噻托溴銨對COPD患者痰液炎癥細胞計數、炎癥因子及MMP-9水平的影響

黃潘文 張 平 方年新

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)為呼吸系統常見的一種慢性肺部疾病，以氣流受限為特征，患者伴有氣道對有害顆粒或氣體的異常炎癥反應，嚴重者可能喪失勞動及自理能力[1-4]。研究表明COPD患者肺部的巨噬細胞等炎癥細胞明顯增加，激活釋放血清中基質金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)等多種介質破壞肺部結構從而加重患者病情[5-6]。故臨床上抗炎對患者的治療至關重要，常規的小劑量茶堿雖然可以抑制部分炎癥細胞，但臨床效果不顯著[7-8]。噻托溴銨為一種長效抗膽堿藥，可以舒張氣道平滑肌和減少粘液分泌，臨床上常用于治療哮喘和COPD[9-10]。本文探討噻托溴銨對COPD患者痰液炎癥細胞計數、炎癥因子及MMP-9水平的影響，報道如下。

資料與方法

一、一般資料

選擇2014年6月至2017年10月我院收治的79例穩定期COPD患者為研究對象，隨機分為實驗組(41例)與對照組(38例)，其中實驗組男25例，女16例，年齡42～76歲，平均年齡(56.23±12.95)歲，病程2.8～14.6年，平均病程(6.25±2.78)年。對照組男23例，女15例，年齡44～79歲，平均年齡(56.12±13.04)歲，病程2.5～15.1年，平均病程(6.79±2.65)年。本文已得到我院倫理委員會許可。納入標準：①均符合穩定期COPD的相關診斷標準[11]；②COPD自我評估問卷評分大于9分，或呼吸困難分級不小于2級；③第1 s用力呼氣容積值介于30%至50%，且第1 s用力呼氣容積和用力肺活量比值小于70%；④咳嗽咳痰等癥狀表現較輕，且肺功能等指標較為穩定；⑤入選前一個月內無使用過抗膽堿藥物治療史或COPD急性發作史者；⑥對本文中使用到的藥物無過敏史者；⑦無神經系統功能異常者；⑧對本文知情同意者。兩組患者的年齡和性別等比較均無明顯差異(均P>0.05)，具有可比性。

二、研究方法

所有患者均給予控制性吸氧、祛痰、糾正電解質紊亂及營養支持等常規治療，并口服0.1 g茶堿緩釋片(修正藥業集團股份有限公司，國藥準字：H22021080，規格：每片0.1 g)治療，2次/d；實驗組患者在此基礎上吸入18 μg噻托溴銨(浙江仙琚制藥股份有限公司，國藥準字：H20090276，規格：每粒18 μg)輔助治療，1次/d，2個月為一個療程。

所有患者于于治療前、治療1周后、1個月后及2個月后采集誘導痰：患者霧化吸入3%高滲鹽水，2 min后采用雙氧水漱口，深咳痰液，收集1 g以上痰液于離心管，以離心半徑8 cm，3 500 r/min離心20 min，于光學顯微鏡下觀察沉淀細胞，記錄痰液炎癥細胞數量，包括淋巴細胞、巨噬細胞、中性粒細胞及嗜酸細胞，采用酶聯免疫吸附法檢測痰上清液MMP-9水平。所有患者于治療前、治療1個療程后于早晨空腹狀態下取3 ml靜脈血，離心后取血清用于檢測相關指標，采用酶聯免疫吸附法檢測血清高遷移率族蛋白1(High mobility group protein 1, HMGB-1)、白細胞介素-8(Interleukin-8, IL-8)及腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor alpha, TNF-α)。

三、統計學方法

結 果

一、兩組患者治療前后痰液炎癥細胞計數比較

治療后兩組患者淋巴細胞和嗜酸細胞均比治療前有所提高，但實驗組巨噬細胞和嗜酸細胞低于對照組(均P<0.05)；兩組治療前后中性粒細胞均無明顯變化(均P>0.05)，見表1。

二、兩組患者治療前后相關炎癥因子水平比較

治療前兩組患者HMGB-1、IL-8和TNF-α水平比較無明顯差異(P>0.05)；經治療后兩組患者HMGB-1、IL-8和TNF-α水平均有所降低，且實驗組患者的降低程度大于對照組(P<0.05)，見表2。

表1兩組患者治療前后痰液炎癥細胞計數比較

表2兩組患者治療前后相關炎癥因子水平比較

三、兩組患者治療前后MMP-9水平變化情況比較

治療前實驗組和對照組的MMP-9水平分別為(719.06±65.12)μg/L和(716.43±68.12)μg/L，兩組相比無明顯差異(t=0.175，P>0.05)；兩組患者MMP-9水平隨著治療時間延長逐漸下降，治療1周后、1個月后及2個月后實驗組MMP-9水平分別為明顯(619.14±63.28)μg/L、(457.21±59.46)μg/L和(368.17±58.17)μg/L，均明顯低于對照組的(673.28±64.04)μg/L、(548.51±61.39)μg/L和(459.68±60.52)μg/L(t=4.252、7.554、7.708，P<0.05)。

