口腔鱗狀細胞癌中Mcl-1的表達與生存預后的相關性分析

楊美靜　王利山　李新穎　李彬　莊偉杰　魏立梅

[摘? ? ? ? ? ?要]? 目的：檢測Mcl-1在正常口腔黏膜和口腔鱗癌組織中的表達情況與患者預后生存之間的相關性。方法：應用免疫組化方法檢測Mcl-1在46例口腔鱗癌組織和11例正常口腔黏膜中的表達。運用SPSS17.0軟件分析Mcl-1在口腔鱗癌組織和在正常口腔黏膜中表達有無差異性，運用Kaplan-Meier分析Mcl-1與口腔鱗癌的生存預后有無無明顯相關性;結果：Mcl-1在口腔鱗癌組織和在正常口腔黏膜組織的表達具有差異性（P<0.05）， Kaplan-Meier分析Mcl-1與口腔鱗癌的生存預后無明顯相關性（P>0.05）; 結論：Mcl-1在口腔鱗癌中呈高表達，與病人的預后生存無明顯相關性。

[關? ? 鍵? ?詞]? 口腔鱗狀細胞癌;Mcl-1;免疫組化;生存分析

[中圖分類號]? R739.85? ? ? ? ? ? ? ? ? ?[文獻標志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號]? 2096-0603（2019）09-0162-02

惡性腫瘤嚴重威脅著人類的健康，治愈腫瘤已成為全世界范圍內的難題之一。Mcl-1是近年來發現的凋亡調控蛋白，在多種腫瘤中呈現高表達[1-3]。目前有關Mcl-1在口腔鱗癌中的表達國內鮮有報道。本研究選取Mcl-1作為研究對象，探討其在口腔鱗癌中的表達情況并對Mcl-1的表達與口腔鱗癌患者預后生存的關系進行分析，探討Mcl-1在口腔鱗狀細胞癌發生發展中的作用，為口腔鱗狀細胞癌的Mcl-1分子靶向治療提供依據。

一、材料和方法

（一）標本及臨床資料

口腔鱗癌組織均來自于濰坊市益都中心醫院病理科的存檔蠟塊，共46例，來源均為在2008年12月至2014年12月期間在該院接受外科手術治療的患者切除的腫瘤標本。所有病例都已經過明確確診。同時收集正常口腔唇黏膜組織11例，來源于在該院行唇腭裂手術患者切除的多余組織。

（二）免疫組織化學染色結果評判標準

參照文獻關于Mcl-1免疫組化染色的評判標準[3]，細胞中出現棕黃色染色的顆粒即視為陽性。對染色情況進行評分：在高倍鏡（×400）視野下，隨機選取每張切片的10個視野，每個視野中選取100個細胞，基數陽性細胞的個數進行評定：陽性細胞為0個用（-）表示，計分為0;陽性細胞的個數≤25%用（+）表示，計分為1;陽性細胞的個數為25%-50%用（++）表示，計分為2;陽性細胞的個數≥50%用（+++）表示，計分為3。組織染色陰性認定標準：計分為0或1的切片，組織染色陽性認定標準：計分為2或3的切片。

（三）統計方法

應用SPSS17.0統計學軟件進行統計學分析，應用卡方檢驗進行兩組之間的比較，以P<0.05為標準設定在統計學上具有顯著的相關性。采用Kaplan-Meier進行單因素生存分析，運用Cox-regression分析影響口腔鱗癌的病理因素。

二、實驗結果

（一）Mcl-1在正常口腔黏膜和口腔鱗癌中的表達

Mcl-1表達定位于細胞漿，呈棕褐色，見圖1。46例鱗癌組織中Mcl-1陽性的為26例，陰性為20例。陽性表達率為56.5%;11例正常黏膜組織中陰性為8例，陽性為3例，陽性表達率為27.3%。經卡方檢驗分析，P<0.05，差異有顯著性意義，說明Mcl-1在口腔鱗癌中的表達與正常口腔黏膜中的表達存在差異。

