疾控中心微生物實驗室質量控制影響因素及解決對策

陳世坤 許穎穎

疾控中心微生物檢驗在傳染性疾病的預防、分析、診療過程中發揮著重要作用，其涉及到分子生物學、微生物學、細胞學等多門學科[1-2]，在面對重大傳染性疾病時，一份及時準確的微生物檢驗報告是遏制事態進展，挽救患者生命的關鍵前提。隨著微生物檢驗技術的不斷進步，各類先進的檢驗儀器和技術在疾控中心實驗室中得到了應用，但微生物檢驗除了要具備必要的儀器設備和技術外，送檢標本質量、檢驗人員操作技術和環境因素也是關鍵因素[3-4]，由于病原微生物檢驗程序十分復雜，容易出現較多的失誤環節，從而可能對檢驗結果的可靠性和準確性造成影響，耽誤患者搶救時機，而微生物實驗室檢驗結果與實驗室質量控制有密切關聯，對檢驗過程中影響到實驗室質量控制的因素進行分析，并采取必要的對應措施減少質量問題，提高檢驗結果的準確性是目前疾控中心研究的重要問題。本次研究以上述問題為論點，采取回顧性分析法對本疾控中心實驗室2016年9月—2018年12月580份微生物標本檢驗結果進行探討，并統計質量問題的影響因素和強化質控前后的質量問題發生率，希望能為實驗室檢驗工作提供參考。

1 對象與方法

1.1 分組對象

回顧性分析本疾控中心實驗室2016年9月—2018年12月檢驗的580份微生物標本，2017年11月本疾控中心采取微生物標本檢驗質量強化控制措施，按照時間分為控制前（2016年9月—2017年10月）和控制后（2017年11月—2018年12月）各290份標本，控制前包括43份消毒餐飲具標本、52份公共衛生用品用具標本、54份空氣標本、79份一次性消毒衛生用品標本、62份飲用水標本；控制后包括45份消毒餐飲具標本、51份公共衛生用品用具標本、55份空氣標本、78份一次性消毒衛生用品標本、61份飲用水標本。

1.2 質量管理方法

微生物標本檢驗均由工作3～15年的4名實驗室工作人員負責，室內劃分有標本儲存區、標本置備區，檢驗項目包括霉菌、大腸桿菌、沙門氏菌、溶血性鏈球菌、抗體檢測等。觀察實驗室檢驗過程中出現的質量問題，并探討其影響因素。2016年9月—2017年10月采取常規質量管理，包括：（1）做好無菌操作。采血時必須遵循一人一針一管的操作標準，操作結束后需及時洗手，毛巾專人專用，每日消毒避免交叉感染，檢驗結束后及時清洗容器和器材，干燥滅菌后放回原處，存在傳染風險的標本，需經滅菌處理后方能廢棄。每日打掃地面，以消毒劑擦拭地板和臺面，保持室內整潔。（2）標本分區制備檢驗。一律憑單采集標本，做好科室、床號、姓名、性別、檢驗項目的核對工作，將實驗室分為緩沖間、操作間、無菌間三個區域，緩沖間負責培養基配制和試劑儲藏，禁止將細菌檢驗標本帶入。操作間需與其他區域區分開來，人員進入時需更換防護衣和防護鞋，運送標本的人員嚴禁進入操作間。無菌間負責保存不同的標本，并在安全柜中做好標識。（3）控制好檢驗時間。加入促凝劑的標本需在采血后5～15 min盡早處理，加入抗凝劑的標本則可立即離心，從標本收集開始，在2 h內需分離血清和血漿，盡可能縮短采集到分離血清和血漿的時間，標本制備完成后需轉入2～8℃的冰箱保存，所有標本均在48 h完成檢驗。（4）按標準流程處理廢棄物。按照損傷性廢棄物、化學性廢棄物、感染性廢棄物的標準對廢棄物進行分類放置，由專人登記收集，按照規定的路線和時間送至醫療廢棄物貯存房，移交給醫療垃圾處理人員回收處理。

