2018年北京市艾滋病篩查試驗室室間比對結(jié)果分析

李佳 張琴 辛若雷 盧紅艷 孫偉東

艾滋病(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)感染引起的以人體CD4+T淋巴細(xì)胞減少為特征，繼發(fā)各種機會性感染、惡性腫瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變的綜合性疾患[1]。截至2017年10月31日，北京市累計報告艾滋病病毒感染者及病人共25 648例，現(xiàn)存活感染者及病人共17 476人[2]，疫情仍呈擴大趨勢。近些年北京市艾滋病檢測隊伍不斷擴大，室間比對作為評價檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的重要手段之一，可以反映實驗室的運行現(xiàn)狀。為了解目前北京市各級艾滋病篩查實驗室的檢測質(zhì)量，現(xiàn)將2018年室間比對結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1考評對象 共有245家北京市衛(wèi)生計生委所批復(fù)建立的艾滋病篩查實驗室，其中醫(yī)療機構(gòu)實驗室數(shù)量最多，占86.5%(表1)。

1.2考評設(shè)計與實施

1.2.1樣本盤的設(shè)計與制備: 設(shè)計與制備5種不同抗原或抗體屬性的考評用樣本盤：陰性、抗原陽性、弱陽性、陽性、強陽性。每家實驗室10支樣本，每種屬性2支。均委托北京康徹思坦生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.2.2隨機化處理: 使用WPS Office中的RAND函數(shù)實施隨機編號，用統(tǒng)一規(guī)格的凍存管分裝考核樣本。

表1 2018年北京市艾滋病篩查實驗室室間比對成績分布

1.2.3檢測策略和結(jié)果回報：參照《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》(WS293-2008)[1]、《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》檢測[3]，回報電子版及紙版結(jié)果。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 艾滋病確證中心負(fù)責(zé)收集各篩查實驗室的回報結(jié)果，使用SPSS 19.0匯總分析。

1.4評分標(biāo)準(zhǔn)和成績反饋 滿分100分，其中樣本檢測60分、原始記錄10分、臨界值5分、復(fù)檢化驗單5分、外部對照5分、質(zhì)控圖5分、其他錯誤項10分。80分及以上判定合格。出現(xiàn)漏檢、誤檢問題的實驗室，補考通過可判為合格。

2 結(jié)果

2.1成績分布 室間比對的參加率為100%，總體合格率為100%，全市平均成績?yōu)?6.1分，其中疾病預(yù)防控制機構(gòu)的最高(98.7分)，第三方檢測機構(gòu)的平均成績最低(94分)。滿分實驗室共有115家(46.9%)，其中疾病預(yù)防控制機構(gòu)滿分率最高(62.5%)，第三方檢測機構(gòu)滿分率最低(12.5%，表1)。

2.2評分標(biāo)準(zhǔn)得分分布 有15家(6.1%)篩查實驗室漏檢與誤檢25份樣本，復(fù)檢滿分率低于初篩且有1家低于21分(表2)。

2.3常見錯誤項

2.3.1樣本檢測：漏檢與誤檢的25份樣本中，13份(13/25)是弱陽性樣本，8份(8/25)是陽性樣本，3份(3/25)是抗原陽性樣本，有1份陰性樣本。不同檢測方法均有檢測出錯情況，包含3種酶聯(lián)免疫試劑、2種化學(xué)發(fā)光試劑、4種快速檢測試劑，其中快速檢測出錯率較高，在出錯的弱陽性及陽性樣本中有84.6%與50%都是快速檢測(表3)。對出現(xiàn)漏檢、誤檢的實驗室，聯(lián)合轄區(qū)篩查中心實驗室進行了專項督導(dǎo)，補考后沒有再次出現(xiàn)類似情況，成績合格。

2.3.2原始記錄：檢測依據(jù)為《艾滋病和艾滋病病毒診斷標(biāo)準(zhǔn)》(WS293-2008)，49家實驗室檢測依據(jù)缺失或引用錯誤；《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》已更新為2015年版本，9家實驗室SOP文件未更新；1家實驗室儀器、試劑等信息不全。

