何種方法對精子活力進行改善，促使其精子使卵子的受精能力得到有效增強，從而實現對人工授精成功率進行提升具有至關重要的意義。精加力復合肉堿主要是由N-乙酰神經氨酸（燕窩酸，唾液酸）與左旋肉堿，按照1：2的比例配置而成的混合固體制劑[3]。根據相關研究數據顯示，在精漿、附睪中含有較高濃度的N-乙酰神經氨酸（燕窩酸，唾液酸）和左旋肉堿，是血清中N-乙酰神經氨酸（燕窩酸，唾液酸）與左旋肉堿濃度的數百倍，其可有效促進長鏈脂肪酸快速經由精子的線粒體內膜，隨之進入到線粒體基質中，通過β-氧化隨之產生大量的能量，以供精子活動需求[4]。針對弱精癥患者的精漿，左旋肉堿含量本身就相對較低，為此，我們在精子體外處理中，通過向其加入不同濃度的精加力復合肉堿，根據結果來看，加入精加力復合肉堿溶液的四組其精子活動率、前向運動率均高于空白對照組（P＜0.05）；而通過加入不同濃度的精加力復合肉堿四組對比來看，A組的效果最為顯著，顯著高于B、C、D組（P＜0.05）。這就充分表明精加力復合肉堿可有效提升體外弱精癥精子活力，其中A組的方案最為顯著。綜上所述，精加力復合肉堿是一種有效提升精子活力的體外處理方法，值得推廣。