沙門氏菌快速檢測板在食品檢測中的應用

常曉萌 陳芳園 王俊華 王玉霞

社會不斷推進發展的進程中，使人們對于生活質量的要求逐漸增加。尤其是在食品安全領域，為食品檢測技術提出了更加復雜的要求。由此，也使食品檢測方法成為了相關科研人員研究的重點方向。為了高效完成食品中的沙門氏菌檢測任務，應對檢測方法進行拓展研究，并對沙門氏菌快速檢測板的技術原理，進行系統性的分析，以便為技術條件的應用奠定基礎。本文以食品檢測為研究對象，對沙門氏菌的快速檢測板應用方法進行分析。在介紹其檢測技術的基礎上，通過材料備制、儀器準備、菌株培養、標準檢測方法、3M沙門氏菌快速檢測板法的內容討論，介紹具體的操作方法，為相關研究與實踐工作提供參閱材料。

沙門氏菌快速檢測板技術

沙門氏菌是典型的腸桿菌，帶有較強的致病性，可誘發人類的傷寒、腹瀉等病狀，嚴重時甚至會引發食物中毒。在病菌傳播的過程中，沙門氏菌主要將家禽、蛋類、肉類等日常生活中常見的食物作為媒介，完成傳播。統計數據顯示，我國每年產生的食物中毒事件，有70%都是由沙門氏菌引起的。因此，必須通過研究，找到快速甄別沙門氏菌的檢測辦法，提高食品檢測效率與質量。

當前的科研技術條件下，沙門氏菌的檢測可以通過沙門氏菌快速測試片的方法完成，這其中又以3M沙門氏菌快速測試最為典型。在試驗原理上，將溫度與時間作為執行檢驗的單位，針對不同類型的食品，完成沙門氏菌檢驗工作。這種檢測方法較為簡便，并能夠高效率的完成檢驗任務，精確判定食品中是否帶有沙門氏菌。

沙門氏菌快速檢測在食品檢測中的應用方法

材料、儀器準備。沙門氏菌快速檢測的食品檢測應用試驗中，要準備實驗材料與基本儀器設備。在滅菌設備的準備上，可以根據實際情況，選擇干熱或是濕熱設備。備至恒溫培養箱3個，溫度參數分別設定在 36℃、42℃、41.5℃，培養箱的允許溫度誤差保持在±1℃。移液管的規格型號，應選用0.1mL或1mL，并保證精準度參數為±5%，培養皿的直徑為90mm，天平的感量級別為0.01g。

備至材料的過程中，需準備適量的BPW緩沖蛋白胨水、SC增菌液、TTB增菌液、BS亞硫酸鉍瓊脂平板以及A至F的多價血清。同時，從美國3M公司處購得專業的測試片與確認片，并獲得用于試驗的3M沙門氏菌。準備試驗的過程中，還需培植3株標準株，并對成品菌株進行貯藏，在使用前，將其制成104CFU/mL的肉湯。

標準檢測過程。在無菌化的操作條件下，獲取25mL的試驗樣品，將其放置在220mL的緩沖蛋白胨水中培養。培養過程中，需將配制好的培養對象放置在36℃的恒溫培養箱中，放置8- 18小時。在完成培養后，將培養對象取出恒溫箱，輕輕的對經過培養的混合物樣品進行搖晃，并提取其中的1mL。然后，將提取的1mL混合物轉放到10mL的TTB樣本中，再使用42℃的恒溫箱培養18- 24小時。當完成培養時，再次按照之前的工序提取1mL二次混合物，轉放到10mL的SC樣本中，并將這經過兩次提取與混合的溶液，再次放置在36℃的恒溫箱中，完成18- 24小時的培養。

完成這一階段的三次培養與混合后，應分別從接種環中提取增菌液1環，并以劃線接種的方法，分別放置在BS瓊脂板與XLD瓊脂上，以此完成快速檢測板的制作。將兩個檢測板放入36℃的恒溫箱中進行分別培養，維持18小時后，就基本可以觀察出檢測板中的菌落生成情況。而為了進一步擴大沙門氏菌的顯示效果，也可以適當的延長檢測板在恒溫箱中的培養時間，使其保持40- 48小時的培養狀態。這種快速檢測方法，是我國制定的標準化檢測方法，可以作為執行沙門氏菌快速測試板食品檢測的規范化方法，也能作為新型檢測方法的具體參照。

3M沙門氏菌的快速測試板法。3M沙門氏菌快速測試板方法下，也需在無菌條件下進行操作，將3M沙門氏菌與增菌補充物質放置在無菌培養基中，然后，將待檢測食物按照一定比例稀釋，并放置在無菌的容器中。在進行測試培養之前，應對食物的帶菌量進行預估，如果其帶菌量較低，可以適當的延長培養時間（最低18小時）。反之如果預估帶菌量較高，則可轉移到特定的R- V R10溶液中進行相對時間較少（最低8小時）的培養。注意，此項培養過程中，應使用41.5℃的恒溫箱，且保證培養的時間不超出24小時。

在完成培養后，應備至3M沙門氏菌測試片，使其平放在實驗臺上，并使用移液器向測試片滴放2mL的無菌水，然后再放置上層膜，并在操作中避免出現氣泡。把3M壓板放在測試片的中心位置，并施加較輕的壓力，使無菌水充分的覆蓋在試片的表面。注意，不能在膜上發生壓板的滑動，以免實驗效果受到影響。完成處理后，需將制成的試片放置在溫度為20℃- 25℃的避光位置，保持1小時。完成水化的試片，應在8小時之內進行使用，以免影響試驗效果。

當完成試片的水化后，需進行接種處理，對于菌量較低的試驗樣品，可以采用10μL的滅菌接種環，蘸取相應的增菌液。如果預估的菌量較高，則需使用R- V R10溶液，并蘸取滿10μL完成接種。在完成接種后，應根據待檢測的食品情況進行排列，且在清晰的劃線條件下，區分不同食品的品類，以便更加清晰的觀測到試驗的結果信息。此時，應使用41.5℃的恒溫箱，進行24小時的培養。注意，單次的培養不應使被檢測疊片數量超過20。

完成接種以及其后續培養處理后，應根據試片的表現形式，對食品樣品的帶菌情況進行初步判定。當被測試對象出現黃色暈圈、并帶有紅色菌落，可將其定義為陽性菌落，同時僅帶有紅色菌落的測試片，也可以定義為陽性菌落。然后，將判定為陽性菌落的測試片單獨進行標記，并執行后續的確認判斷。確認判斷中，需掀起3M沙門氏菌上膜片，并使用確認膜片進行替換。在保證凝膠層與確認膜片完全貼合，且沒有氣泡的條件下，完成測試片的閉合。閉合后，還需對膜片的貼合效果進行再次確認，并將其放置在41.5℃的恒溫箱中，維持4- 5小時。如果待確定的試片中，發生藍色沉淀或是黑色菌落，則可確定該膜片的測試食物中沙門氏菌為陽性。

綜上所述，沙門氏菌快速測試板法，可以快速定位食品中所攜帶的沙門氏菌，完成食品檢測的客觀需要。在檢測方法上，又可明顯的區分為國家標準法與3M沙門氏菌快速檢測法，在食品檢測活動中，有較為突出的應用價值。而對此項技術的研究分析，不僅可以鞏固技術應用效果，也可加快食品檢測的技術發展，為保衛社會食品安全創造科學條件。但日后有關研究人員仍需對這一方法展開深入的探究，通過不斷的嘗試與探索，進一步完善該方法，提升其檢測效果。