2-甲氧基雌二醇對缺血缺氧誘導的大鼠心肌細胞凋亡的影響

劉紅軍 楊杰

急性心肌梗死治療的關鍵在于盡早溶栓恢復心肌血流灌注[1]，但多項研究發現[2-3]，在心肌恢復血流灌注時，心臟功能非但沒有恢復，心肌損傷反而加重，心肌壞死面積增加。2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol，2ME2）作為雌二醇代謝產物，存在于尿液和血液中，其具有抗腫瘤活性，在抑制腫瘤細胞增殖及微血管生成中發揮重要作用[4]。有研究指出[5-6]，2ME2可抑制缺氧誘導因子-1α（HIP-1α）表達及凋亡相關基因Caspase-3表達而在減輕局灶性腦缺血鼠神經細胞凋亡中發揮重要作用。本研究通過構建大鼠急性心肌梗死模型，觀察2ME2對心臟功能及心肌細胞凋亡的影響。

材料與方法

1.實驗動物 清潔級健康，雄性，成年SD大鼠40只，7～8周齡，體質量（260±20）g，購自河南省實驗動物中心（合格證號：SYXK（豫）2016-0002），飼養于標準環境下，自由進食、進水，適應性飼養7 d。利用隨機數字表隨機分為假手術組、模型組、溶媒組和2ME兩組，每組10只。

2.主要試劑和設備 2ME2和二甲基亞砜由美國Sigma公司提供，TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒購自上海研卉生物科技有限公司，兔抗鼠HIP-1α多克隆抗體購自美國Santa Cruz公司，兔抗鼠Bcl2/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白3（Bcl2/adenovirus E1B 19kDa-interacting protein 3，BNIP3）多克隆抗體購自武漢艾美捷科技有限公司，小動物呼吸機購自上海千盛生物科技有限公司，彩色多普勒超聲顯像儀購自德國Siemens公司，凝膠電泳成像分析系統購自美國Bio-Rad公司。

3.構建大鼠急性心肌梗死模型 參照文獻[7]中的方法制備大鼠急性心肌梗死模型：腹腔注射4%水合氯醛將大鼠麻醉，備皮、固定于小動物手術臺，行氣管切開、插管，用小動物呼吸機輔助呼吸，潮氣量18 mg/kg，呼吸頻率70次/min，用手術刀沿胸骨左緣2、3、4肋間縱向切開，鈍性分離胸膜，打開心包膜，使心臟充分暴露。……