化學發光免疫分析法檢測乙型肝炎病毒感染性標志物的應用

張 璐

（本溪鋼鐵（集團）歪頭山醫院檢驗科，遼寧 本溪 117006）

乙型肝炎病毒（HBV）有著比較高的感染率，一旦感染，就有可能發生肝炎、肝硬化甚至是肝癌等臨床表現，對患者的身心健康及生命安全造成嚴重危害。因此，為有效防治乙型肝炎，就需要積極做好HBV的檢測工作[1]。臨床以往在診斷乙型肝炎感染時，主要采取ELISA法來檢測患者體內的HBV血清標志物，但是無法實現定量分析，也不能對患者感染HBV的復制情況做出準確判斷[2]。基于此，本文以我院320例疑似乙型肝炎患者為例，就CLIA 法在HBV感染性標志物檢測中的應用效果展開探討。報道如下。

表1 兩種方法HBV感染性標志的陽性檢出率對比[n（%）]

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院收治的320例疑似乙型肝炎患者為研究對象，入選時間為2015年8月至2017年9月。其中男女分別有208例與112例；年齡為18~67歲，平均（42.5±2.7）歲。所有患者均檢測，均符合《病毒性肝炎防治方案》中的相關診斷標準。

1.2 方法：①儀器及試劑：CLIA法中使用的儀器為鄭州安圖生物LUMO化學發光儀，檢測試劑同樣由安圖綠科生物工程有限公司提供；ELISA法中使用的儀器是由深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司提供的型號為MR-96A的酶標儀，試劑由上海科華生物工程股份有限公司提供。嚴格按說明書開展相關操作。②檢測方法：早晨空腹狀態下抽取患者10 mL的靜脈下，以3000 r/min的速率離心15 min，隨后將血清析出。將血清樣本分成兩份，分別應用CLIA法與ELISA法對血清中的HBV感染性標志物（包括HBsAg、HBeAb、HBeAg、HBsAb及HBcAb等）進行檢測。

1.3 判定標準：測定值達到或高于參考值上線，則為陽性。其中，HBsAg的參考值上限為0.2 ng/mL，HBeAb為2.0 NCU/mL，HBeAg為0.05 NCU/mL，HBsAb為10.0 mIU/mL，HBcAb為1.5 NCU/mL。在靈敏度試驗中，采取衛生部臨檢中心提供的定值參比血清，即1.0 ng/mL的HBsAg。

1.4 統計學處理：采用SPSS21.0統計學軟件分析數據，計數資料用百分比（%）、計量資料采用均數±標準差（±s）表示，分別用χ2與t進行檢驗，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 HBV感染性標志物兩種方法的檢測結果：應用CLIA法檢測時，血清HBsAg、HBeAb及HBeAg的陽性檢出率相比于ELISA法明顯升高（P＜0.05），見表1。

2.2 兩種方法對低水平HBsAg的檢測結果及靈敏度：實驗顯示，當HBsAg低水平的檢測值不足1.0 IU/mL時，CLIA法的陽性檢出率顯著高于ELISA法（P＜0.05）。采取定值參比血清，并用陰性血清展開倍比稀釋，同時應用兩種方法進行靈敏度檢測，結果發現CLIA法與ELISA法檢出的最低濃度分別為0.031 IU/mL與0.128 IU/mL。

3 討 論

現階段，臨床主要通過對HBV感染性標志物進行檢測，從而達到診治乙型肝炎的目的。以往主要采取ELISA法來對乙型肝炎患者進行診斷，此種方法有著較高的準確率，且操作簡便，但無法展開定量分析，檢測結果也有可能出現不穩定的情況。而作為一種新型的分析技術，CLIA法的靈敏度較高，其主要通過發光底物自身所具備的發光強度來進行檢測，具有準確率高、線性寬、操作簡便等優勢，可有效彌補ELISA法的不足之處[3]。

本實驗結果顯示，CLIA法對HBsAg、HBeAb及HBeAg的陽性檢出率相比于ELISA法明顯升高（P＜0.05），這是因為CLIA法采用的是體積小但表面積大的固相載體來作為順磁性微粒，有著更大的反應面積。此外，標志物可進行循環利用，因而將發光時間有效延長，增加了強度，將HBV的感染進程準確顯示出來，實現了陽性檢出率及檢測靈敏度的提高。

此外，CLIA法對低水平HBsAg的檢測敏感性顯著高于ELISA法（P＜0.05），且CLIA法與ELISA法檢出的最低濃度分別為0.031 IU/mL與0.128 IU/mL。這一結果表明對乙型肝炎患者展開CLIA檢測時，可將其血清中的HBsAg快速檢測出來，充分防止低水平HBsAg樣本漏檢以及假陰性等情況的發生。綜上所述，相比于ELISA法，CLIA法對HBV感染性標志物的檢測準確率更高，可作為診斷乙型肝炎的一項重要檢測方法，并動態監測患者的病情，具有重要的臨床應用價值。