2017年11月—2018年12月針對性實驗室微生物標本檢驗強化質量管控措施：（1）提高檢驗人員綜合素質。要求檢驗人員不斷提高操作技術，并掌握新的知識和技能，了解國家出臺的檢驗法規與標準，熟悉基礎醫學、微生物學理論知識并將其運用到檢驗過程中。實驗室多開展培訓活動，邀請工作經驗豐富的技術人員開展現場教學指導，保證每一位檢驗人員均能熟練掌握檢驗技能，同時加強質量控制意識教育，讓檢驗人員意識到工作的重要性，以嚴謹認真、富有責任心的態度開展工作，避免人為操作導致的檢驗誤差。（2）樣本和試劑的質量控制。對樣本采集時間、數量、方法、采集環境進行嚴格控制，要求樣本具有代表性，采集后進行低溫密封保存，及時送檢，避免樣本變質。同時需對試劑的種類、濃度、配置時間、失效日期做好標記，按照試劑存放要求避光保存或冷藏，檢驗前先進行陽性和陰性菌株對照檢驗[5]，符合質控標準后方能使用。（3）保持無菌環境。檢驗場地需遠離洗手間、垃圾桶等污染區域，并保持無菌室通風和采光條件，所用物品需能耐受每天的消毒和清洗，室內墻壁天花板不能留有縫隙和死角，操作間不得安裝下水道，在操作間和緩沖間配置樣本傳遞箱，緩沖間內需具備洗手盆、無菌衣物、毛巾等物品，禁止將無菌培養箱放在緩沖間。定期檢查無菌室內紫外線消毒燈輻射強度，若低于空氣消毒標準則立即更換[6]。工作人員必須在穿戴工作服的前提下才能進行檢驗操作，嚴格落實無菌操作標準。（4）儀器管理。檢驗前先對儀器進行鑒定，保證校準精確。不同儀器需打上不同的標識、操作規程、使用和維保記錄，定期維護高壓滅菌器、培養箱和冰箱等設備，保持顯微鏡和配套器皿的清潔度，生物安全柜、天平則需定期進行外觀清潔、防潮、防震處理[7]。

1.3 觀察方法

對比強化質量控制前后兩個時間段內的質量問題發生率和影響因素。質量問題包括菌落總數檢驗誤差率、總大腸菌群檢驗誤差率、霉菌檢驗誤差率。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0對數據進行統計分析，計數資料以“n（%）”表示，采用χ2檢驗，P≤0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 質量問題發生率

控制前共有52例標本檢驗過程中出現質量問題，控制后質量問題發生率（3.79%）低于控制前（17.94%），差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 微生物實驗室檢驗質量的影響因素

操作因素、樣本因素、環境因素、儀器因素、人員因素是導致微生物實驗室檢驗質量問題的主要因素，占比分別為19.05%、17.46%、19.05%、9.52%、34.92%；控制后各因素導致的質量問題均少于控制前，且操作因素、樣本因素、人員因素導致的質量問題對比差異有統計學意義（P＜0.05），環境、儀器因素導致的質量問題對比無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

3 討論

3.1 影響因素探討

本次研究結果顯示：控制前共有52例標本檢驗過程中出現質量問題；操作因素、樣本因素、環境因素、儀器因素、人員因素是導致微生物實驗室檢驗質量問題的主要因素，占比分別為19.05%、17.46%、19.05%、9.52%、34.92%。因素分析為：（1）操作因素和人員因素均與檢驗工作人員的專業水準、法律意識、責任心等綜合素養有關，若實驗室工作人員對質量管理的依從性差，則可能導致檢驗結果出現較大的誤差，對質量控制水平造成直接影響。（2）樣本因素。微生物樣本是檢驗的重要組成部分，樣本采集時間、方法、采集量、保存和運輸方法均會對其質量造成影響，且試劑質量也會對檢驗結果造成影響[8-9]。（3）環境和儀器因素。檢驗過程中溫濕度、空氣潔凈程度會導致環境污染，無法真正實現無菌檢測，且實驗室日常工作中對實驗環境的實時監控和管理不夠全面，導致檢驗結果失真[10]。而設備因素則是因設備老舊或不合格，無法滿足個別復雜的檢驗，或因檢驗操作期間設備故障、損壞導致操作時間延長[11-12]，從而對檢驗質量造成影響。

表1 質量控制前后微生物檢驗質量問題發生率對比[例（%）；n＝290]

表2 微生物檢驗質量影響因素統計和質量控制前后因素導致的質量問題對比[例（%）；n＝290]

3.2 處理結果

根據以上分析，本次研究于2017年11月—2018年12月根據影響因素采取針對性實驗室微生物標本檢驗強化質量管控措施，結果顯示控制后質量問題發生率（3.79%）低于控制前（17.94%），差異有統計學意義（P＜0.05）；控制后各因素導致的質量問題均少于控制前，且操作因素、樣本因素、人員因素導致的質量問題對比差異有統計學意義（P＜0.05）。說明強化質量管控能減少疾控中心微生物實驗室工作人員操作因素、樣本因素、人員因素對檢驗質量造成的影響，從而提高檢驗的準確性。

綜上所述，疾控中心微生物實驗室檢驗過程中容易受操作因素、樣本因素、環境因素等多種影響，導致質量問題，采取全方位、針對性的質量強化控制措施能有效減少質量問題，提高微生物標本檢驗的準確性。