厚樸及其不同炮制品中揮發性成分GC-MS 分析

袁金鳳， 喬藝涵， 彭詩濤， 劉 娜， 王靖越， 柴沖沖， 李 飛

（北京中醫藥大學中藥學院，北京102488）

厚樸為木蘭科植物厚樸Magnolia officinalis Rehd.et Wils.或凹葉厚樸Magnolia officinalis Rehd.et Wils.Var.biloba Rehd.et Wils.的干燥干皮、枝皮及根皮，具有燥濕消痰、下氣除滿的功效，常用于濕滯傷中、脘腹吐瀉、食積氣滯、腹脹便秘、痰飲喘咳等［1］。宋代《本草衍義》 記載“厚樸不以姜制，則棘人舌喉”［2］，厚樸生品辛辣峻烈，對咽喉有強烈的刺激性，炮制后不僅能降低刺激性，還能增強寬中和胃的作用［3-4］，故臨床多用其炮制品。厚樸炮制方法多樣，以姜制法為主，2015 版《中國藥典》 及各省市炮制規范中收載的厚樸炮制方法主要有姜炙法、姜煮法、姜浸法等［5-7］。

厚樸的主要化學成分為酚類、揮發油、生物堿等，其中揮發油含有量約1%，有報道揮發油成分具有殺菌、鎮靜、驅風健胃等藥理作用［8-10］，現有姜煮厚樸、姜炙厚樸炮制前后揮發性成分變化的相關研究［11-14］，但結果有所不同，且未見姜浸、姜炙、姜煮不同炮制方法同時進行比較研究的報道，因此探討不同炮制方法對厚樸揮發性成分的影響。本研究采用GC-MS 法對厚樸生品及不同炮制品中的揮發性成分進行分析，探尋不同炮制方法及輔料姜對厚樸揮發性成分的影響。

1 材料

1.1 儀器 Agilent 7890B／5977A-GC／MSD 型氣相色譜-質譜聯用儀（美國Agilent 公司）；PL2002 電子天平 （梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；ZDHW 型電熱套（北京中興偉業儀器有限公司）。

1.2 試藥 厚樸生品（四川，批號E20170701）由湖北金貴中藥飲片有限公司提供，經北京中醫藥大學中藥學院楊瑤珺教授鑒定為木蘭科植物厚樸Magnolia officinalis Rehd.et Wils.的干燥干皮。生姜購自市場。乙酸乙酯、無水硫酸鈉等均為國產分析純。

2 方法與結果

2.1 樣品制備

2.1.1 生姜 洗凈表面泥土，切成小塊，備用。

2.1.2 生品 取厚樸飲片，凈制備用。

2.1.3 姜汁 按2015 版《中國藥典》 四部炮制通則制備，將生姜洗凈，搗爛，加水適量，壓榨取汁，姜渣再加水適量重復壓榨1 次，合并汁液，即為姜汁。姜汁與生姜的比例為1 ∶1。

2.1.4 姜炙品［1］將厚樸飲片與姜汁拌勻悶潤，悶潤至姜汁吸盡，置于鍋內，文火炒干，取出，放涼，備用。每100 kg 厚樸用生姜10 kg。

2.1.5 姜浸品［6］取厚樸飲片，用姜汁拌勻，悶潤至姜汁吸盡，烘干（不超過60 ℃）。每100 kg厚樸用生姜10 kg。

2.1.6 姜煮品［7］取厚樸飲片與姜汁拌勻，煮至姜汁被吸盡，烘干（不超過60 ℃）。每100 kg 厚樸用生姜10 kg。

2.1.7 清水煮品 按“2.1.6” 項下炮制方法制備等量清水代替姜汁。

2.2 供試品溶液制備 按2015 版《中國藥典》四部附錄揮發油測定法甲法提取揮發油，稱取生姜、厚樸及其炮制品粗粉（過2 號篩） 100 g，置燒瓶中，加7 倍量水浸泡過夜，加熱并保持微沸狀態，以水蒸氣蒸餾法提取8 h，至揮發油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開啟測定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達刻度0 線上面5 mm 處為止，放置1 h 以上，再開啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度0 線平齊，讀取揮發油量，并計算供試品中揮發油含有量，收集各樣品揮發油以適量乙酸乙酯溶解，無水硫酸鈉脫水后備用。輔料姜、厚樸生品、姜浸品、姜炙品、姜煮品、清水煮品的揮發油得率分別為 0.42%、 0.30%、0.34%、0.24%、0.22%、0.20%。