四、兩組患者不良反應發生情況比較

實驗組患者治療后出現惡心1例，口干1例，皮疹1例，不良反應發生率為7.32%(3/41)；參照組患者出現惡心1例，聲嘶1例，不良反應發生率為5.26%(2/38)，兩組不良反應發生率比較無明顯差異(χ2=0.008，P>0.05)。

討 論

COPD可導致患者呼吸困難及肺功能下降，具有較高的發病率，目前認為其主要與有害顆粒和氣體導致的異常炎癥反應有關，但相關的發病機制尚未明確[12-14]。對穩定期COPD患者臨床上一般通過常規的抗感染及平喘方式進行治療，但對肺功能的改善效果不理想[15-16]。研究表明，噻托溴銨作為一種長效抗膽堿類藥物，可以有效抑制氣道上的M3膽堿能受體，減少平滑肌張力，起到抑制炎性反應作用，從而可以有效擴張支氣管并減少肺過度充氣[17-19]。

本文將對照組和實驗組分別予以常規治療和吸入噻托溴銨輔助治療，結果顯示，經治療后，兩組淋巴細胞和嗜酸細胞均比治療前有所提高，但實驗組巨噬細胞和嗜酸細胞低于對照組(均P<0.05)；兩組治療前后中性粒細胞均無明顯變化(均P>0.05)。可見經藥物治療后，患者的淋巴細胞和嗜酸細胞被激活，而巨噬細胞和嗜酸細胞得到一定抑制。研究表明，COPD會導致免疫功能紊亂，患者免疫功能普遍下降，而T淋巴細胞作為免疫系統進行自我調節的樞紐，其含量會比健康人有所降低，而巨噬細胞由于直接參與眾多免疫炎性反應大量存在病灶中心及外周氣道中，在COPD的發病機制過程中起著重要作用[20-23]。嗜酸細胞也與該疾病的發病機制相關，但目前有關其在COPD患者中具體的含量情況仍然存在爭議，研究證實COPD患者誘導痰里嗜酸粒細胞及嗜酸細胞陽離子蛋白含量明顯比健康人高[24-25]。本文結果中實驗組巨噬細胞和嗜酸細胞低于對照組，可見噻托溴銨可以有效抑制巨噬細胞和嗜酸細胞，在一定程度上可以改善COPD患者病情。但有關上述痰液炎癥細胞含量的變化是如何具體作用于COPD患者的炎癥過程還有待進一步探討。

研究表明，炎癥因子的大量產生、蛋白酶失衡以及肺組織里彈性基質的降解跟COPD的發生發展密切相關[26-27]。HMGB-1作為一種新型炎癥介質，能夠通過激活中性粒細胞、單核巨噬細胞等途徑來促使患者機體炎癥反應的級聯放大；巨噬細胞和氣道上皮細胞可產生大量IL-8和TNF-α等細胞趨化因子，進一步誘導炎性反應；MMP-9是一種重要的基質金屬蛋白酶，可以將細胞外基質的蛋白降解以破壞肺泡壁并增加氣道重塑，故其含量一旦過高將損害患者肺部組織[28-29]。本文結果顯示，治療后兩組HMGB-1、IL-8和TNF-α水平均有所降低，且實驗組的降低程度大于對照組(均P<0.05)。兩組MMP-9水平隨著治療時間延長逐漸下降，治療1周后、1個月后及2個月后實驗組MMP-9水平明顯低于參照組(均P<0.05)。提示噻托溴銨治療COPD患者可以有效改善炎性反應、降低患者MMP-9水平，與魏曉陽等[30]的研究結果相一致。噻托溴銨具有毒蕈堿受體亞型M1～M5類似的親和力，可以特異性地作用于氣道平滑肌上的M3膽堿能受體，并激活Gαq信號通路的活性進而起到舒張氣道的作用；還可以抑制支氣管粘液分泌，通過降低迷走神經張力來糾正氣道構型，從而減少氣流的限制作用改善肺泡有效通氣量[31]。噻托溴銨的藥效具有專一效應，能夠維持1 d以上，可以更好地減輕患者的炎癥反應，降低對受損氣道的重塑作用以及對肺組織的損害，有利于患者肺功能及呼吸功能的恢復。此外，本文發現治療后兩組患者不良反應發生率均較低，且兩組間比較無明顯差異(P>0.05)，表明噻托溴銨應用于治療COPD患者安全性能良好。

綜上所述，噻托溴銨治療COPD患者能有效改善痰液炎癥細胞計數和相關炎癥因子的表達、降低患者MMP-9水平，且具有較好的安全性，值得推廣應用。