不同檢測方法在EDTA依賴性假性血小板減少癥中的應用效果比較

劉詠菊1 陳煒璽2

（1武警山西總隊醫院檢驗科，山西 太原 030006；2太原市中心醫院檢驗科，山西 太原 030006）

血常規檢查是臨床疾病診斷及療效評估的一項常見輔助手段，可讓醫師了解到患者血清中血細胞狀態、血細胞數量以及血小板計數等情況。其中，血小板計數檢測結果是臨床診斷止血性、血栓性疾病的主要依據。因此，準確檢測血小板計數具有重要的意義。然而，在實際工作中我們可以發現，乙二胺四乙酸（EDTA）可使血液中血小板發生凝集，導致假性血小板減少現象，引起疾病誤診誤治[1]。為避免患者進行不必要的檢查，尋找一種有效、準確的檢測方法以對EDTA依賴性血小板減少癥進行排查十分有必要。為此，本研究將對比手工草酸銨法、全血細胞分析法、儀器間接稀釋法在EDTA-PTCP檢測中的應用效果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2016年3月至2018年3月到我院就診的37例EDTAPTCP患者的全血樣本作為實驗對象，其中有17例女性、20例男性，年齡19～52歲，平均年齡（43.82±5.39）歲。上述患者在血常規檢查中可見其血小板計數顯著減少，但血紅蛋白、白細胞計數以及肝腎功能、凝血功能檢查結果均正常，無出血傾向，最后經外周血涂片檢查證實為EDTA-PTCP。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器：日本希森美康（sysmex XT-1800i）全自動血液分析儀及其配套試劑、質控品；1%草酸銨稀釋液（為我科檢測人員依據《全國臨床檢驗操作規程》中的步驟自行配制）；采血管為EDTA-K2抗凝試管（美國BD公司）；日本奧林巴斯雙目顯微鏡。

1.2.2 檢測方法：①手工草酸銨法：抽取37例患者的肘靜脈血2 mL。在不同時間點5、10、20、30、60、120 min取適量血樣本將其置于0.38 mL的1%草酸銨稀釋液（不含EDTA）中，待其充分混勻后，放置在計數池內，靜置10～15 min，待血小板完全下沉后，在1 h內用顯微鏡進行血小板計數。②全血細胞分析法：抽取37例患者的肘靜脈血2 mL，置于含有乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）的抗凝試管中并搖勻，在采集的2 h內用sysmex-1000i全自動血液分析儀測定采集后5、10、20、30、60、120 min不同時間點的血小板計數水平。③儀器間接稀釋法：抽取患者的肘靜脈血2 mL于含有EDTA-K2的抗凝試管中，并在采集后不同時間點（5、10、20、30、60、120 min）吸取20 μL血樣本，并將其加入到血細胞分析儀稀釋液中，混勻，最后用sysmex-1000i全自動血液分析儀測定血小板計數水平。觀察上述3中檢測方法不同時間點（5、10、20、30、60、120 min）測定血小板計數的差異。

1.3 統計學方法：選用SPSS24.0軟件，計數數據以率（%）形式表示，用χ2檢驗；計量數據以（±s）表示，兩組組間比較用獨立樣本t檢驗，多組樣本比較則使用方差分析。P＜0.05，表示差異具統計學意義。

2 結 果

采集5 min內，手工草酸銨法檢測未完成，無血小板計數結果，而全血細胞分析法和儀器間接稀釋法檢測的血小板計數結果比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；但在采集后10、20、30、60、120 min進行檢測發現，全血細胞分析法檢測的血小板計數結果明顯少于采集5 min，且與手工草酸銨法、儀器間接稀釋法有顯著性差異（P＜0.05）；手工草酸銨法與儀器間接稀釋法的血小板計數結果比較差異不明顯（P＞0.05），見表1。

表1 三種檢測方法復檢血小板的結果比較（±s，×109/L）

表1 三種檢測方法復檢血小板的結果比較（±s，×109/L）

注：與全血細胞分析法比較，*P＜0.05

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3 討 論

EDTA-PTCP主要是發生在體外且因使用EDTA抗凝劑而引起的血小板假性減少的現象，其本身不具有病理性意義，但也有可能見于某些嚴重性病癥中，如免疫系統疾病、癌癥等。相關數據顯示[2]，在我國EDTA-PTCP的發生率占0.08%～0.25%，而且隨著EDTA抗凝劑的應用越來越廣泛，其發生率呈逐年上升的趨勢。因此臨床對于EDTAPTCP的診治必須加以重視。目前臨床對于初步懷疑EDTA-PTCP的患者，均需重新檢測。本研究為提高EDTA-PTCP檢測的準確性，探析手工草酸銨法、全血細胞分析法、儀器間接稀釋法的檢測效果，結果顯示，采集5 min內，手工草酸銨法難以完成檢查，而全血細胞分析法和儀器間接稀釋法檢測血小板計數結果差異不明顯（P＞0.05），但在采集后10、20、30、60、120 min全血細胞分析法檢測的血小板計數結果明顯少于手工草酸銨法、儀器間接稀釋法（P＜0.05），且手工草酸銨法與儀器間接稀釋法的檢測結果的差異不顯著，與查有艷[3]的研究報道基本相符，提示三種檢測方法中，在采血后5min內應用儀器間接稀釋法復查EDTA-PTCP的準確性較高。綜上所述，手工草酸銨法、儀器間接稀釋法檢測EDTA-PTCP效果相當，均優于全血細胞分析法，但儀器間接稀釋法操作簡單，能夠有效縮短檢測時間，降低實驗室成本，可將其作為本病檢測的常用手段之一。