子癇前期患者P-p38MAPK及TNF-α的表達及意義分析

陶躍平 鐘少平

子癇前期是妊娠期高血壓疾病中的一種嚴重表現形式，其嚴重危及孕產婦及圍產兒的生命安全。目前較為公認的是胎盤“淺著床”在其中發揮重要作用［1］。最近研究表明，P-p38MAPK信號轉導通路激活后，參與了腫瘤細胞侵襲過程；胎盤著床過程中具備類似腫瘤細胞生長侵襲過程［2-3］，P-p38MAPK信號途徑是否亦參與了胎盤“淺著床”過程，并在子癇前期發病過程中發揮作用，作者通過檢測P-p38MAPK在胎盤中的表達情況，同時亦對孕婦血漿中TNF-α水平的檢測，從而探討P-p38MAPK及TNF-α在子癇前期中的發病機制，現報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 取2016年8月至2018年6月在本院單胎足月陰道分娩患者57例為觀察對象，其中輕度子癇前期18例，重度子癇前期19例，同期無任何并發癥的正常足月組20例作為對照組。診斷及分類標準參考全國統編教材第8版《婦產科學》［4］。三組孕婦年齡、孕齡均無顯著性差異，既往無心血管系統、泌尿系統及糖尿病史，近期無胎膜早破、早產及感染。三組孕婦分娩后立即收集胎盤組織，在胎盤組織母體面中央和四個象限中心無鈣化及梗死處各取組織塊約1cm×1cm×1cm大小，4%多聚甲醛固定，行石蠟包埋備用。相應孕婦進院后未進行任何藥物治療時采血4～5ml，置于不含抗凝劑的試管常溫下靜置10min待血液凝固后，離心15min（1000～1500轉/min），收取上清液，分裝于4個EP管中，立即存入-70℃冰箱中。

1.2 主要方法和試劑 采用免疫組化SABC法測定胎盤組織中P-p38MAPK表達及血清中TNF-α表達情況蛋白表達。獲得免疫組織化學切片后，選取圖片并通過HMIAS-2000 高清晰彩色病理圖像免疫組化測量系統對其表達進行半定量分析：測定玻片上的細胞內的灰度值，灰度值大（染色強 度弱、 透光強）則蛋白表達少，反之則表達多。兔抗人P-p38MAPK抗體購自Santa Cruze公司，SABC試劑盒及人TNF-α ELISA試劑盒均購自于武漢博士德生物。

1.3 統計學分析 采用SPSS19.0統計軟件。計量資料以（x±s）表示，組間比較采用方差分析，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 各組孕婦胎盤組織的病理變化 與正常孕婦組相比，輕、重度子癇前期組胎盤合體滋養細胞結節細胞增多，細胞滋養細胞增生，絨毛血管減少，管腔狹窄，纖維素樣壞死明顯增多（見圖1）。

圖1 各組孕婦胎盤組織的病理圖

2.2 各組孕婦胎盤組織中P-p38MAPK表達的比較 正常孕婦胎盤組織中僅見少量弱陽性細胞。主要為胎盤絨毛毛細血管內皮細胞及滋養細胞，P-p38MAPK顆粒微細，主要表達于胞槳和胞核（見圖2）；在正常孕婦及輕、重度子癇前期患者胎盤組織中P-p38MAPK灰度值依次為（13.11±1.07）、（29.24±1.14） 及（43.17±6.21）（F=3.84，P＜0.05）；與正常妊娠孕婦相比，輕、重度子癇前期組胎盤組織P-p38MAPK表達水平明顯增加，與對照組相比具有顯著差異（均P＜0.05）。

圖2 各組孕婦胎盤組織中P-p38MAPK表達情況

2.3 各組孕婦血漿中TNF-α水平的比較 在正常孕婦及輕、重度子癇前期患者血漿TNF-α依次為（39.27±1.16）pg/ml、（325.81±11.58）pg/ml及（635.24±32.82）pg/ml（F=4.02，P＜0.05）；與正常妊娠孕婦相比，輕、重度子癇前期患者血漿水平依次升高，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。

3 討論

子癇前期是妊娠期特有的一種并發癥，嚴重危及孕產婦及圍產兒的安全，因其病因和病理機制復雜，一直是產科的研究重點和熱點。P-p38MAPK是絲裂原活化蛋白激酶（MAPKs）中重要組成成分之一，P-p38MAPK信號通路受到三級激酶鏈作用，當其被激活后，介導細胞應激及炎癥反應，最近發現其在細胞增殖、分化及凋亡方面起到重要作用［5］。進一步研究證實，P-p38MAPK活化后，可激活c-jun和c-fos，從而介導caspases途徑來誘導細胞凋亡［6］。

作為一種促炎癥細胞因子，TNF-α能夠在亞細胞水平上激發一些列級聯反應，并可再誘導TNF-α等多種炎癥因子表達上調；此外，TNF-α可作用于血管內皮細胞，從而增加毛細血管的通透性，誘導血栓形成，導致局部組織缺血缺氧。在本資料中，輕度子癇前期患者胎盤中P-p38MAPK顯著高于正常妊娠中，且重度子癇前期患者胎盤組織中P-p38MAPK水平進一步增高，同時檢測到母體血漿TNF-α具有類似改變。推測在妊娠過程中，滋養細胞處于相對缺氧狀態，細胞組織處于相對缺氧條件時，促炎癥細胞因子TNF-α表達水平升高，TNF-α作用于血管內皮細胞及滋養細胞；當胎盤部位的血管內皮細胞受到TNF-α作用后，內皮細胞受到損害，毛細血管的通透性增加，激發血栓形成，胎盤局部的栓子進一步惡化胎盤供血供氧，從而導致局部組織缺血缺氧。胎盤淺著床，子癇前期等疾病發生，同時并根據淺著床嚴重程度出現不同程度的臨床癥狀，因此相應表現為輕、重度子癇前期等疾病發生。對母胎健康造成不同程度的威脅。

綜上所述，妊娠過程中血漿TNF-α水平異常可誘導胎盤P-p38MAPK表達異常，參與子癇前期的發病，因此，TNF-α水平異常可作為子癇前期預測的發病指標之一，但其精準機制如何，仍有待進一步研究。