湯春梅
(甘肅林業職業技術學院,甘肅天水 741020)
金鉆蔓綠絨(Philodendron con-go)又名金鉆、喜樹蕉,為天南星科喜林芋屬多年生常綠草本植物,原產南美洲,為熱帶和亞熱帶常見觀賞植物。葉片寬、手掌形、肥厚、有光澤,葉柄長而粗壯,氣生根發達,生命力極強,具有凈化空氣的作用,可保持室內空氣清新,是近年來較為流行的室內觀葉植物,適宜家居、辦公、酒店等場所。目前國內市場需求量逐年增大,僅以傳統的分株繁殖,速度慢、繁殖系數低,供不應求。該研究利用組織培養的方法建立金鉆蔓綠絨無性繁殖體系,為實現金鉆蔓綠絨快速繁殖及規?;a提供技術支持。
供試材料為甘肅林業職業技術學院花卉示范基地溫室內的金鉆蔓綠絨小盆栽,選取當年生無病蟲危害的幼苗莖段作為外植體。
1.2.1 外植體處理。將采回來的外植體材料剪去葉片,切成2~3 cm的小段,先用洗潔精表面清洗,再用流水沖洗30 min,在超凈工作臺上用75%酒精浸泡30 s,無菌水沖洗3次,再用0.1%升汞浸泡10 min,無菌水沖洗5次,然后置于鋪有無菌濾紙的接種盤中備用。
1.2.2 不定芽誘導培養。將處理好的外植體剪成約1 cm的小段,接種于MS添加不同濃度6-BA和NAA的誘導培養基上,6-BA濃度設為1.0 mg/L、3.0 mg/L、5.0 mg/L,NAA濃度設為0.1 mg/L和0.3 mg/L,培養30 d后統計不定芽誘導情況。
1.2.3 不定芽增殖培養。將誘導出的生長健壯的不定芽,轉接到以MS為基本培養基,添加0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L 6-BA 和 0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L NAA的增殖培養基中,30 d后統計增殖率
1.2.4 生根培養。將長至2 cm以上的無根芽苗剪下,轉入以1/2MS和MS為基本培養基,添加0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L NAA的生根培養基中誘導生根,20 d后統計生根率。
1.2.5 培養條件。所有培養基都附加3%蔗糖、0.6%瓊脂,pH 5.8;培養溫度 25±2℃,光照時間 12 h/d,光照強度 2 000~3 000 lx。
將莖段接種在含有不同濃度6-BA和NAA培養基上進行不定芽誘導培養,2周后發現外植體兩端逐漸膨大,基部切口出現綠色突起并逐漸分化形成不定芽。由表1可知,6-BA和NAA對金鉆蔓綠絨不定芽誘導具有顯著影響,在NAA濃度為0.1 mg/L時,隨6-BA濃度的升高不定芽誘導率也升高;在NAA濃度為0.3 mg/L時,隨6-BA濃度的升高不定芽誘導率先升高后降低;6-BA濃度為3.0 mg/L時,不定芽誘導率最高,達到96.7%。由此可見,金鉆蔓綠絨不定芽誘導的最適培養基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L。

表1 不同培養基對金鉆蔓綠絨不定芽誘導的影響
將誘導出的健壯不定芽分割成單芽后接種于增殖培養基上,培養30 d后增殖效果因激素濃度配比不同而存在差異。從表2可以看出,在一定濃度范圍內,不定芽的增殖倍數與6-BA呈正相關,當NAA濃度一定時,隨6-BA濃度的升高不定芽增殖倍數也升高;而一定濃度的NAA也有利于不定芽的增殖,當6-BA濃度一定時,隨NAA濃度的升高不定芽增殖倍數先升高后降低;對比發現MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L培養基的增殖效果較為突出,增殖倍數為4.2,但會產生不同程度的玻璃化苗??紤]到組培苗的健壯度和成苗質量,認為金鉆蔓綠絨不定芽增殖的最適培養基為MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。

表2 不同培養基對金鉆蔓綠絨不定芽增殖的影響
在生根培養基中培養10 d左右,無菌苗基部出現白色突起,隨后逐漸伸長,20 d后能形成較為粗壯的根。從表3可以看出,在MS和1/2MS基本培養基

表3 不同培養基對金鉆綠蔓絨生根的影響
中添加不同濃度的NAA都能使其生根,而以MS+NAA 0.5 mg/L培養基最佳,不僅生根率100%,而且根數較多,苗長勢好。因此,MS+NAA 0.5 mg/L是金鉆蔓綠絨最適宜的生根培養基。
該研究以金鉆蔓綠絨當年生幼苗莖段為外植體,在MS培養基上添加適量的6-BA和NAA誘導其形成不定芽,其中MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L培養基的不定芽誘導率最高,為96.7%,是金鉆蔓綠絨最適宜的不定芽誘導培養基。
增殖培養階段,對增殖影響顯著的是6-BA,隨6-BA濃度的升高,不定芽增殖倍數也升高,但過高濃度的6-BA易在切口處形成愈傷組織,且有玻璃化現象產生;當NAA濃度為0.2 mg/L時,6-BA濃度為2.0 mg/L的增殖倍數比6-BA濃度為1.5 mg/L高,形成的芽苗盡管多但較為細弱,同時會不同程度地產生玻璃苗,這樣的芽苗會影響后續增殖培養時的增殖倍數及成苗質量,因此金鉆蔓綠絨不定芽增殖的適宜培養基為MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。
生根階段,MS比1/2MS更有利于生根,其中MS+NAA 0.5 mg/L是金鉆蔓綠絨最適宜的生根培養基,不僅生根率100%,而且生根量多,植株健壯;另外,生根階段采用的各處理均能較好生根,生根率均在92%以上,說明金鉆蔓綠絨較易生根。根據其氣生根發達的特性,在今后的研究中可進一步優化增殖培養基和延長培養時間,以便在增殖過程中產生大量帶氣生根的小植株,將其剪下直接移栽,這樣可以節約生根培養所需的時間和生產成本。