梅毒檢驗中酶聯免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清法的比較

姚映生

（汕頭市中心醫院檢驗科 廣東汕頭 515031）

1 前言

近幾年來，梅毒感染性檢出率明顯上升[1]，成為社會共同關注的公共衛生問題。梅毒是由蒼白螺旋體引起的一種性傳播疾病[2]，一般使用酶聯免疫吸附法檢測，雖然其靈敏度較高，特異性較好，且操作方便，但有假陽性高的不足，臨床篩查中存在一部分缺陷。隨著醫療水平的逐漸提升，臨床上應用了檢測準確性更高的梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗，缺點是試劑盒價格昂貴，所以難以作為常規的梅毒篩查方法廣泛應用。對于梅毒感染能否進行快速而精準的診斷，是當前亟待解決的首要問題。通過梅毒篩查的200 例患者臨床資料，比較甲苯胺紅不加熱血清試驗與酶聯免疫吸附法檢測在梅毒檢驗中的臨床應用價值。

2 資料與方法

2.1 一般資料

收集2018年3月—2019年5月接收的梅毒感染患者資料200 例，隨機均分為實驗組和對照組。實驗研究組男性患者56 例，女性患者44 例，年齡范圍 30～61 歲，平均年齡（44.73±11.67）歲；對照組男性患者 57 例，女性患者 43 例，年齡范圍 29～61 歲，平均年齡（45.26±10.78）歲。兩組患者在一般資料上無統計學意義（P＞0.05），有可比性。

2.2 方法

2.2.1 檢測儀器

洗板機、全自動酶聯免疫分析儀、微量加樣器等。

2.2.2 試劑盒

深圳寶安康生物有限公司生產的甲苯胺紅不加熱血清試驗試劑盒、上?？迫A生物工程股份有限公司生產的酶聯免疫吸附試劑盒，均在有效期內。

2.2.3 檢測方法

抽取梅毒感染者的靜脈血5 mL，放置5 min 后，分離血清并進行檢測，分別采用甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯免疫吸附法進行梅毒檢測，檢測方法均為常規操作，操作按照試劑盒中的說明書進行。

甲苯胺紅不加熱血清法:（1）加樣：加入 50 μL 待測標本于預包被板條孔，分別設置空白對照、陽性和陰性，于 37℃中溫育 1 h；（2）加酶:加入酶標物 50 μL于 3 組中，搖勻后于 37℃中放置 0.5 h；（3）顯色：置入50 μL 底物緩沖液于各孔中，搖勻后于37℃中溫育0.5 h，并于隔孔內加入50 μL 終止液，在全自動酶聯免疫分析儀上讀出數據并記錄。

酶聯免疫吸附法:（1）加樣：于卡片圈中均勻加入 50 μL 血清；（2）加抗原：于孔內均勻加入 1 滴抗原液體；（3）反應：在立體脫色搖床中以 100 r/min 震蕩8 min，在亮光下觀察其結果。

2.3 統計學方法

兩組梅毒感染患者的觀察指標將采用SPSS16.0系統軟件統計分析。敏感性、特異性及陽性預測值為計數資料，用（n，%）表示；用 χ2檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

3 結果

甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯免疫吸附法梅毒抗體檢測結果比較結果表明，酶聯免疫吸附法檢測結果的敏感性、特異性及陽性預測值均高于甲苯胺紅不加熱血清法，差異有統計學意義(P＜0.05)，具體內容詳見表1。

表1 兩組檢測方法的敏感性、特異性及陽性預測值的比較

4 討論

據研究數據顯示[3]，近年來，梅毒感染率始終呈上升態勢，且上升速度也逐年增長，其中也包括地區獻血人群的梅毒檢出率。梅毒感染的病原體是梅毒螺旋體，梅毒螺旋體侵襲機體后會產生一種非特異性抗體，此非特異性抗體臨床上檢出難度較高，通常在梅毒晚期可以檢出，有時會出現陰性結果，造成漏診的現象。至今臨床檢查中將特異性抗體作為感染梅毒的主要依據，就是由于梅毒螺旋體的特異性抗體出現時間早而消失較晚。截止到目前，臨床上主要的梅毒檢測方法是甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯免疫吸附法[4]，甲苯胺紅不加熱血清法操作起來方便快捷，檢查費用低，但易受主觀因素影響；酶聯免疫吸附方法是對血清中的特異性抗體進行一系列檢測，決定結果的數據來自全自動酶聯免疫分析儀，能最大幅度降低主觀性判斷的誤差，檢出率相對精確。

綜上可知，酶聯免疫吸附法的篩查精準度高于甲苯胺紅不加熱血清法，臨床應用價值更高。使用酶聯免疫吸附法來檢測梅毒感染患者[5]，可以將血清中梅毒抗體免疫球蛋白一并檢測。先使用甲苯胺紅不加熱血清法作為初篩，再采用準確度高的酶聯免疫吸附方法作進一步檢查，可有效提高梅毒陽性檢出率，同時能檢測出梅毒抗體是否呈陽性，有效預防篩查過程中的誤診漏診，充分發揮梅毒檢測的意義，提高梅毒的檢出率，值得作進一步臨床推廣。