新 生 兒 臍 血 染 色 體 核 型 異 常 情 況 分 析

李軍紅 馮 科 梁小娟 周 靜

(廣西柳州市人民醫院優生遺傳門診，柳州市 545001，電子郵箱：ljhong0725@sohu.com)

染色體病是一種常見的遺傳性疾病，是由于染色體數目或結構異常而引起的疾病，可導致智力低下、生長發育遲緩和多發畸形，是新生兒發病和死亡的重要原因之一[1]，逐漸成為影響兒童健康和出生人口素質的重大公共衛生問題，給社會和家庭帶來沉重的經濟和精神負擔。本研究對1 460例新生兒臍血細胞染色體核型進行分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年1月至2018年10月在本院分娩的1 460例新生兒。納入標準：(1)孕母年齡19～45歲，分娩孕周為35～42周；(2)在孕期未做產前篩查，或者孕期超聲提示胎兒軟指標異常，或有產前診斷指征(高齡、產前篩查高危、不良孕史、超聲提示羊水過多或過少、孕早期接觸過導致胎兒先天缺陷的物質等)但拒絕產前診斷的高危孕婦。

1.2 方法 新生兒娩出后抽取臍帶血2 mL，用肝素抗凝，取混合后的抗凝血0.5 mL注入淋巴細胞培養基(廣州達輝生物技術公司生產)中，混勻后置37℃溫箱中培養72 h。收獲細胞時提前2 h加入50 μL秋水仙素，使細胞分裂停止，染色體處于分裂中期狀態時轉移至10 mL離心管，1 800 r/min離心10 min，棄上清液后，加入0.075 mol/L的氯化鉀低滲液8 mL，混勻后置于37℃水浴箱中低滲30 min，然后加入甲醇和冰醋酸(3 ∶1)混合的固定液1 mL混勻，10 min后1 800 r/min離心10 min，棄上清液，加入8 mL固定液混勻靜置30 min，然后再1 800 r/min離心10 min，棄上清液，再次加入8 mL固定液混勻后直接1 800 r/min離心10 min，棄上清液后加入0.5 mL固定液得到細胞懸液，最后把懸液滴到玻片上，在75℃烤箱里烤片3 h。第二天對制作好的玻片進行染色體G顯帶處理。每例新生兒分析5個以上核型，計數中期分裂相20個以上，如出現嵌合型細胞系則計數100個分裂象。

2結果

1 460例新生兒中，染色體核型異常28例，檢出率為1.92%，其中常染色體異常19例，檢出率為1.30%，性染色體異常9例，檢出率為0.62%。19例常染色體異常中，數目異常8例，檢出率為0.55%；結構異常11例，檢出率為0.75%。染色體多態性變異54例，檢出率3.70%。異常染色體核型檢測情況見表1，染色體多態性核型檢出情況見表2。

表1 28例染色體異常核型

注：*為標記染色體。

表2 54例染色體多態性核型

3 討 論

本研究中1 460例新生兒的染色體異常率為1.92%，高于崔向英等[2]報告的0.6%，考慮為近年來人們不良生活方式，環境污染日益嚴重，各種物理、化學、生物感染，孕婦高齡導致染色體畸變所致。因此，應加強對高危孕婦進行產前篩查和產前診斷，對于孕期未行產前診斷者，在其新生兒出生時應留取臍帶血做染色體檢測，這是對妊娠期未行產前診斷的有益補充，有利于早發現、早診斷、早治療，在二級預防中有不可替代的作用[3]。及時發現異常染色體患兒，可為優生優育提供有價值的臨床診斷依據，對提高人口素質具有重要意義。

3.1 染色體異常與唐氏綜合征 唐氏綜合征又稱21三體綜合征，是人類第一個被確診的染色體疾病，表現為智力障礙，生長發育遲緩，特殊面容和多發畸形等，其發生機理為生殖細胞在減數分裂或受精卵在有絲分裂時，21號染色體不分離。該病群體發病率為0.125%～0.167%，且發病率隨孕母年齡增加而升高[4]，目前尚無有效的治療方法。本研究中21三體綜合征檢出率為0.34%，較群體發生率升高，考慮為研究對象是高危妊娠孕婦所致。該病患者存活時間較長，但因出現智力障礙給家庭帶來沉重的經濟負擔及精神壓力，因此預防和控制唐氏綜合征患兒的出生是優生優育的重要內容。通過對孕婦開展產前篩查及超聲軟指標(如頸項透明層)的篩查，對高風險的孕婦實施產前診斷，是降低和防止唐氏綜合征的主要措施，尤其在國家開放“二孩”政策后，高齡孕婦數量增加，而高齡孕婦卵細胞有老化趨勢，發生唐氏綜合征的風險率升高，重視高齡孕婦的遺傳咨詢及產前診斷工作，可降低唐氏綜合征患兒的出生率，減少出生缺陷，提高人口素質。

