國內豬場豬偽狂犬病疫苗的免疫現狀、存在問題及免疫策略

王懷禹

（南充職業技術學院，四川 南充 637131）

理論分析

豬偽狂犬病（PR）是偽狂犬病病毒（PRV）引起的高度接觸性和急性傳染病。PRV是豬偽狂犬病的病原，具有嗜神經性，它感染豬群以后將使母豬產生繁殖障礙，導致母豬流產、產死胎，新生仔豬產生腹瀉和神經癥狀，尤其是小豬的致死率非常高；公豬的睪丸腫脹、萎縮，成年豬感染后雖不易死亡，但可長期帶毒。該病毒自1902年被匈牙利學者Aueszky發現以來，給世界范圍內的養豬業造成了巨大的經濟損失。迄今為止，該病毒已經出現了100多年，但在很多養豬國家仍然無法得到有效根除。1947年，我國獸醫行業的先驅劉永純先生率先從貓體內分離到該病毒，首次在貓上發現PRV感染的案例，確認了該病在我國的存在。1956年，周圣文首次發現國內哺乳仔豬被PRV感染。此后PRV給我國養豬業造成了巨大損失，尤其是2011年以來，偽狂犬病毒變異株的出現和廣泛流行，嚴重制約了生豬產業的健康發展。

表1 不同商用豬偽狂犬疫苗優缺點對比

1 豬偽狂犬疫苗應用概況

目前，國內外商用的豬偽狂犬疫苗大致可分為以下3類（見表1）：一是將分離的野毒或強毒經甲醛滅活后，加佐劑乳化制成油乳劑滅活疫苗；二是將分離的野毒或強毒經非豬源細胞或者雞胚反復傳代致弱后研制的弱毒疫苗；三是利用基因工程技術構建的基因缺失疫苗。3類疫苗各有其優缺點，它們在豬偽狂犬病的防控方面起著非常重要的作用。根據調研數據，我國大規模豬場豬偽狂犬疫苗品牌使用比較集中，進口品牌約占40%，前十大品牌使用率高達92%，其中，Bartha-K61株疫苗（缺失gE/gI）是一個非常安全的疫苗，在世界上應用最為廣泛，使用比例達80%以上。此外，一些基因工程疫苗例如核酸疫苗、亞單位疫苗及重組疫苗尚在研究之中。

2 豬偽狂犬疫苗免疫現狀

在20世紀90年代，我國從匈牙利引進PRV的經典弱毒苗Bartha-K61株，該疫苗毒力弱，免疫效果好，經過大量生產并廣泛應用到各大豬場后，豬偽狂犬病在我國流行的狀況得到了有效控制，參照國外尤其是美國對豬PRV的凈化方法，許多豬場完成了對該病原的凈化。但在2011年，豬偽狂犬病在經過Bartha-K61株免疫過的豬場暴發，并從華北開始蔓延至全國，主要表現為母豬流產死胎、仔豬死亡率高；分離出的PRV流行毒株再次發生了變異，新產生的毒株與經典PRV弱毒苗Bartha-K61分別屬于不同的亞群，使現有的疫苗接種后無法產生足夠有效地保護作用，導致PRV在國內再次流行，許多豬場和地區的PRV凈化工作毀于一旦。

