水產(chǎn)品中孔雀石綠和結晶紫及其代謝物殘留量的LC-MS/MS測定法

周剛

（邢臺市食品藥品檢驗所 河北邢臺 054000）

1 前言

QuEChERS 方法是最近幾年來國際上最新發(fā)展起來的一種用于農(nóng)產(chǎn)品檢測的快速樣品前處理技術，2003年，由美國農(nóng)業(yè)部 Anastassiades 教授等開發(fā)，主要應用于農(nóng)藥殘留的檢測[1]。近年來，該方法應用到獸藥殘留的檢測研究屢見報道[2,3]。本文利用QuEChERS 前處理方法，測定水產(chǎn)品中非法添加的孔雀石綠和結晶紫及其代謝物殘留量。

2 實驗部分

2.1 試劑與儀器

孔雀石綠、結晶紫、隱色孔雀石綠、隱色結晶紫（德國 Dr.Ehrensorfer）；ProElut QuE 15 mL Tube 凈化管（北京迪馬科技）；甲醇、乙腈（均為色譜純，美國Fisher 公司）；LC-MS/MS（日本島津）；水產(chǎn)品（均采自于當?shù)厥袌觯?/p>

2.2 樣品提取

稱取2.0 g 樣品于50 mL 具塞離心管中，加入2.0 g NaCl，混勻，再加20 mL1%甲酸乙腈，渦旋混合1 min，振蕩 10 min，8 000 rpm 離心 2 min，取 10 mL上清液待凈化。

2.3 樣品凈化

首先，將10mL 上清液轉移至15mL 凈化管中，振蕩 5 min，8 000 rpm 離心 2 min；其次，取上清液 5 mL，40℃減壓蒸干，用流動相復溶，用0.22 μm 濾膜過濾后供LC-MS/MS 分析；最后，采用相同方法制備空白基質(zhì)標準溶液。

2.4 LC條件

色譜柱:LeapsilC18，100 mm×2.1 mm，2.7 μm；流速:0.3 mL；進樣量:5 μL；柱溫:35℃；流動相:A:5 mmol/mL 乙酸銨+0.2%乙酸，B:乙腈；A∶B=15∶85。

2.5 質(zhì)譜條件

電離模式:ESI；掃描方式:正離子；檢測方式:MRM；電噴霧電壓:5 500 V；霧化氣壓力:50 psi；輔助氣壓力:50 psi；簾氣壓力:20 psi；離子源溫度:500℃。定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓詳見表1。

表1 定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓

3 結果與討論

在相同的色譜與質(zhì)譜條件下，分別針對魚、蝦、蟹、貝作1.0 μg/kg 水平回收實驗，實驗結果詳見表2。

表2 水產(chǎn)品中孔雀石綠、結晶紫、隱色結晶紫、隱色孔雀石綠的添加回收結果

由表2可知，添加水平 1.0 μg/kg 時回收率為72.25%～107.08%。濃度 0.5 μg/L 孔雀石綠、結晶紫、隱色結晶紫、隱色孔雀石綠混合標準品上機，MRM色譜圖詳見圖1。

圖1 0.5 μg/L 孔雀石綠、結晶紫、隱色孔雀石綠和隱色結晶紫 MRM 色譜圖

4 結語

本文通過對QuEChERS 方法和質(zhì)譜條件進行優(yōu)化，建立了水產(chǎn)品中孔雀石綠和結晶紫及其代謝物殘留量QuEChERS-LC-MS/MS 檢測方法，與常用的固相萃取法相比，本法前處理簡便高效，而且環(huán)保，適用于大批量水產(chǎn)品中的孔雀石綠和結晶紫及其代謝物殘留量檢測。