3.2 性染色體異常與Turner綜合征和卡爾曼綜合征 本研究中，檢出性染色體異常9例，其中45,X 3例，臨床表現為Turner綜合征(又稱先天性卵巢發育不全)，其在活產女嬰中的發生率為0.02%，99%的病例會在早期自發流產[5]。Turner綜合征其最常見原因為性染色體不分離，主要發生于父方，與孕婦年齡無關。所有患兒均表現為身材矮小，與染色體有關的卵巢早衰多見，而其他臟器(包括骨骼、淋巴水腫、耳聾、心血管、甲狀腺、泌尿生殖系統)異常情況較少，多數Turner綜合征女性智力正常，但有可能存在發育遲緩、失語和行為問題。Turner綜合征無法治愈，但可以通過合理的治療來減輕癥狀：在性成熟期及成人期接受治療，包括生長激素和低劑量的雄激素治療，可明顯增加身高，雌激素替代治療常用于促進第二性征發育以及維持正常的骨密度和組織健康。另外，在1 460例新生兒中，共檢出3例47,XXY，檢出率為0.21%。47,XXY是人類最常見的染色體異常，是由染色體增加而導致的第二大常見疾病，即卡爾曼綜合征，又稱性幼稚-失嗅綜合征，臨床表現為不育、睪丸小、身高高于平均身高、體毛稀疏、有女性化表現，一般無智力遲緩現象。雖然染色體異常不可逆轉，但有多種方法可以治療其相關癥狀。研究顯示，于12歲左右開始采用雄激素替代治療，可使多數男性擁有正常性生活[6]。本研究中檢出性染色體異常9例，檢出率為0.62%，高于既往研究報告的0.10%[7]，考慮由本研究對象主要為高危孕婦所致。

3.3 染色體多態性 染色體多態性主要是異染色質的變異，結構異染色質集中分布在著絲粒、端粒區、隨體、次縊痕和Y染色體長臂[8]，主要包括D/G組染色體變異，1、9、16號染色體次縊痕增加或減少，9號染色體臂間到位，大Y和小Y染色質變異等。異染色質的變異有可能影響生殖細胞減數分裂時的染色體配對聯合，甚至影響配子的形成，或者因為位置效應，使一些與生殖相關的基因沉默，從而引起生殖異常。目前染色體多態性與臨床效應間的關聯仍存在爭議[9]。本研究檢出新生兒染色體多態性54例，追蹤其父母外周血染色體檢測結果，其中42例為父母一方攜帶有相同的染色體多態性，考慮為遺傳效應，表型無異常，建議隨訪這些染色體多態性新生兒長大后的生殖功能情況。男性染色體大Y是由于異染色質中的DNA過多重復造成，可能會導致女方流產、胚胎停育及死胎等不良妊娠結局。本研究共檢出9號染色體臂間倒位28例，檢出率為1.92%，高于何琳琳等[10]報告的0.9%。9號染色體臂間倒位的遺傳效應主要取決于重復或缺失片段的長短及其所含基因的致死效應，其倒位片段越短，配子和合子正常發育的可能性就越小，因此發生流產及死產的概率就越高。傳統的觀點認為，染色體多態性是屬于正常的變異，但越來越多的研究表明染色體多態性與不良的生殖功能相關[11]。

3.4 染色體平衡易位 染色體平衡易位指兩條染色體發生斷裂后相互交換，僅是位置改變，而無遺傳物質的增加或減少。人群中平衡易位的發生率為0.167%～0.2%[12]，平衡易位攜帶者智力、發育通常正常。本研究中檢出染色體平衡易位的新生兒5例，表型均正常。染色體平衡易位者在生育年齡形成的配子中，僅有1/18為正常配子，1/18為不平衡配子但表型正常，16/18為不平衡配子，均有重復和缺失。而不平衡配子與正常配子結合后，常可導致不良妊娠結局，如流產、胚胎停育、出生缺陷或染色體異常，且男性的易位染色體可干擾正常染色體在減數分裂中的配對或分離，產生雜合體，臨床表現為嚴重的生精阻滯即無精癥[13]，往往需要行胚胎植入前遺傳學診斷助孕。

綜上所述，妊娠期未行產前診斷的高危孕婦的染色體異常檢出率較高，應對其娩出的新生兒行臍血染色體核型分析，以及時發現異常染色體患兒，早期干預和治療染色體異常引起的疾病，提高人口素質。