2-甲氧基雌二醇對(duì)缺血缺氧誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響

劉紅軍 楊杰

急性心肌梗死治療的關(guān)鍵在于盡早溶栓恢復(fù)心肌血流灌注[1]，但多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)[2-3]，在心肌恢復(fù)血流灌注時(shí)，心臟功能非但沒(méi)有恢復(fù)，心肌損傷反而加重，心肌壞死面積增加。2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol，2ME2）作為雌二醇代謝產(chǎn)物，存在于尿液和血液中，其具有抗腫瘤活性，在抑制腫瘤細(xì)胞增殖及微血管生成中發(fā)揮重要作用[4]。有研究指出[5-6]，2ME2可抑制缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIP-1α）表達(dá)及凋亡相關(guān)基因Caspase-3表達(dá)而在減輕局灶性腦缺血鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。本研究通過(guò)構(gòu)建大鼠急性心肌梗死模型，觀察2ME2對(duì)心臟功能及心肌細(xì)胞凋亡的影響。

材料與方法

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)健康，雄性，成年SD大鼠40只，7～8周齡，體質(zhì)量（260±20）g，購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（合格證號(hào)：SYXK（豫）2016-0002），飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下，自由進(jìn)食、進(jìn)水，適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d。利用隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、溶媒組和2ME兩組，每組10只。

2.主要試劑和設(shè)備 2ME2和二甲基亞砜由美國(guó)Sigma公司提供，TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海研卉生物科技有限公司，兔抗鼠HIP-1α多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司，兔抗鼠Bcl2/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白3（Bcl2/adenovirus E1B 19kDa-interacting protein 3，BNIP3）多克隆抗體購(gòu)自武漢艾美捷科技有限公司，小動(dòng)物呼吸機(jī)購(gòu)自上海千盛生物科技有限公司，彩色多普勒超聲顯像儀購(gòu)自德國(guó)Siemens公司，凝膠電泳成像分析系統(tǒng)購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司。

3.構(gòu)建大鼠急性心肌梗死模型 參照文獻(xiàn)[7]中的方法制備大鼠急性心肌梗死模型：腹腔注射4%水合氯醛將大鼠麻醉，備皮、固定于小動(dòng)物手術(shù)臺(tái)，行氣管切開(kāi)、插管，用小動(dòng)物呼吸機(jī)輔助呼吸，潮氣量18 mg/kg，呼吸頻率70次/min，用手術(shù)刀沿胸骨左緣2、3、4肋間縱向切開(kāi)，鈍性分離胸膜，打開(kāi)心包膜，使心臟充分暴露。……