2型糖尿病患者血清中Opticin蛋白的表達(dá)與視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性研究

邵 娜，張 晗，馮 潔△

(1.濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院眼科，山東濟(jì)寧 272100；2.山東大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科，山東濟(jì)南 250000)

糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)是糖尿病最常見(jiàn)、最嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥之一，也是目前導(dǎo)致中老年人視力損害及喪失的主要原因[1]。有研究表明，糖尿病性黃斑水腫是引起視力損傷的主要原因，可能與組織缺氧、血-視網(wǎng)膜屏障破壞及玻璃體對(duì)黃斑的機(jī)械性牽引密切相關(guān)，利用光學(xué)相干斷層成像術(shù)(OCT)對(duì)糖尿病性黃斑水腫進(jìn)行追蹤隨訪發(fā)現(xiàn)，玻璃體對(duì)視網(wǎng)膜的機(jī)械性牽引是誘發(fā)黃斑水腫的主要誘因[2-3]。但其具體分子發(fā)病機(jī)制尚不清楚，成為臨床研究熱點(diǎn)之一。Opticin蛋白是一種新發(fā)現(xiàn)的富含亮氨酸的非膠原蛋白，為細(xì)胞外基質(zhì)家族的一員，對(duì)維持玻璃體膠原纖維特定空間排列、避免膠原的相互聚集和凝膠塌陷具有重要作用。有研究還發(fā)現(xiàn)，Opticin蛋白對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A和纖維生長(zhǎng)因子-2引起的牛血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移具有顯著抑制效應(yīng)[4]。因此，本研究探究了2型糖尿病患者血清中Opticin蛋白的表達(dá)與視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性，旨在了解Opticin蛋白表達(dá)與DR的相關(guān)性及其與預(yù)后的關(guān)系，為臨床提供理論依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年1月至2017年1月濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院眼科收治的2型糖尿病患者120例作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合2002年DR診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；(2)空腹血糖小于8 mmol/L；(3)同意參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)伴嚴(yán)重基礎(chǔ)性疾病，如心肌梗死、腦卒中、全身感染等；(2)其他原因引起的視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜病變；(3)有眼部激光及手術(shù)史者。本研究通過(guò)濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，獲得患者及家屬同意，均簽訂知情同意書。依據(jù)散瞳后直接眼鏡、眼底照相或眼底熒光造影檢查結(jié)果將患者分為糖尿病患者無(wú)DR(NDR)組、非增殖期DR(NPDR)組、增殖期DR(PDR)組。3組患者性別、年齡等一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 3組患者一般資料比較

1.2方法

1.2.1生化指標(biāo)檢測(cè) 采集3組患者清晨空腹靜脈血5 mL，1 500 r/min(離心半徑6 cm)離心15 min，獲得血清，利用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血清肌酐(SCr)等；并收集患者清晨尿液，檢測(cè)尿素氮(UN)、腎小球?yàn)V過(guò)率估計(jì)值(eGFR)等。

1.2.2Opticin蛋白表達(dá)檢測(cè) 收集入組者空腹靜脈血約5 mL，1 500 r/min(離心半徑6 cm)離心15 min，獲得血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定Opticin蛋白表達(dá)水平，試劑盒由R&D公司提供，具體操作步驟參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。每個(gè)樣本均檢測(cè)3次，取平均值。

1.2.3視力監(jiān)測(cè) 通過(guò)門診對(duì)3組患者進(jìn)行隨訪1年；視力提高指患者視力提高2行或以上；視力下降指患者視力下降2行或以下；視力不變指患者視力上下波動(dòng)小于2行。

2 結(jié) 果

2.13組患者生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較 3組患者HDL-C、LDL-C、TC、TG水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；3組患者Scr、UN、eGFR水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PDR組患者Scr、UN水平最低，eGFR水平最高。見(jiàn)表2。

表2 3組患者生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

2.23組患者Opticin蛋白表達(dá)水平比較 PDR組患者血清Opticin蛋白水平均明顯低于NDR組、NPDR組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 3組患者Opticin蛋白表達(dá)水平比較

2.3血清Opticin蛋白水平與DR的關(guān)系 血清Opticin蛋白水平與DR、SCr、UN呈負(fù)相關(guān)，與eGFR呈正相關(guān)。見(jiàn)表4。

表4 血清Opticin蛋白水平與DR的關(guān)系

2.4logistic回歸模型分析篩查DR的獨(dú)立危險(xiǎn)因素 以DR為因變量，以血清Opticin蛋白，以及在NDR、NPDR、PDR組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)作為自變量進(jìn)行l(wèi)ogistic回歸分析。血清Opticin蛋白、eGFR水平降低為DR的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。

2.53組患者隨訪1年后視力變化比較 PDR組患者隨訪1年視力下降率均高于NDR組、NPDR組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表6。

表6 3組患者隨訪1年后視力變化比較[n(%)]

