復方五花顆粒制備工藝的優化

周光姣， 黃 翔， 馮學花

（1.安徽中醫藥科學院亳州中醫藥研究所，安徽 亳州236800；2.亳州職業技術學院，安徽 亳州236800；3.安徽中醫藥大學，安徽 合肥230031；4.新華學院，安徽 合肥230031）

復方五花顆粒由葛花、菊花、槐花、白扁豆花、金銀花5 味藥材組成，是在中藥成方制劑第十冊（WS-3B-1962-95） 中金菊五花茶顆粒基礎上加減而成的中醫臨床經驗方［1］，具有清熱化濕、解酒醒脾、降血脂之功效［1-3］，臨床上用于高血脂、醒酒，效果顯著。但原方金菊五花茶顆粒以湯劑形式服用，存在給藥劑量大、口感差等缺點，故本實驗采用現代提取和制粒技術將其制成顆粒劑——復方五花顆粒，并采用響應面法優化其制備工藝，為后期相關新藥開發提供參考。

1 材料

1.1 儀器 UV752PC 紫外可見分光光度計（上海奧析科學儀器有限公司）；FA2204 電子天平（常州市幸運電子設備有限公司）；YK-60 搖擺式制粒機、RXH-5-C 熱風循環烘干箱（上海天祥藥械制造廠）。

1.2 試藥 金銀花、菊花、槐花、葛花、白扁豆花購自亳州三義堂中藥飲片有限責任公司，經亳州職業技術學院劉耀武教授鑒定均為正品。可溶性淀粉（天津市科密歐化學試劑有限公司）；甘露醇、糊精（安徽淮南山河藥業有限公司）；乳糖（南京高溯生物科技有限公司）；阿司帕坦（山東西亞化學股份有限公司）。

2 方法與結果

2.1 制粒方法篩選 預實驗選擇濕法、干法、流化制粒來制備顆粒，發現由于五花干膏易吸潮，遇水黏性大，故干法制粒不易控制和操作；流化制粒易出現“坐鍋” 現象，成型性不理想，制粒參數亦不易控制，故確定采用濕法制粒。

2.2 五花稠浸膏制備 按前期優選出的最佳提取工藝，煎煮法提取后合并濾液，濃縮至相對密度為1.32 ～1.33 的稠浸膏，即得。

2.3 輔料篩選

2.3.1 稀釋劑2.3.1.1 成型性 將顆粒依次過1、5 號篩，收集能過1號篩而不能過5 號篩者，稱定質量，計算成型率，公式為成型率=過篩后顆粒質量／過篩前顆粒質量×100%。

2.3.1.2 吸濕率［4-5］將顆粒放入盛有干燥劑的干燥器內至恒重，再將提前配制好的氯化鈉過飽和溶液（250 mL）倒入玻璃干燥器的底部至恒溫，此時相對濕度為75%。精密稱取恒重過的顆粒3 g，均勻放入恒重的稱量瓶中，打開稱量瓶蓋，置于25 ℃恒溫培養箱中保存，在3、12、24、36、48、96 h 稱定質量，計算吸濕率，公式為吸濕率=［（吸濕后質量-吸濕前質量） ／吸濕前質量］ ×100%，結果見表1。由表可知，放置36 h 后吸濕率變化不大，基本平穩，故選擇36 h 吸濕率。

表1 顆粒吸濕率測定結果（%）

2.3.1.3 流動性［6］采用休止角衡量，采用漏斗法測定。將3 只漏斗串聯，并固定在水平放置的坐標紙上面1 cm處，將顆粒緩慢沿邊緣倒入最上方漏斗，直到顆粒錐體頂端接觸漏斗口為止，觀察坐標紙上顆粒圓錐體有最大高度h 時圓錐半徑r，計算休止角α，公式為tgα=h／r。

