超高效液相色譜-串聯質譜法快速測定酒中的次烏頭堿、烏頭堿、中烏頭堿

黃思瑜 董憲兵 鄧宇杰 普正佳 田 圓 汪 敏

（重慶市食品藥品檢驗檢測研究院 重慶 401121）

1 前言

烏頭堿、次烏頭堿、中烏頭堿是存在于川烏、草烏、附子等植物中的主要有毒成份[1-4]。它們主要毒性作用是影響中樞神經系統和心臟，據估計，口服烏頭堿 2～3 mg 就可致人死亡[5]。但川烏、草烏、附子是中醫臨床常用中藥，民間常用草烏、川烏等植物來泡制藥酒，治療關節炎、風濕病等。但如果使用未炮制的烏頭堿類藥材、烏頭堿類藥材自行泡制藥酒，常導致中毒事件的發生[6]。因此，建立藥酒中烏頭堿、次烏頭堿、中烏頭堿的檢測方法對藥酒的安全性評價具有重要意義。烏頭堿類藥物常用的檢測方法有雙光束紫外-可見分光光度計[7-9]、薄層色譜法[10-13]、高效液相色譜法[14,15]、毛細管電泳場技術[16,17]、液相色譜-質譜法等[18-20]。本文采用高效液相色譜-串聯質譜法對藥酒中烏頭堿、次烏頭堿、中烏頭堿的分離和分析方法進行了研究，建立了定量及定性同時開展的快速方法。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

美國Waters 公司 Acquity UPLC 超高效液相色譜儀；美國AB SCIEX 公司API4000 三重四級桿串聯質譜儀（配備電噴霧離子源）；乙腈（色譜純，德國Merck 公司）；乙酸銨（色譜純，美國天地試劑公司）；次烏頭堿、烏頭堿、中烏頭堿均購于中國藥品生物制品檢定所。

2.2 標準溶液的配制

分別準確稱取適量次烏頭堿、烏頭堿、中烏頭堿標準品適量于100 mL 容量瓶，用乙腈溶解，并定容至刻度。配制成濃度為1.0 mg/mL 的標準儲備溶液，-18℃避光保存。準確移取次烏頭堿、烏頭堿、中烏頭堿標準儲備溶液1 mL 至100 mL 容量瓶，用乙腈稀釋定容，得到10 μg/mL 的混合中間標準溶液，4℃保存。……