2.3 氣相色譜-質譜條件

2.3.1 色譜條件 HP-5MS 毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；進樣量1 μL；進樣口溫度250 ℃，傳輸線溫度280 ℃，初始溫度60 ℃保持2 min，以8 ℃／min 上升至280 ℃保持10 min；恒流模式；分流比20 ∶1；載氣為高純氦氣，體積流量1 mL／min。

2.3.2 質譜條件 EI 電離源；電子能量70 eV；離子源溫度200 ℃；掃描質量范圍m／z 33～450。

2.4 GC-MS 分析 采用GC-MS 法分析輔料生姜、厚樸生品及其炮制品的揮發油，得其總離子流色譜圖，見圖1。所得各組分峰的質譜數據通過計算機數據系統NIST 數據庫檢索對照，根據相似度，確定了輔料生姜、厚樸生品及炮制品中揮發油的主要化學成分，按峰面積歸一化法計算各化合物在揮發油中的相對百分含有量，將其進行分析比較。生姜中鑒別出47 種成分，鑒于生姜中成分較多，本研究只對厚樸生品及其炮制品進行了比較，見表1。

圖1 各樣品GC-MS 總離子流圖Fig.1 GC-MS total ion current chromatograms of various samples

表1 揮發性成分GC-MS 分析（%）Tab.1 GC-MS analysis of volatile oil constituents（%）

3 討論

厚樸經炮制后揮發油含有量均有變化，不同炮制品揮發油含有量由高到低依次為姜浸品＞生品＞姜炙品＞姜煮品，姜炙、姜煮后揮發油含有量降低，姜浸品揮發油含有量升高，表明揮發油總量與不同的加熱方式有關。表1 表明，生品、姜浸品、姜炙品、姜煮品、清水煮品揮發油提取物經GCMS 分析檢測出30、30、27、26、22 種成分，分別鑒定出28、28、24、25、20 個化合物，占揮發油總量的95.21%～97.99%。厚樸生品及其各炮制品揮發油中鑒別出20 種共有成分，共有成分占揮發油總量的90.09%～96.87%，其中β-桉葉醇含有量最高，相對含有量較高的成分還有γ-桉葉油醇、石竹烯氧化物、石竹烯、δ-杜松烯等。

對厚樸不同的姜制品進行分析，姜浸品與生品相比，消失了1 種成分，新增了1 種成分，兩者共有成分29 種；姜炙品與生品相比，消失了4 種成分，新增了1 種成分，兩者共有成分26 種；姜煮品與生品相比，消失了5 種成分，新增了1 種成分，兩者共有成分25 種；其中姜炙品、姜煮品中長葉蒎烯、丁香烯醇、6，8-五烯-17-酮3 種成分均消失，而姜浸品中未消失；姜浸品與姜煮品中2-己酰基呋喃消失，而姜炙品中未消失；表明不同的炮制方法對厚樸揮發性成分的總量及化學組成有影響。

本實驗以清水煮品為對照，探討水煮過程及姜汁煮過程中輔料姜對厚樸揮發性成分的影響，同時也對生姜中所含揮發性成分進行GC-MS 分析，綜合分析輔料生姜對厚樸揮發性成分含有量的影響。結果清水煮品與生品相比消失了8 種成分，無新增成分，水煮過程會對厚樸揮發性成分產生影響；姜煮品與清水煮品相比新增了5 種成分，其中1，3，3-三甲基三環［2.2.1.02，6］ 庚烷、龍腦、香葉醇，在生姜中均被檢出，表明輔料生姜的代入對厚樸揮發性成分有一定的影響。

綜上所述，不同的炮制方法及輔料生姜對厚樸揮發性成分的總量及化學組成有影響，以往的研究多集中在厚樸炮制前后的酚類成分的變化上［15-18］。本研究對厚樸不同炮制品的揮發性成分進行比較，以期為厚樸的炮制工藝提供依據，且不同炮制品在藥效方面是否有差異，有待于進一步研究。