凸尖杜鵑組培快繁體系的構(gòu)建

張信玲 李新藝 李娜 孔令芳

摘要：通過(guò)對(duì)凸尖杜鵑（Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.）實(shí)生苗的啟動(dòng)與增殖培養(yǎng)，探索適宜凸尖杜鵑的滅菌方法及其啟動(dòng)與增殖培養(yǎng)基配方，以建立凸尖杜鵑的組織培養(yǎng)體系。結(jié)果表明，兩種杜鵑用0.1%的HgCl2滅菌8 min真菌污染率較低，在此處理下凸尖杜鵑和泡泡葉杜鵑（Rhododendron edgeworthii Hook. f.）的真菌污染率分別為5%和10%;當(dāng)培養(yǎng)基中的吲哚丁酸（IBA）濃度為0.3 mg/L、玉米素（ZT）濃度為0.01 mg/L時(shí)，凸尖杜鵑實(shí)生苗的啟動(dòng)率最高，達(dá)到80%;當(dāng)噻苯隆（TDZ）的濃度為? ? 6 mg/L時(shí)，增殖倍數(shù)最高，達(dá)到5.32。

關(guān)鍵詞：凸尖杜鵑（Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.）;組織培養(yǎng);生長(zhǎng)素;細(xì)胞分裂素

中圖分類(lèi)號(hào)：S685.21;Q943.1? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2019）09-0124-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.09.030? ? ? ? ? ?開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Abstract： Through the initiating and proliferating culture of Rhododendron sinogrande seedling， the sterilization method and media components of initiating and proliferating culture suitable for R. sinogrande were explored to establish the tissue culture system of R. sinogrande. The results showed that， the fungus contamination rate of two kinds of Rhododendron were lower when they were sterilized for eight minutes under 0.1% HgCl2， and the fungus contamination rate for R. sinogrande and R. edgeworthii Hook. f. was 5% and 10%， respectively. The initiation rate of R. sinogrande seeding was the highest for 80%， when the concentration of IBA was 0.3 mg/L and the concentration of ZT was 0.01 mg/L in the medium; The multiple proliferation was the highest for 5.32， when the concentration of TDZ was 6 mg/L in the medium.

Key words： Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.; tissue culture; auxin; cytokinin

凸尖杜鵑（Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.）為常綠喬木，屬杜鵑花科杜鵑花屬，原產(chǎn)于云南西部和西北部、西藏東南部，生于海拔? ? 2 100～3 600 m的高山杜鵑林或針葉林中。該物種花型美麗，顏色鮮艷，具有很高的觀賞價(jià)值，在盆栽中的應(yīng)用性也很高。但是，由于它生長(zhǎng)于海拔較高的地方，且生長(zhǎng)環(huán)境特殊，同時(shí)受季節(jié)和母本材料等的限制，導(dǎo)致目前無(wú)法進(jìn)行大量的商品化生產(chǎn)。

杜鵑花屬于中國(guó)十大名花之一，深受廣大花卉愛(ài)好者的喜愛(ài)，但其栽培繁殖存在一定的問(wèn)題。杜鵑的繁殖方式主要是種子繁殖、扦插繁殖、壓條繁殖、嫁接繁殖等[1]。杜鵑花科植物的多數(shù)種在扦插繁殖過(guò)程中往往難以生根，并且由于多種因素的影響，杜鵑花科植物扦插即使生根，通常也難以成活[2]。再者，播種、扦插和嫁接等方法比較容易受季節(jié)和母株材料的影響，導(dǎo)致杜鵑繁殖系數(shù)降低，并且生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，不適宜進(jìn)行大規(guī)模的商業(yè)化生產(chǎn)[3]。

運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁育觀賞植物，具有繁殖系數(shù)高、繁殖速度快、不受季節(jié)影響、易于產(chǎn)業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)[4]。因?yàn)榻M織培養(yǎng)屬于無(wú)性繁殖，后代產(chǎn)生變異的可能性較低，同時(shí)，比起常規(guī)的扦插、嫁接、種子繁殖等方法，它的繁殖速度成倍增加，且繁殖率很高[5]。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)杜鵑花的研究主要集中在種子繁殖、扦插繁殖、壓條繁殖、嫁接繁殖以及植物分類(lèi)學(xué)研究等方面，而對(duì)其組培快繁體系建立的研究報(bào)道較少[6]。杜鵑資源的組織培養(yǎng)只在少數(shù)幾個(gè)種類(lèi)上進(jìn)行過(guò)研究[7，8]，而鮮見(jiàn)關(guān)于凸尖杜鵑的組織培養(yǎng)研究。為此，試驗(yàn)通過(guò)對(duì)凸尖杜鵑組織培養(yǎng)體系的構(gòu)建，以期為其商品化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。

1? 材料與方法

1.1? 材料

1.1.1? 研究對(duì)象? 以凸尖杜鵑為研究對(duì)象，播種后，待實(shí)生苗長(zhǎng)到1.0～1.5 cm時(shí)作為組織培養(yǎng)的外植體。

1.1.2? 試劑及儀器設(shè)備

1）試劑。1/4 MS培養(yǎng)基、玉米素（ZT）、吲哚丁酸（IBA）、噻苯?。═DZ）、NaOH溶液、0.1% HgCl2溶液、75%的乙醇、工業(yè)乙醇、無(wú)菌水。