2.3.1.4 溶化性 取顆粒10 g，加200 mL 熱水攪拌5 min，立即觀察溶化結果。

2.3.1.5 綜合分析 表2 顯示，甘露醇、乳糖制粒效果較好，其中前者所制顆粒成型率最高，后者吸濕率最低，故選擇兩者作為混合稀釋劑。

表2 稀釋劑考察結果（n=3）

2.3.2 矯味劑 由于五花浸膏味苦并有一定澀感，直接制成顆粒時口感欠佳，故需加入矯味劑以提高口感。考慮到肥胖人群和糖尿病患者，選擇阿司帕坦作為矯味劑［7］，然后以20 名健康受試者人工評價為標準，進行口感評分，見表3。

表3 口感評分標準

2.4 響應面法優化 在單因素試驗基礎上，選擇混合稀釋劑與稠浸膏比例（A）、乳糖與甘露醇比例（B）、矯味劑用量（C） 作為影響因素，成型率、吸濕率、休止角、口感分值作為評價指標。因素水平見表4。

表4 因素水平

然后，計算綜合評分，公式為綜合評分=成型率×30／最大成型率+最小吸濕率×50／吸濕率+最小休止角×10／休止角+口感分值×10／最大口感分值［8-9］，以其為響應值（Y），通過Design-Expert8.0.5b 軟件進行擬合，所得二次多元回歸方程為Y=98.84+0.41A-0.36B-0.54C+1.03AB+0.50AC-0.025BC-4.81A2-3.69B2-6.27C2，結果見表5，方差分析見表6。由表5 可知，因素A、C、AC、A2、B2、C2具有顯著影響（P＜0.05），各因素影響程度依次為C＞A＞B；由表6 可知，回歸模型P＜0.000 1，表明該模型具有顯著性，同時R2=0.984 1，失擬項P＞0.05，表明擬合度良好，可用于預測分析。

再通過Design-Expert8.0.5b 軟件進行響應面分析，見圖1。由此確定，最優工藝為混合稀釋劑與稠浸膏比例4.03 ∶1，乳糖與甘露醇比例1.48 ∶2，矯味劑用量0.25%，綜合評分97.076 4，考慮到操作方便，最終將其修正為混合稀釋劑與稠浸膏比例4 ∶1，乳糖與甘露醇比例1.5 ∶2，矯味劑用量0.25%。

2.5 驗證試驗 取相對密度1.32（25 ℃） 的五花稠浸膏3 批 （批號20181601、20181602、20181603），按 “2.4”項下優化工藝進行驗證試驗，結果見表7，可知工藝合理可行。

表5 試驗設計及結果

表6 方差分析

表7 驗證試驗結果（n=3）

圖1 各因素響應面圖

3 討論

3.1 稠浸膏相對密度選擇 稠浸膏相對密度過小，會缺乏黏性，而且制粒輔料比例和使用劑量增加；相對密度過大，黏度過大，不易測定。因此，將其控制在1.32～1.33 范圍內較適宜。

3.2 輔料選擇 復方五花顆粒是可溶性顆粒，故在考察稀釋劑時選擇有較好溶解度的糖粉、甘露醇、乳糖、可溶性淀粉等，但糖粉應用有較大限制，不適合肥胖人群和糖尿病患者，故將其排除，最終確定乳糖-甘露醇混合物。另外，由于組成藥材有一定苦澀味，故選擇阿司帕坦作為矯味劑，它為新型甜味劑甜度較高，但體內代謝產物不會引起機體血糖變化，適合肥胖人群和糖尿病患者。

3.3 評價指標選擇 建立顆粒質量評價指標時，由于單因素試驗優選的甘露醇和乳糖均為易溶輔料，而且在不同配比下均能全部溶化，故其溶化性不存在問題，未納入評價指標中。

3.4 優化方法選擇 響應面法是結合試驗設計與統計學分析的方法，優化工藝參數有效可靠，回歸方程精確，相比較傳統的正交試驗更有利于找出區域內各因素最佳組合和響應值。因此，本實驗將單因素試驗與該方法相結合，可使試驗設計更科學合理［10-11］。