注：與NDR組比較，*P<0.05；與NPDR組比較，#P<0.05

3 討 論

隨著人均壽命的延長(zhǎng)及飲食結(jié)構(gòu)的改變，我國(guó)糖尿病及DR發(fā)病率仍在逐年上升，而DR常引起致盲性眼病。有研究表明，DR可分為背景期視網(wǎng)膜病變及增殖性視網(wǎng)膜病變，后者多伴新生血管的形成，主要位于視網(wǎng)膜及玻璃體[6]。在DR的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中多伴有毛細(xì)血管異常、形成新生血管及血-視網(wǎng)膜屏障被破壞等[7]，但其具體機(jī)制尚不明，仍是探尋熱點(diǎn)之一。

Opticin蛋白為新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，屬富含亮氨酸重復(fù)序列的間質(zhì)蛋白質(zhì)蛋白多糖家族中的第Ⅲ類糖蛋白，廣泛分布于人眼玻璃體、角膜、虹膜、睫狀體及脈絡(luò)膜中[8]。有研究表明，Opticin蛋白可抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A、成纖維生長(zhǎng)因子-2等血管形成因子，以降低細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)，減少血管狀結(jié)構(gòu)的形成[9]。因此，Opticin蛋白在一定程度上具有抑制新生血管形成的作用。

LE GOFF等[10]研究表明，Opticin蛋白能降低31%血管內(nèi)皮遷移、37%管狀結(jié)構(gòu)形成及45%細(xì)胞對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞的入侵，抑制雞尿囊絨膜血管結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)，另外，該蛋白可通過(guò)抑制成纖維生長(zhǎng)因子-2，進(jìn)而降低絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化，致細(xì)胞遷移及管狀結(jié)構(gòu)形成受到抑制。因此，Opticin蛋白可能是一個(gè)抑制血管入侵玻璃體的抑制劑。

WILKINSON等[11]通過(guò)體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，Opticin蛋白在乳腺癌細(xì)胞中具有一定抗血管增殖作用。PATTWELL等[12]通過(guò)對(duì)視網(wǎng)膜增殖疾病的觀察發(fā)現(xiàn)，睫狀體上皮細(xì)胞可繼續(xù)表達(dá)釋放Opticin蛋白，并與2型膠原蛋白聯(lián)系，造成視網(wǎng)膜損傷。LE GOFF等[13]研究表明，Opticin蛋白表達(dá)量降低，并不影響玻璃體血管的消退及視網(wǎng)膜血管的生成，但通過(guò)對(duì)比Opticin蛋白滅活鼠與野生型鼠發(fā)生，視網(wǎng)膜病變后Opticin蛋白滅活鼠的新生血管形成更多，且在玻璃體內(nèi)注射Opticin蛋白可抑制新生血管的形成，進(jìn)一步說(shuō)明Opticin蛋白能抑制視網(wǎng)膜前新生血管形成。因此，Opticin蛋白與DR密切相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，Opticin蛋白水平在DR患者明顯降低，是DR一個(gè)客觀變化指標(biāo)。內(nèi)皮功能紊亂是導(dǎo)致糖尿病大血管及微血管并發(fā)癥發(fā)生的主要病理過(guò)程，有研究表明，Opticin蛋白與內(nèi)皮功能異常密切相關(guān)，提示Opticin蛋白對(duì)糖尿病血管并發(fā)癥具有潛在危險(xiǎn)性。

本研究結(jié)果顯示，3組患者血清Opticin蛋白表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而PDR組患者血清Opticin蛋白水平均明顯低于NDR組、NPDR組；血清Opticin蛋白水平與DR、SCr、UN呈負(fù)相關(guān)，與eGFR呈正相關(guān)；經(jīng)logistics回歸模型分析發(fā)現(xiàn)，血清Opticin蛋白、eGFR水平降低為DR的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。說(shuō)明Opticin蛋白在DR患者中的表達(dá)水平明顯升高，存在明顯相關(guān)性，且隨病情程度加重而升高，說(shuō)明Opticin蛋白表達(dá)減少，可能在一定程度上促進(jìn)糖尿病視網(wǎng)膜新生血管形成及玻璃體血管的長(zhǎng)入，抑制視網(wǎng)膜前新生血管形成的能力減弱，引起玻璃體視網(wǎng)膜疾病，進(jìn)一步促進(jìn)DR的進(jìn)展。本研究對(duì)3組患者隨訪1年發(fā)現(xiàn)，PDR組患者視力下降率均明顯高于NDR組、NPDR組；可能與Opticin蛋白表達(dá)水平降低，可能會(huì)失去對(duì)膠原纖維的保護(hù)，使膠原纖維易受到膠原酶的攻擊，致膠原纖維結(jié)合力減弱，玻璃體穩(wěn)定性降低，收縮能力增強(qiáng)，且Opticin蛋白表達(dá)水平降低，可抑制視網(wǎng)膜新生血管形成，進(jìn)而引起視網(wǎng)膜疾病，導(dǎo)致DR患者后期視力降低[14-15]。

4 結(jié) 論

Opticin蛋白在糖尿病患者血清中表達(dá)水平下降，隨著視網(wǎng)膜病變程度的加重而逐漸降低，為DR的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且Opticin蛋白與患者預(yù)后有關(guān)，可成為評(píng)估DR患者預(yù)后的指標(biāo)之一。