2.3.3臨界值：計算錯誤及設(shè)定錯誤共包括5種酶聯(lián)免疫三代試劑及3種化學(xué)發(fā)光四代試劑，包括珠海麗珠三代(3家扣分)、上海科華(1家扣分)、北京華大吉比愛、廈門英科新創(chuàng)、北京萬泰三代(1家扣分)、德國羅氏(3家扣分)、美國雅培(4家扣分)、德國西門子(1家扣分)。

表2 2018年北京市艾滋病篩查實驗室室間比對評分標(biāo)準(zhǔn)得分分布

2.3.4復(fù)檢化驗單：扣分內(nèi)容主要是項目填寫不規(guī)范或空項(59家扣分)，試劑信息中應(yīng)標(biāo)注屬于幾代試劑(24家扣分)，《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》中快速檢測的結(jié)果由“陰/陽性”變更為“無/有反應(yīng)性”(5家扣分)。

2.3.5質(zhì)控圖：扣分集中在酶聯(lián)試劑，繪制質(zhì)控圖時應(yīng)使用S/CO值，2家用錯參數(shù)；3家圖中數(shù)據(jù)與原始結(jié)果中不能對應(yīng)；有1家提供了其他檢測項目的質(zhì)控圖。

2.3.6其他: 單位編號或樣本編碼填報錯誤(49家扣分)，450 nm/620 nm雙波長比色時不應(yīng)設(shè)置空白對照(7家扣分)，初篩無反應(yīng)的樣本無需進行復(fù)檢試驗(8家扣分)，篩查實驗室只能出具“HIV抗體陰性”的報告單(10家扣分)。

表3 2018年北京市艾滋病篩查實驗室室間比對中漏檢與誤檢情況

3 結(jié)論

3.1北京市艾滋病確證中心實驗室自2002年起組織開展篩查實驗室室間比對，2018年合格率、滿分率較高，較之前有明顯提高[4]。這表明目前的檢測質(zhì)量基本滿足臨床診療。其中，疾病預(yù)防控制機構(gòu)滿分率與平均成績最高，第三方檢測機構(gòu)的最低，可能跟人員流動性偏大有關(guān)。初篩的檢測質(zhì)量優(yōu)于復(fù)檢，由于復(fù)檢中包含兩次檢測，且很多單位采用快速檢測作為第二試劑，而快速檢測是肉眼判讀，其扣分率比酶聯(lián)或發(fā)光都高，尤其在弱陽性樣本的檢測中，判讀時間、判讀光線、不同檢測者都可能影響判讀結(jié)果。

3.2督導(dǎo)中發(fā)現(xiàn),部分實驗室日常工作中不常遇到復(fù)檢樣本，對第二試劑的說明書沒有仔細(xì)閱讀，在臨界值計算時忽視了陰性對照或陽性對照的設(shè)定條件。另外，個別有多年工作經(jīng)驗的檢測者，由于盲目自信也出現(xiàn)沒有按照作業(yè)指導(dǎo)書中操作的情況。盡管培訓(xùn)中對質(zhì)控圖繪制、復(fù)檢化驗單填寫等都做了講述，但是多數(shù)培訓(xùn)人員沒有對科內(nèi)或院內(nèi)進行二次培訓(xùn)。與其他省市類似[5-8]，大多數(shù)醫(yī)療機構(gòu)普遍采取輪轉(zhuǎn)方式，這點導(dǎo)致輪轉(zhuǎn)或新上崗的檢測者不能有效交接工作。今后要把樣本保存與運送、檢測流程、儀器設(shè)備的維護與檢定等作為重點督導(dǎo)項目，對于性質(zhì)特殊的醫(yī)療機構(gòu)，如社會福利院、精神病院等檢測需求少的實驗室仍需加強技術(shù)指導(dǎo)，減少因不規(guī)范操作造成的漏檢與誤檢。

此次研究顯示合格率及滿分率較高，但在督導(dǎo)中仍發(fā)現(xiàn)有的篩查實驗室在對待室間比對樣本時多次重復(fù)檢測或由高級職稱人員代替檢測，不能完全真實有效地反映日常檢測質(zhì)量。另外，此次僅對2018年室間比對結(jié)果進行了分析，今后應(yīng)結(jié)合歷年室間比對結(jié)果進行總結(jié)，更有利于發(fā)現(xiàn)檢測中存在的問題，提高檢測質(zhì)量。