側耳屬3個種菌種培養基配方優化

王慶武 唐麗娜 崔 曉 安秀榮

（山東省泰安市農業科學研究院，山東泰安271000）

平菇（Pleurotus osreatus）、杏鮑菇（Pleurotus eryngii）、秀珍菇（Pleurotus pulmonarius）[1]隸屬側耳屬（Pleurotusspp.），是目前我國栽培量較大、發展較快、分布較廣的一種食用菌菌類[2]，3個種的栽培較為廣泛，栽培面積逐年增加[3]。為了掌握側耳屬3個主要栽培種的母種及擴繁種適宜培養基配方及含水量，了解不同培養基上菌絲的生長發育特性[4]，筆者對其母種菌絲培養的適宜碳氮源和擴繁種配方及培養基含水量進行了相關研究，旨在為側耳屬3個種菌種擴繁提供技術依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株與培養基

供試菌株為泰安市農業科學研究院自主保藏菌株平菇99、秀珍菇2、杏鮑菇5。碳源試驗基礎培養基：蛋白胨0.2%，KH2PO40.1%，MgSO40.05%，瓊脂2%[1]。氮源試驗基礎培養基：葡萄糖2%，KH2PO40.1%，MgSO40.05%，瓊脂2%[1]。

擴繁種供試培養基配方見表1。

表1 供試擴繁種培養基配方 %%

1.2 試驗方法

1.2.1 適宜碳源試驗

在基礎培養基中分別加入2%的葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖、果糖、淀粉組成碳源供試培養基，制作9 cm平板培養基，接入1塊邊長4 mm的菌種塊，置于25～26℃恒溫培養箱中暗培養，每處理5次重復。

1.2.2 適宜氮源試驗

在基礎培養基中分別加入0.2%的蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、（NH4）2SO4、NH4NO3、麩皮組成氮源供試培養基，試驗方法同1.2.1。

1.2.3 適宜碳氮配比

在碳氮源試驗基礎上，獲得最佳碳氮源，采用L9（34）法進行正交試驗，試驗方法同1.2.1。因素水平見表3、表4、表5。

1.2.4 擴繁種培養基配方優化

以棉籽殼、玉米芯為主原料，組成10個配方，將培養料分別裝入850 mL塑料菌種瓶中，高壓滅菌后無菌條件下接入1塊邊長1.5 cm母種塊，置于25～26℃培養室中暗培養，每處理5次重復。

1.2.5 擴繁種培養基含水量優化

將優化得到的3個種最佳擴繁種配方培養基含水量分別設置為46%、48%、50%、52%、54%、56%、58%、60%、62%、64%、66%、68%、70%共13個處理，試驗方法同1.2.4。

1.2.6 菌落測量方法

采用“十”字交叉法測量菌落直徑，計算各處理菌絲日長速，分析各處理對菌絲生長的影響。

2 結果與分析

2.1 碳源試驗結果

不同碳源對側耳菌絲生長速度及生長勢的影響見表1。

由表1試驗結果可見，平菇菌絲在供試碳源培養基上菌絲生長速度由快到慢依次是果糖、蔗糖、淀粉、葡萄糖、麥芽糖、乳糖，除乳糖外菌絲長勢均好；秀珍菇在供試碳源培養基上菌絲生長速度由快到慢依次是果糖、淀粉、麥芽糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖，菌絲在蔗糖、麥芽糖、乳糖、果糖、淀粉培養基上長勢均好，葡萄糖次之；杏鮑菇菌絲在供試碳源培養基上菌絲生長速度由快到慢依次是淀粉、蔗糖、乳糖、麥芽糖、果糖、葡萄糖，除乳糖外菌絲長勢均好。

2.2 氮源試驗結果

不同氮源對側耳屬3個種菌絲生長速度及長勢的影響見表2。

由表2試驗結果可見，平菇菌絲在供試氮源培養基上菌絲生長速度由快到慢依次是酵母膏、（NH4）2SO4、牛肉膏、麩皮、蛋白胨、NH4NO3；菌絲長勢由好到差依次是蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、（NH4）2SO4、NH4NO3、麩皮。秀珍菇菌絲在供試氮源培養基上菌絲生長速度由快到慢依次是酵母膏、蛋白胨、麩皮、牛肉膏、（NH4）2SO4、NH4NO3；菌絲長勢由好到差依次是牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、NH4NO3、（NH4）2SO4、麩皮。杏鮑菇菌絲在供試氮源培養基上菌絲生長速度由快到慢依次是麩皮、牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、（NH4）2SO4、NH4NO3；菌絲長勢由好到差依 次 是 蛋 白 胨 、牛 肉 膏 、酵 母 膏 、（NH4）2SO4、NH4NO3、麩皮。

表1 不同碳源對供試側耳菌絲生長的影響

表2 不同氮源對供試側耳屬菌絲生長的影響

2.3 菌絲培養適宜碳氮配比試驗結果

由表6可以看出，4個單因子對平菇菌絲生長的影響順序為 A＞D＞B＞C，蔗糖影響最大，其次是牛肉膏、淀粉，酵母膏影響最小。極差分析結果表明，平菇菌絲生長的最佳碳、氮源配比為A1B1C2D2。