（二）Mcl-1的表達與患者生存預后的關系

截止到隨訪日期2018年10月4日，46例鱗癌患者中共死亡19例，生存26例，失訪1例。運用Kaplan-Meier分析，實驗數據表明，Mcl-1與口腔鱗癌的生存預后無明顯相關性（P>0.05），見圖2。根據Mcl-1的表達和各臨床病理參數關系，運用Cox-Regression分析與口腔鱗癌生存預后相關的因素，結果表明淋巴轉移與口腔鱗癌患者的預后和生存有相關性（P<0.05）。（詳見表1和表2）

三、討論

Mcl-1是較新發現的凋亡調控蛋白，近年來才被納入研究。Mallick，S[4]等比較了正常口腔黏膜、癌前狀態及口腔鱗癌內Mcl-1的表達。他們選取口腔白斑和口腔黏膜下纖維化作為癌前狀態研究組。免疫組化染色結果顯示Mcl-1在口腔鱗癌、口腔白斑和口腔黏膜下纖維化組織內的表達明顯要高于在正常黏膜的表達，但是沒有發現在前三者中表達存在明顯差異且在檢測病理參數與該蛋白表達時也沒有發現相關性。為了進一步檢測Mcl-1是否在口腔鱗癌細胞生長過程中發揮作用，Mallick，S等人還利用siRNA方法將口腔鱗癌細胞和成纖維細胞中Mcl-1的水平下調后，進一步檢測兩種細胞的生長情況。結果顯示被檢測的兩個口腔鱗癌細胞系中細胞的生長都受到抑制。相反，成纖維細胞的生長卻沒有受到明顯影響，以上結果都顯示，Mcl-1與口腔鱗癌的發生相關。

Mateo，Y[5]通過對127例胃癌患者進行Mcl-1與預后生存關系的分析，結果數據說明Mcl-1陽性表達的病例患者的預后要明顯比Mcl-1陰性表達的患者預后差，多變量分析結果顯示Mcl-1的表達強度可以作為預測胃癌患者預后是否良好的一個指標。Wuilleme-Toumi，S.[6]等對Mcl-1在多發性骨髓瘤中的表達進行研究發現Mcl-1表達陽性的患者術后復發率較表達陰性者高，同時短時間生存率也比表達陰性者低。Shigemasa，K.[7]對卵巢癌的研究中同樣得出Mcl-1高表達者預后差。限于本實驗樣本量比較小、有可能不能很好地反映總體的情況，致使結果與國外文獻報道有差異。后續實驗還應進行較大樣本量的檢測，便于排除偶然情況，更好地反映總體特點。

參考文獻：

[1]Wuilleme-Toumi， S.， et al.， Mcl-1 is overexpressed in multiple myeloma and associated with relapse and shorter survival[J]. Leukemia， 2005. 19（7）：1248-1252.

[2]Schulze-Bergkamen， H.， et al.， Suppression of Mcl-1 via RNA interference sensitizes human hepatocellular carcinoma cells towards apoptosis induction[J]. BMC Cancer， 2006，6（1）： 232.

[3]Song， L.， et al.， Research Paper Mcl-1 Regulates Survival and Sensitivity to Diverse Apoptotic Stimuli in Human Non-Small Cell Lung Cancer Cells[J]. Cancer biology & therapy， 2005，4（3）： 267-276.

[4]Mallick， S.， et al.， Human oral cancers have altered expression of Bcl-2 family members and increased expression of the anti-apoptotic splice variant of Mcl-1[J]. J Pathol， 2009，217（3）： 398-407.

[5]Maeta， Y.， et al.， Expression of Mcl-1 and p53 proteins predicts the survival of patients with T3 gastric carcinoma[J]. Gastric Cancer， 2004，7（2）： 78-84.

[6]Wuilleme-Toumi， S.， et al.， Mcl-1 is overexpressed in multiple myeloma and associated with relapse and shorter survival[J]. Leukemia， 2005. 19（7）： 1248-1252.

[7]Shigemasa， K.， et al.， Increased MCL-1 Expression Is Associated with Poor Prognosis in Ovarian Carcinomas[J]. Cancer Science， 2002，93（5）： 542-550.