一直以來，人們通常使用優質PRV-gE基因缺失疫苗對豬實施強化免疫，這在豬偽狂犬病的防控上功不可沒，免疫的同時結合PRV-gE抗原和PRV-gE抗體檢測，實施淘汰和凈化被野毒感染的豬只，成為控制和凈化豬偽狂犬病的重要途徑。通過對近5年國內相當部分規模化豬場PRV-gE抗體檢測分析，發現國內目前對豬偽狂犬病的凈化效果還不盡人意。陳文雄[1]檢測分析了2013—2014年華南地區99個豬場臨床樣品（腦、扁桃體、淋巴結和胎衣），PRV平均陽性率為29.3%，表明偽狂犬病毒在華南地區豬群中廣泛流行，感染率較高。王慧等[2]檢測分析了湖南省2013—2017年14個規模化豬場血清樣品，PRV-gE抗體平均陽性率為32.8%。張躍等[3]PRV-gE抗體檢測發現，場（戶）陽性率高達84.08%，樣品平均陽性率高達53.36%；陽性率在不同階段豬群的變化趨勢為：經產母豬（58.28%）＞育成豬（57.55%）＞育肥豬（54.49%）＞后備母豬（37.46%）；另外在散養戶的樣品陽性率（66.42%）大于規模豬場的陽性率（47.71%），可能由于多數散養戶免疫意識淡薄，不注意引種場的疫病凈化程度，引進種豬時不實施檢疫，免疫程序不科學規范，生物安全措施和管理不到位。研究結果表明，北京市PRV野毒感染面廣且較為嚴重。鄭藝杰[4]對福建龍海市10個規模化豬場偽狂犬病進行血清學檢測與評價，10個豬場均接種了PRV-gE基因缺失疫苗，但仍然在不同階段群豬群檢測出程度不同的陽性率，gE抗體平均陽性率變化趨勢為：種公豬（41.96%）＞肥育豬（40.5%）＞生產母豬（37.0%）＞后備母豬（32.28%），gE抗體平均陽性率均在30%以上，表明這些豬場仍存在較高的PRV野毒感染率，尤其是種公豬和肥育豬帶毒現象較為嚴重，表明在養豬生產中存在免疫盲區。康篤利[5]檢測了2015—2017年河南等18個省（市）規模化豬場的9 447份血清樣品，結果表明，在檢測的5 699份樣品中，PRV-gE抗體總陽性率為60.33%，表明國內豬場豬群感染PRV野毒的情況十分普遍且呈逐年增高趨勢；研究還發現2017年PRV的野毒感染在河南等7個養豬大省達到了一個相當高的程度，從一個側面反映了我國PRV感染的嚴重性。李海琴等[6]通過對江西32個規模化豬場1 820份血清樣品進行檢測后發現，該地區豬場PRV野毒感染率較高，豬場PRV-gE抗體總陽性率和場陽性率分別到達37.4%和65.6%。

3 豬偽狂犬病疫苗免疫存在的問題

從前面的分析可以看出，國內大中型豬場基本上都實施了豬偽狂犬疫苗強化免疫，這在一定程度上阻止了我國豬偽狂犬病的大面積流行。但從免疫現狀及效果來看，在免疫意識、免疫程序及劑量、疫苗選擇、免疫覆蓋面等方面仍然存在一些不容忽視的問題，導致很多豬場豬偽狂犬病凈化不徹底，老病新發現象仍然很普遍，野毒抗體陽性率多在30%以上，嚴重制約了養豬產業的可持續發展。

3.1 疫苗選擇存在誤區

目前，商用豬偽狂犬疫苗品種較多，往往讓養豬人難以選擇。存在的誤區主要有：一是認為疫苗抗原含量越高越好。安全有效的疫苗中抗原含量始終處于一個合理區間，并非抗原含量越高越好。相反，抗原劑量過高易導致免疫耐受反應致免疫失敗。二是認為基因缺失越多的疫苗免疫效果越好。疫苗的免疫原性與其抗原性相關，而基因缺失太多的疫苗易減弱制苗毒株的抗原性，免疫效果自然大打折扣。三是認為疫苗聯合免疫效果好。不可否認，聯合免疫是未來疫苗免疫發展的趨勢，但目前聯合免疫技術并不成熟，還有待于進一步研究和驗證。四是認為弱毒疫苗之間混用效果好。不同基因缺失的弱毒疫苗混用，會給PRV的檢測診斷帶來困難。

3.2 免疫程序不合理

一是存在免疫盲區。對于一點式生產的豬場，如果免疫覆蓋不全面，存在免疫盲區，如只重視種母豬或仔豬的免疫，忽視對肥育豬的免疫，都是不正確的做法，將會導致PRV在未免疫豬群中潛伏。二是免疫間隔時間過長。如同一頭母豬同一種疫苗免疫時間間隔過長，不僅浪費了疫苗效果，而且非常容易導致野毒入侵和擴散。三是仔豬免疫中存在的問題。母豬的免疫狀況直接影響到仔豬的免疫時間和次數。研究資料表明，國外母豬在正常的飼喂和衛生條件下，對其實施規范免疫后，一般其仔豬體內的母源抗體可持續8～14周，而國內豬場仔豬母源抗體的持續時間可能達不到這個時間長度，這與豬場相對粗放的生產管理方式，較低的飼喂水平，不盡如人意的生物安全措施以及免疫程序等有關。四是許多豬場不加檢測分析便實施全群統一接種。由于部分豬存在抗體干擾和免疫抑制，加之場內可能存在帶毒豬和處于亞健康狀態的豬，因此，省去免疫前的PRV-gE抗體檢測而盲目實施全群免疫，這種做法風險極大，其后果就是導致免疫失敗，給豬場造成經濟損失。