4個單因子對秀珍菇菌絲生長的影響順序為A＞C＞D＞B，淀粉影響最大，其次是酵母膏、蛋白胨，蔗糖影響最小。極差分析結果表明，秀珍菇菌絲生長的最佳碳、氮源配比為A1B2C3D2。

4個單因子對杏鮑菇菌絲生長的影響順序為A＞D＞C＞B，淀粉影響最大，其次是酵母膏、牛肉膏，蔗糖影響最小。極差分析結果表明，杏鮑菇菌絲生長的最佳碳、氮源配比為A3B3C2D3。

表3 平菇菌絲培養適宜碳氮比正交試驗因素水平%%

表4 秀珍菇菌絲培養適宜碳氮比正交試驗因素水平%%

表5 杏鮑菇菌絲培養適宜碳氮比正交試驗因素水平%%

2.4 擴繁種培養基配方優化結果

試驗結果見表7。

由表7可見，配方4平菇菌絲長速最快，達到7.9 mm/d，其次是配方5、配方6、配方7、配方8、配方9；配方1、配方2、配方3、配方4菌絲長勢最好，其他配方次之。配方5秀珍菇菌絲長速最快，達到5.2 mm/d，其次是配方6、配方7、配方8、配方10、配方9；配方1、配方2、配方3、配方4菌絲長勢最好，其他配方次之。配方5杏鮑菇菌絲長速最快，達到4.9 mm/d，其次是配方4、配方6、配方3、配方7、配方8；配方1、配方2、配方3、配方4、配方5、配方6菌絲長勢最好，其他配方次之。

表6 L9（34）正交試驗結果

表7 供試配方擴繁側耳屬菌種結果

圖1 不同含水量培養基擴繁菌種發菌比較

2.5 擴繁種培養基含水量優化結果

試驗結果見表8。

表8 擴繁種培養基不同含水量試驗結果

由表8可見，培養基含水量60%平菇菌絲長速最快，達7.6 mm/d，其次是培養基含水量58%、56%、54%、62%；培養基含水量52%、54%、56%、58%、60%、62%菌絲長勢最好，其他含水量次之。培養基含水量56%秀珍菇菌絲長速最快，達6.6 mm/d，其次是培養基含水量58%、54%、60%、52%；培養基含水量52%、54%、56%、58%、60%、62%菌絲長勢最好，其他含水量次之。培養基含水量60%杏鮑菇菌絲長速最快，達4.7 mm/d，其次是培養基含水量58%、56%；培養基含水量 52%、54%、56%、58%、60%、62%菌絲長勢最好，其他含水量次之。

3 小結與討論

試驗表明，側耳屬3個種菌種菌絲在不同碳、氮源培養基上長速和長勢均有差異，綜合菌絲長速、長勢及原料成本，結合生產實踐，平菇菌絲適宜碳源為蔗糖、淀粉，氮源為酵母膏、牛肉膏；秀珍菇菌絲適宜碳源為淀粉、蔗糖，氮源為酵母膏、蛋白胨；杏鮑菇菌絲適宜碳源為淀粉、蔗糖，氮源為牛肉膏、酵母膏。乳糖及無機氮（NH4）2SO4、NH4NO3均不利于側耳菌絲生長。

菌絲生長需要適宜的碳氮源配比[5]，根據極差分析結果，平菇菌絲最佳碳、氮源配比為蔗糖1%，淀粉0.5%，酵母膏0.2%，牛肉膏0.3%；秀珍菇菌絲最佳碳、氮源配比為淀粉1%，蔗糖1%，酵母膏0.3%，蛋白胨0.3%；杏鮑菇菌絲最佳碳、氮源配比為淀粉3%，蔗糖1.5%，牛肉膏0.2%，酵母膏0.4%。

培養基配方會影響擴繁種的純度和活力，培養基營養不足，菌種生長稀疏、活力差；培養基營養過于豐富，易感染雜菌，影響菌種純度；配方單一，營養不全，也影響菌絲生長。試驗中隨玉米芯添加量的逐步增加，菌絲生長速度由慢變快；當玉米芯添加到一定量時，菌絲生長速度達到最快；玉米芯添加量繼續增加時，菌絲生長速度由快變慢，菌絲長勢也是如此，較適宜平菇、秀珍菇為配方4，較適宜杏鮑菇為配方5。

培養基含水量過高或過低[6]，均影響擴繁種菌絲生長。培養基含水量過低，菌絲長速慢、長勢差，且培養基濕熱滅菌不徹底，也易引起雜菌感染[7]；培養基含水量過高，培養基內氧氣不足，菌絲長速慢、長勢差；適宜的培養基含水量，菌絲長速快、長勢好、污染率低。試驗中平菇擴繁種培養基較適宜含水量為58%～60%，秀珍菇擴繁種培養基較適宜含水量為54%～60%，杏鮑菇擴繁種培養基較適宜含水量為58%～60%。