劉紅軍 楊杰
急性心肌梗死治療的關鍵在于盡早溶栓恢復心肌血流灌注[1],但多項研究發現[2-3],在心肌恢復血流灌注時,心臟功能非但沒有恢復,心肌損傷反而加重,心肌壞死面積增加。2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2ME2)作為雌二醇代謝產物,存在于尿液和血液中,其具有抗腫瘤活性,在抑制腫瘤細胞增殖及微血管生成中發揮重要作用[4]。有研究指出[5-6],2ME2可抑制缺氧誘導因子-1α(HIP-1α)表達及凋亡相關基因Caspase-3表達而在減輕局灶性腦缺血鼠神經細胞凋亡中發揮重要作用。本研究通過構建大鼠急性心肌梗死模型,觀察2ME2對心臟功能及心肌細胞凋亡的影響。
1.實驗動物 清潔級健康,雄性,成年SD大鼠40只,7~8周齡,體質量(260±20)g,購自河南省實驗動物中心(合格證號:SYXK(豫)2016-0002),飼養于標準環境下,自由進食、進水,適應性飼養7 d。利用隨機數字表隨機分為假手術組、模型組、溶媒組和2ME兩組,每組10只。
2.主要試劑和設備 2ME2和二甲基亞砜由美國Sigma公司提供,TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒購自上海研卉生物科技有限公司,兔抗鼠HIP-1α多克隆抗體購自美國Santa Cruz公司,兔抗鼠Bcl2/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白3(Bcl2/adenovirus E1B 19kDa-interacting protein 3,BNIP3)多克隆抗體購自武漢艾美捷科技有限公司,小動物呼吸機購自上海千盛生物科技有限公司,彩色多普勒超聲顯像儀購自德國Siemens公司,凝膠電泳成像分析系統購自美國Bio-Rad公司。
3.構建大鼠急性心肌梗死模型 參照文獻[7]中的方法制備大鼠急性心肌梗死模型:腹腔注射4%水合氯醛將大鼠麻醉,備皮、固定于小動物手術臺,行氣管切開、插管,用小動物呼吸機輔助呼吸,潮氣量18 mg/kg,呼吸頻率70次/min,用手術刀沿胸骨左緣2、3、4肋間縱向切開,鈍性分離胸膜,打開心包膜,使心臟充分暴露?!?br>