3.3 免疫劑量不足或劑量過大

部分豬場在免疫接種劑量上存在誤區：一是習慣于減輕仔豬初次接種量。認為豬免疫劑量與其月齡成正相關，事實上仔豬免疫系統未完全建立，若需免疫系統產生有效的免疫反應和免疫保護則疫苗抗原劑量必須滿足要求。此外，很多廠家生產的PRV疫苗質量參差不齊，也是導致免疫效果不佳的原因之一。有研究指出，肉豬使用國產PRV-gE缺失苗基本無效。二是很多豬場喜歡一味地加大疫苗免疫劑量。疫苗抗體產生量并不與疫苗免疫劑量成正比，也就是說疫苗免疫劑量只要達到合理值即可，因為其抗體的產生量很有限，若再增加劑量，反而還會引起免疫副作用，而且還會增加使用成本。正確的做法是按照疫苗生產廠家推薦劑量使用。

4 豬偽狂犬病疫苗免疫面臨的挑戰

從防疫的視角看，豬偽狂犬病免疫面臨的最大挑戰是現有疫苗不能對PRV變異毒株提供完全保護。從豬偽狂犬病的免疫現狀看，近幾年，許多規模化豬場盡管使用基因缺失活疫苗進行了免疫，但仍然出現豬偽狂犬病流行的現象，并從不同地區發病死亡的仔豬組織中分離到多株豬偽狂犬病毒，如HeN1株、JS-2012株、TJ株、ZJ01株等。陳文雄[1]近年在華南地區豬場的病料樣品中成功分離到6株PRV（命名為YC、ST、FL、BE、SY和YQ），分離毒株之間gE基因氨基酸同源性為98.1%～99.8%。6株病毒位于同一分支，表明分離株之間的進化關系較近，與我國當前流行的PRV變異株HeN1、HN1201以及HJL8形成獨立分支，與國外經典毒株Becker株、Kaplan株等遺傳關系相對較遠。相較早期的PRV毒株，新分離毒株在第47位和496位有1個aa插入。對YC分離株進行致病力進行分析，發現其感染仔豬后出現典型PRV癥狀，致病性較強。

目前我國PRV存在Ⅰ型和Ⅱ型2個基因型，臨床分離出來的多為Ⅱ型，而市場上主流的Bartha-K61株疫苗主要針對的是Ⅰ型病毒，造成其對變異后的病毒保護力不足。研究表明，Bartha-K61株對變異前毒株攻擊可提供100%的保護，但對變異后毒株的供給只能提供50%的保護。研究表明，豬偽狂犬病毒新分離毒株存在變異現象且變異株的致病性有所增強，現有的PRV-gE基因缺失疫苗難以為新的流行毒株提供安全有效地保護，導致無法有效阻止PRV在豬群之間乃至地區之間的傳播循環，這很有可能是偽狂犬野毒感染率居高不下的一個重要原因。可見，豬場的豬偽狂犬病疫苗免疫不是一勞永逸的，為PRV感染豬接種疫苗也只能緩解臨床癥狀和減少排毒，對于那些潛伏感染帶毒豬發生的不定期間歇性排毒卻是不可避免的，因而控制和凈化豬偽狂犬病的最大障礙是豬場長期存在被PRV感染的帶毒豬。

5 豬偽狂犬病疫苗的免疫策略

國家對豬偽狂犬病的控制和凈化是有目標規劃的，要求到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬病要達到凈化標準，面對新近國內豬場豬偽狂犬病流行的嚴峻態勢，做好基礎免疫，防控和凈化豬偽狂犬病已刻不容緩。除做好生物防控外，疫苗免疫接種仍是預防和控制豬偽狂犬病的有效措施。一是豬場應當選擇與場內流行或者區域內流行的毒株作為PRV疫苗株，制定科學合理的免疫程序，定期開展PRV-gB和PRV-gE抗體監測及風險評估，得到原始的基礎數據資料，準確分析豬場的免疫現狀，科學制定免疫方案，把控好每一個免疫環節，選擇質量優質的疫苗，提升中和抗體水平，提高免疫效果。二是加強飼料質量管控，防止豬重金屬、抗生素等藥物殘留導致的疫苗免疫效果不佳。三是做好豬場其他重大動物疫病的監測與檢測工作，防止豬藍耳病等疫病單一或協同感染造成豬的免疫抑制，甚至免疫失敗。四是加強種豬的免疫強化，及時對種公豬和后備母豬進行PRV-gE抗體篩查，對被感染的陽性種豬要實行淘汰制度，以保障新生仔豬的品質。

隨著養豬規模化進程的加速進行，在環保高壓態勢下，豬偽狂犬病免疫在中大規模養豬場的免疫比例會進一步提高，特別是散戶、專業大戶和小規模養殖戶豬偽狂犬病免疫比例將會有一個明顯的提升，這將會加快豬偽狂犬疫苗的研制步伐，加速國內養豬場豬偽狂犬病的凈化進程。